鹿角壯骨膠囊對(duì)股骨頭壞死患者血清BGP，BMP2，TGFβ1，VEGF及骨密度的影響

【摘要】目的觀察鹿角壯骨膠囊對(duì)股骨頭壞死患者血清骨鈣素（BGP）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP2）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGFβ1）、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）及骨密度的影響。方法117例（133髖）股骨頭壞死患者，隨機(jī)分為治療組60例（68髖），口服院內(nèi)制劑鹿角壯骨膠囊治療，對(duì)照組57例（65髖），采用口服仙靈骨葆膠囊。兩組服藥方法為每日3次，每次3粒，每日總劑量450 mg，均以3個(gè)月為1個(gè)療程，共治療2個(gè)療程。兩組分別于治療前后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)患者血清中BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平及采用雙能X線骨密度儀檢測(cè)股骨的骨密度。結(jié)果治療組治療2個(gè)療程后血清BGP、BMP2、VEGF含量水平及股骨頸、股骨粗隆、Ward’s三角骨密度高于對(duì)照組（P<0.01）；而治療組血清TGFβ1水平低于對(duì)照組（P<0.01）。結(jié)論鹿角壯骨膠囊對(duì)股骨頭壞死的治療作用可能與促進(jìn)骨鈣素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子合成及降低轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)水平、改善骨密度有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】鹿角壯骨膠囊；股骨頭壞死；中藥療法；骨鈣素

近年來(lái)研究表明，股骨頭壞死的骨組織的修復(fù)與骨鈣素（bone glaprotein，BGP）[1]、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（bone morphogenetic proteins2，BMP2）[2～3]、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforminggrowth factorbeta1，TGFβ1）[4]及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）關(guān)系密切[5]。鹿角壯骨膠囊是我院骨傷科臨床應(yīng)用多年治療股骨頭壞死的院內(nèi)制劑，具有通經(jīng)活絡(luò)、補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋壯骨的功效。本研究采用鹿角壯骨膠囊對(duì)股骨頭壞死患者進(jìn)行治療干預(yù)，檢測(cè)血清BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量及骨密度的水平，探討鹿角壯骨膠囊治療股骨頭壞死的機(jī)制。資料與方法1.一般資料病例選擇2008年2月～2012年2月在貴州省黔南州中醫(yī)醫(yī)院骨傷科就診的確診為股骨頭壞死的患者117例，按隨機(jī)原則將患者分為兩組，治療組60例（68髖），其中男49例，女11例；年齡28～60歲，平均年齡（46.28±3.27）歲；病程54～216 d，平均病程（69.21±3.59）d；發(fā)病原因：激素性股骨頭壞死13例，酒精性11例，激素+酒精31例，創(chuàng)傷性3例，特發(fā)性2例。按ARCO分期：Ⅰ期10髖，Ⅱ期19髖，Ⅲ期11髖，Ⅳ期28髖。正位分型：A為2髖，B為16髖，C1為27髖，C2為23髖。蛙位分型：A為2髖，B為18髖，C1為25髖，C2為23髖。對(duì)照組57例（65髖），其中男48例，女9例；年齡29～58歲，平均年齡（45.27±3.53）歲；病程46～201 d，平均病程（68.44±3.27）d；發(fā)病原因：激素性股骨頭壞死10例，酒精性9例，激素+酒精35例，創(chuàng)傷性2例，特發(fā)性1例。按ARCO分期：Ⅰ期9髖，Ⅱ期20髖，Ⅲ期7髖，Ⅳ期29髖。正位分型：A為2髖，B為13髖，C1為30髖，C2為20髖。蛙位分型：A為2髖，B為15髖，C1為27髖，C2為21髖。兩組患者性別、年齡、病程、發(fā)病原因、ARCO分期、正位分型、蛙位分型等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.治療方法①治療組：口服鹿角壯骨膠囊（由鹿角霜、黃芪、枸杞、熟地、骨碎補(bǔ)、鍛自然銅、白術(shù)、川芎等藥物組成，0.5 g/粒，由黔南州中醫(yī)醫(yī)院制劑室提供，院內(nèi)制劑），4粒/次，3次/d。②對(duì)照組： 口服仙靈骨葆膠囊（由淫羊藿、續(xù)斷、補(bǔ)骨脂、地黃、丹參、知母組成，0.5 g/粒，貴州同濟(jì)堂制藥股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z20025337，批號(hào)080414099，090211067，100415689，110814027，120915013）4 粒/次，3次/d。兩組均以3個(gè)月為1個(gè)療程，共治療2個(gè)療程。③功能鍛煉[6]：兩組均采用朱氏坐位鍛煉法，配合臀肌收縮，髖伸、屈、外旋、內(nèi)旋、外展、內(nèi)收等動(dòng)作進(jìn)行功能鍛煉，功能鍛煉以自動(dòng)為主，被動(dòng)為輔，運(yùn)動(dòng)量要由小到大，由少到多，循序漸進(jìn)，動(dòng)作要協(xié)調(diào)，逐步增加。以鍛煉后休息1小時(shí)不感到疲勞疼痛為度。以改善血運(yùn)和防止關(guān)節(jié)活動(dòng)障礙，同時(shí)配合皮牽引治療[7]。

3.Harris評(píng)分分別于治療前、治療第1療程、治療第2療程采用Harris評(píng)分方法對(duì)患者疼痛、功能、畸形及活動(dòng)范圍進(jìn)行評(píng)分，總分為100分[8]。

4.指標(biāo)檢測(cè)①BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF檢測(cè)：兩組均在治療前、治療第1療程、治療第2療程取肘靜脈血5 ml，離心后取血清保存在-80℃冰箱內(nèi)待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF的水平。操作按試劑盒（美國(guó)RD公司提供）說(shuō)明進(jìn)行。②骨密度檢測(cè)：分別于治療前、治療第1療程、治療第2療程采用Hologic QDR40000（S/N 55198） 雙能X線骨密度儀，檢測(cè)患者髖部骨密度（股骨頸、股骨粗隆、Ward's三角），單側(cè)患者檢測(cè)單側(cè)，雙側(cè)患者檢測(cè)雙側(cè)，結(jié)果由儀器配套打印機(jī)自動(dòng)打印輸出。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)處理采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行，數(shù)據(jù)均采用（-±s）表示，組間比較先進(jìn)行正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)，方差不齊者采用秩和檢驗(yàn)，符合條件者采用t檢驗(yàn)（兩組間），P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 1.兩組治療前后Harris評(píng)分比較治療前，兩組Harris評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療2個(gè)療程后，兩組Harris評(píng)分均明顯升高，與治療前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且治療組Harris評(píng)分優(yōu)于對(duì)照組（P<0.01）。見表1。

2.兩組治療前后BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平比較治療前，兩組血清BGP、BMP2、TGFβ1及VEGF含量水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療2個(gè)療程后，兩組血清BGP、BMP2及VEGF含量水平明顯升高，與治療前及治療1個(gè)療程比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且治療組優(yōu)于對(duì)照組（P<0.01）；而血清TGFβ1水平，治療1個(gè)療程后兩組較治療前升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），治療第2個(gè)療程后，兩組TGFβ1水平較治療第1個(gè)療程下降（P<0.01），但治療組下降更加明顯（P<001）。見表2。

3.兩組治療前后股骨頭骨密度比較治療前，兩組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療2個(gè)療程后，兩組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度均明顯升高，與治療前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且治療組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度改善優(yōu)于對(duì)照組（P<0.01）。見表3。表2兩組治療前后BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平比較（-±s）時(shí)點(diǎn)治療組（n=60） BGP（ng/ml）BMP2（pg/ml）TGFβ1（μg/L）VEGF（pg/ml）對(duì)照組（n=57） BGP（ng/ml）BMP2討論股骨頭壞死是骨科常見的疑難病癥之一，常常由飲酒、激素、創(chuàng)傷等引起，至今發(fā)病機(jī)理尚未明了。盡管該病在診斷上取得很大進(jìn)展，但在治療上進(jìn)展依然緩慢，特別是藥物治療仍是世界性難題。中醫(yī)認(rèn)為股骨頭壞死屬“骨痹”、“骨蝕”范疇。病后瘀血凝滯，而腎精虧虛，精不生髓，髓不養(yǎng)骨，導(dǎo)致骨失濡養(yǎng)，引起骨細(xì)胞和骨髓細(xì)胞死亡及隨后的修復(fù)，繼而導(dǎo)致股骨頭結(jié)構(gòu)改變，股骨頭塌陷，關(guān)節(jié)功能障礙的疾病?！端貑?wèn)·長(zhǎng)刺篇》曰：“病在骨，骨重不可舉，骨髓酸痛，寒凝名曰骨痹?！庇秩纭端貑?wèn)·痹篇》曰：“五臟皆有合病久而不去，內(nèi)舍于其所合也，故骨痹不已，復(fù)感于邪，內(nèi)舍于腎?！惫时静兖鲅宰?，內(nèi)損肝腎。治宜活血化瘀通痹，兼以補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨。鹿角壯骨膠囊是我院胡建山主任醫(yī)師結(jié)合多年的臨床實(shí)踐篩選出來(lái)的治療股骨頭缺血性壞死的有效中藥制劑。方中鹿角霜、骨碎補(bǔ)、自然銅具有補(bǔ)腎強(qiáng)筋骨，促進(jìn)骨折愈合功能；枸杞、地黃補(bǔ)肝腎、滋陰養(yǎng)血，增強(qiáng)補(bǔ)腎筋骨之功；黃芪、白術(shù)補(bǔ)氣生血，增強(qiáng)機(jī)體痛后康復(fù)的能力；川芎引氣活血，使補(bǔ)而不留瘀之弊。諸藥合用，具有補(bǔ)肝腎、益氣血、強(qiáng)筋健骨之功。標(biāo)本兼治，筋骨并重達(dá)到瘀去、新生、骨修復(fù)的目的。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，BGP是由成骨細(xì)胞產(chǎn)生和分泌的一種非膠原蛋白，主要功能是維持骨的正常礦化速率、抑制異常的羥磷灰石結(jié)晶的形成，促進(jìn)非結(jié)晶鈣磷酸鹽向羥磷灰石轉(zhuǎn)化，提高骨強(qiáng)度[1]。BGP大多沉積于骨基質(zhì)，1/3進(jìn)入血液循環(huán)。血清中骨鈣素濃度可特異性地反映成骨細(xì)胞的活性，是骨形成功能的良好標(biāo)志，血清骨鈣素檢測(cè)可反映股骨頭壞死后伴成骨細(xì)胞的功能狀況[9]。BMP是TGFβ家族中的一個(gè)亞家族，BMP2是BMP家族中一員，可誘導(dǎo)未分化的間充質(zhì)細(xì)胞向軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞分化，并使其表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，在骨組織中創(chuàng)造一個(gè)有利于血管化的環(huán)境[10]。骨組織的再生中，血管再生是關(guān)鍵環(huán)節(jié)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是機(jī)體內(nèi)促進(jìn)血管生長(zhǎng)最重要的生長(zhǎng)因子，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子主要通過(guò)促進(jìn)局部血管增生和成骨細(xì)胞分化而參與了BMP的誘導(dǎo)成骨活動(dòng)[11]，促進(jìn)骨的再生和修復(fù)。

本文結(jié)果顯示：治療2個(gè)療程后治療組血清BGP、BMP2、VEGF含量水平高于對(duì)照組（P<001）。鹿角壯骨膠囊治療股骨頭壞死的療效與BGP、BMP2、VEGF的表達(dá)正相關(guān)，提示BGP、BMP2、VEGF因子含量升高，可提高骨組織修復(fù)能力。本文結(jié)果還顯示：治療組血清TGFβ1水平隨著療程增加而降低，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[12]。結(jié)果表明：鹿角壯骨膠囊能有效改善股骨頭微循環(huán)障礙，其機(jī)制可能為促進(jìn)骨鈣素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)及降低轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)水平，增強(qiáng)股骨頭局部骨密度，促進(jìn)壞死股骨頭的修復(fù)。

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（收稿日期：2013-03-25修回日期：2013-06-10）

（編輯：潘明志英文審校：梁宇）