不同方法炮制的大黃中總蒽醌含量比較

【摘要】中藥經不同輔料、不同方法炮制后，在性味、功效、作用趨向、歸經和毒副作用方面都會發生某些變化，從而最大限度的發揮療效。本文運用HPLC法測定了不同炮制方法的大黃中蒽醌的含量^[1-2]。實驗表明，經不同方法炮制的大黃，游離蒽醌、結合蒽醌含量變化有差異：酒炙大黃結合性葸醌有所減少，大黃素、大黃素甲醚等游離葸醌總量幾乎沒有影響；炒大黃：葸醌減少約50%，結合性葸醌轉化成為游離蒽醌增多；醋炙大黃：總蒽醌、結合型葸醌含量較生品明顯下降，游離型蒽醌含量有所增加；炭炒大黃炭：結合葸醌含量極少，大黃酸含量增加，以上內容為揭示大黃不同炮制品的科學內涵提供實驗依據。

【關鍵詞】大黃；炮制品；游離型蒽醌；結合型蒽醌；液相色譜

大黃為蓼科植物大黃的干燥根及根莖，具有瀉熱通腸、涼血解毒、逐瘀通經等功效。現代研究表明大黃含有蒽類衍生物，包括大黃酸、大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素、大黃素甲醚等，還含有苷類化合物、鞣質類、有機酸類、揮發油類等成分^[1]，常用于便秘及各種急腹癥如急性胰腺炎、急性膽囊炎、腸梗阻；急慢性腎功能衰竭急性感染性疾病及各種菌痢腸炎；各種出血性疾病及胃潰瘍、高脂血癥、病毒性肝炎、子宮內膜異位癥、慢性前列腺炎等疾病的治療。本文以購得的生大黃藥材為原料，按照《中國藥典》、《全國中藥炮制規范》^[10]相關項目下的酒炙、醋炙、蒸制、炒炭等不同炮制方法，運用高效液相色譜法對生大黃以及制備的大黃飲片中游離蒽醌、結合蒽醌的含量進行了定量研究，對大黃蒽醌類成分的藥理活性及其作用機理研究、大黃資源的進一步開發和利用具有重要的價值。

1研究思路及內容

1.1大黃炮制購買市售生大黃，采用酒炙、醋炙、蒸制、炒炭等炮制方法制備不同的大黃炮制品種，用粉碎機將生大黃飲片及各種炮制品制成粉末，并過四號篩備用。

1.2不同炮制品中游離蒽醌、結合型蒽醌的測定購買大黃素、大黃素甲醚（游離型蒽醌）、番瀉苷A（結合型蒽醌）的對照品，制備各對照品貯備液。采用液相色譜法，測定不同炮制品中游離蒽醌、結合型蒽醌的量。

1.3含量比較根據液相色譜測定所得數值，比較不同炮制方法的大黃樣本中游離蒽醌、結合型蒽醌含量的差異。

2研究方法

2.1儀器、材料與藥品

2.1.1儀器高效液相色譜儀（島津公司）；超聲波清洗器（上海超聲波儀器廠）；G3253B恒溫箱；炮制用鍋具；萬能磨粉機；四號篩；精密天平；各種玻璃器皿；回流裝置；水浴鍋。

2.1.2材料與藥品生大黃（飲片，產地甘肅，批號20100917）、黃酒（批號，產地）、米醋（批號，產地），大黃素（以及大黃素甲醚及番瀉苷A購于生物制品檢定所）、甲醇（色譜純）、超純水（自制）、乙腈（色譜純）、冰醋酸。

2.2研究方法

2.2.1對照品溶液的制備精密稱取大黃素、大黃素甲醚、番瀉苷A對照品10mg，分別置50mL棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，分別得到各對照品貯備液，進樣前用0.45μm微孔濾膜濾過。

2.2.2大黃炮制品的制備以購得的大黃藥材為原料，按照《中國藥典》、《全國中藥炮制規范》相關項目下的炮制方法。①大黃生片：購于吉林大藥房（產地甘肅，批號20100917）。②大黃酒炙片：取大黃生片，加入約10%的黃酒拌勻后，悶潤約4-5h，至已加熱的炒藥機中炒干，快速出鍋，攤開，晾涼，篩去碎屑，包裝即得。③大黃醋炙片：取大黃生片，加入約15%的米醋拌勻后，悶潤約4-5h，至已加熱的炒藥機中炒干，快速出鍋，攤開，晾涼，篩去碎屑即得。④大黃熟片：取大黃生片，加入約50%的黃酒拌勻，悶潤至酒被吸盡后，放入蒸鍋中隔水燉至飲片表面黑褐色，內外顏色一致時，出鍋，攤開，曬干，篩去碎屑即得。⑤大黃炭片：取大黃生片，投入已加熱的轉筒式炒藥機中，炒至冒濃黃煙（淡青煙冒出黃煙濃黃煙）時，噴少許清水滅去火星，快速出鍋，攤開，晾涼，篩去碎屑，包裝即得。

2.2.3供試品溶液的制備用萬能磨粉機將生大黃飲片及各種炮制品制成粉末，并過四號篩備用。取生大黃、酒大黃、醋大黃、大黃炭粉末（過40目篩）約0.15克，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液5ml，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10ml，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇使溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，以微孔濾膜（0.45μm）濾過即得。

2.2.4色譜條件Agilent TC C18柱（46mm×250mm，5μm）；流動相乙腈1%，冰醋酸溶液（20：80）；檢測波長410nm；流速10mL·min-1；柱溫35℃。

3結果與討論

3.1結果測定精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，根據測定結果，計算各炮制品種中大黃素、大黃素甲醚及番瀉苷A的含量，測定見表1。