氣相色譜法檢測(cè)寧夏枸杞中聯(lián)苯菊酯殘留量

摘要：以寧夏中寧枸杞為研究對(duì)象，建立了檢測(cè)枸杞中聯(lián)苯菊酯殘留量的毛細(xì)管氣相色譜法。試樣用乙腈提取，過(guò)ＣＡＲＢ／ＮＨ２固相萃取柱，經(jīng)丙酮∕二氯甲烷凈化洗脫，再過(guò)Florisil柱，經(jīng)正己烷∕二氯甲烷淋洗除雜，乙酸乙酯洗脫，正己烷定容，采用ＤＢ－１７０１毛細(xì)管色譜柱分離，ＧＣ－ＥＣＤ進(jìn)行分析。結(jié)果表明，中寧枸杞中聯(lián)苯菊酯含量為０．００２ ２ μｇ／ｇ，ＲＳＤ為３．５５％，樣品加標(biāo)回收率為９２．４７％，ＲＳＤ為１．７０％。該方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確，符合農(nóng)藥殘留分析要求，研究結(jié)果為枸杞質(zhì)量控制提供了一定的參考價(jià)值。

關(guān)鍵詞：枸杞；聯(lián)苯菊酯；氣相色譜法；殘留量

中圖分類號(hào)：Ｏ６５７．７＋１ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號(hào)：0439－８114（２０12）07－1453-03

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ Ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｏｆ Ｎｉｎｇｘｉａ ｂｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

ＬＩ Ｐｅｎｇ，ＨＡＯ Ｆｅｎｇ－ｘｉａ

（Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ Ｂａｓｅ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｇａｓ Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ bｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｉｎ Ｎｉｎｇｘｉａ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ． Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ， ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ＣＡＲＢ／ＮＨ２ ＳＰＥ ｃｏｌｕｍｎ， ａｎｄ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｅｔｏｎｅ－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｅｌｕａｔｅ ｗａｓ ｃｌｅａｎｅｄ ｕｐ ｂｙ ｐａｓｓｉｎｇ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ Florisil ｃａｒｔｒｉｄｇｅ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｗａｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｘａｎｅ－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｅ ｗａｓ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ， ａｎｄ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｘａｎｅ， ｆｉｎａｌｌｙ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ＧＣ－ＥＣＤ ａｆｔｅｒ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ＤＢ－１７０１ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ． Ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｗａｓ ０．００２ ２ μｇ／ｇ and ｔｈｅ ＲＳＤ was ３．５５％． Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９２．４７％ and ｔｈｅ ＲＳＤ was １．７０％． Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｒａｐｉｄ， ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｆｕｌ ｆｏｒ the ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ； bｉｆｅｎｔｈｒｉｎ； gas chromatography（ＧＣ）； ｒｅｓｉｄｕｅ

枸杞為茄科多年生落葉灌木，別名枸杞果、白疙針、旁米布如，是一種名貴的中藥材，主要分布在寧夏、內(nèi)蒙古、新疆等地。寧夏中寧是枸杞原產(chǎn)地，品質(zhì)優(yōu)良，是寧夏第一個(gè)“世界第一產(chǎn)業(yè)”［１］。枸杞是一種很好的保健食品，不僅含鐵、磷、鈣等物質(zhì)，而且還含有大量糖、脂肪、蛋白質(zhì)、多糖、色素和維生素等［２，３］。枸杞有益于健康，但在其種植、加工和貯藏過(guò)程中容易受到一些農(nóng)藥如有機(jī)磷、有機(jī)氯以及擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥的污染［４］。聯(lián)苯菊酯，別名氟氯菊酯，是擬除蟲(chóng)菊酯的一種，由于其殺蟲(chóng)譜廣、效果好、殘留低、無(wú)蓄積作用等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)在枸杞病蟲(chóng)害應(yīng)用非常廣泛。

固相萃取是近年發(fā)展起來(lái)的一種樣品預(yù)處理技術(shù)，可以提高分析物的回收率，更有效地將分析物與干擾組分分離，減少樣品預(yù)處理過(guò)程，操作簡(jiǎn)單、省時(shí)、省力［５，６］。本研究以寧夏中寧枸杞為研究對(duì)象，建立一種簡(jiǎn)單、快捷、高效的聯(lián)苯菊酯殘留量的檢測(cè)方法，采用組織搗碎法對(duì)枸杞試樣中的聯(lián)苯菊酯進(jìn)行提取，運(yùn)用固相萃取技術(shù)對(duì)濃縮液進(jìn)行凈化，凈化后的樣品溶液用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)。研究結(jié)果對(duì)提高寧夏中寧枸杞的安全性及更好地控制寧夏枸杞的質(zhì)量提供一定參考。

１ 材料與方法

１．１ 試驗(yàn)材料

枸杞采自寧夏中寧，常溫下陰干制成干果，于－１８℃下冷凍２４ ｈ，取出立即粉碎，置于具塞聚乙烯瓶中于－１８ ℃下冷凍保存。

聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品（購(gòu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，１００ μｇ／ｍＬ）；乙腈、無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉為分析純；丙酮、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷均為色譜純。取濃度為１００ μｇ／ｍＬ的聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品１ ｍＬ，加入到１０ ｍＬ容量瓶中，用正己烷定容至刻度，即為１０ μｇ／ｍＬ的儲(chǔ)備液。

１．２ 儀器

ＶＡＲＩＡＮ ４５０氣相色譜儀（配有ＥＣＤ檢測(cè)器，美國(guó)瓦里安公司）；超聲波清洗儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；氮吹儀；固相萃取裝置；組織搗碎機(jī)；Ｆｌｏｒｉｓｉｌ固相萃取小柱，ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱（杭州福裕科技服務(wù)有限公司）。

１．３ 試驗(yàn)條件

采用ＤＢ－１７０１色譜柱（３０ ｍ × ０．３２ ｍｍ × ０．２５ μｍ）；進(jìn)樣口溫度：２６０ ℃；檢測(cè)器溫度：３００ ℃；采用程序升溫，初始溫度１８０ ℃，保持１０ ｍｉｎ，以５ ℃／ｍｉｎ升溫至２７０ ℃，保持１０ ｍｉｎ；載氣：氮?dú)猓兌龋荆梗梗梗梗ィ缓懔髁魉伲海保?ｍＬ／ｍｉｎ；分流比：１０∶１；進(jìn)樣量：１ μＬ。

１．４ 試驗(yàn)方法

１．４．１ 樣品提取 稱取粉碎好的枸杞試樣３０ ｇ于１００ ｍＬ燒杯中，加入２０ ｍＬ蒸餾水，振蕩１ ｍｉｎ，然后加入６０ ｍＬ乙腈，用高速組織勻漿機(jī)勻漿１ ｍｉｎ，超聲提取３ ｍｉｎ。過(guò)濾，收集濾液，蓋上塞子，劇烈振蕩１ ｍｉｎ，室溫靜置１ ｈ后，吸取乙腈濾液３０ ｍＬ，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮至近干。

１．４．２ 樣品凈化

１）ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱第一次凈化。用體積比為１∶１的丙酮和二氯甲烷的混合溶液活化ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱。再用３ ｍＬ丙酮和二氯甲烷的混合溶液分３次洗滌上述濃縮后的樣品，并分別把洗滌液吸入ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱，液面達(dá)到柱表面后，再加入淋洗液１２ ｍＬ，收集此淋洗液于５０ ｍＬ平底燒瓶中，濃縮近干，用２ ｍＬ正己烷溶解。

２）弗羅里硅土柱第二次凈化。取弗羅里硅土柱，上層加１．０ ｇ無(wú)水硫酸鈉，先用５ ｍＬ正己烷淋洗，然后加入上述用２ ｍＬ正己烷溶解的濃縮液過(guò)柱，先用５ ｍｌ ５％二氯甲烷／正己烷淋洗除雜，再用１０ ｍＬ 含１０％乙酸乙酯的正己烷洗脫，洗脫液于４０ ℃氮?dú)獯蹈桑樱?ｍＬ正己烷溶解，移入２ ｍＬ自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中，待氣相色譜測(cè)定。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別取不同體積的上述１０ μｇ／ｍＬ的聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用正己烷稀釋配制成一系列溶液，濃度分別為０．０５、０．１、０．３、０．５和１．０ μｇ／ｍＬ，移入２ ｍＬ自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中，采用１．３方法檢測(cè)，以聯(lián)苯菊酯含量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到聯(lián)苯菊酯濃度（ｘ）與峰面積（ｙ）的線性回歸方程：ｙ＝２．２４×１０６ｘ＋２．７９×１０４，相關(guān)系數(shù)為 Ｒ２＝０．９９５ ０。聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖１所示。

２．2 加標(biāo)回收試驗(yàn)

采用標(biāo)樣添加法，在已知含量的樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)品，按１．４方法制備３份不同的樣品溶液，采用１．３方法測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率，結(jié)果如表１所示。

２．3 樣品測(cè)定

按１．４方法平行制備３份樣品溶液，采用１．３方法測(cè)定，計(jì)算樣品中聯(lián)苯菊酯的含量，結(jié)果見(jiàn)表２所示，聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品和枸杞樣品色譜圖見(jiàn)圖２、圖３。

３ 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，寧夏中寧枸杞中的聯(lián)苯菊酯含量為０．００２ ２ μｇ／ｇ，ＲＳＤ為３．５５％。根據(jù)國(guó)家農(nóng)藥殘留檢測(cè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，可判斷此結(jié)果符合要求。樣品中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留濃度未超標(biāo)，對(duì)寧夏中寧枸杞對(duì)外出口無(wú)影響。

分別采用ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱和Florisil柱對(duì)枸杞粗提取液進(jìn)行固相萃取，進(jìn)一步分離、純化及富集，樣品的加標(biāo)回收率為９２．４７％， ＲＳＤ為１．７０％，由此可見(jiàn)，此方法準(zhǔn)確度較高。

本研究采用氣相色譜法測(cè)定枸杞中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留量，方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高、重現(xiàn)性較好、適合枸杞中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留分析。

參考文獻(xiàn)：

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［６］ 賈金平，何 翊，黃駿雄．固相微萃取技術(shù)與環(huán)境樣品前處理［Ｊ］． 化學(xué)進(jìn)展，１９９８，１０（１）：７４－８４．