在園兒童攜帶EV71和CoxA16的調查研究

何 玥 曾斤日 魏煌忠 丁 華 朱淑娥 於艷霞 梁 鴻 朱惠君

1.廣東省深圳市寶安區沙井人民醫院檢驗科，廣東深圳 518104；2.廣東省深圳市寶安區沙井預防保健所，廣東深圳 518104

手足口病（hand,foot,and mouth disease,HFMD）是由多種腸道病毒引起的常見傳染病，好發于5 歲以下的嬰幼兒，全年散發，但秋冬發病率明顯低于春夏季。 其主要傳染源為病人和病毒攜帶者。 目前，國內尚缺乏手足口病防治的基本易感人群流行期和非流行期病原體隱性感染率方面的資料。

手足口病在國內外流行資料表明：手足口病的病原體主要是腸道病毒屬的柯薩奇病毒（coxsackre virus）A 組、B 組以及腸道病毒71 型 （EV71） 等引起手足口病， 最常見的是CoxA16 和EV71。在眾多重癥手足口病病例中，由EV71 引發的比例最高[1-2]。同時手足口病重癥患兒與普通患兒在腸道病毒株流行分布特征和EV71 陽性率均存在顯著性差異[2]。也有專家指出，如果某地的手足口病例中EV71 在所占比例升高，那么重癥手足口病的趨勢也隨之增加。為進一步了解和防治3～5 歲幼兒手足口病，于2010年1月及2010年5月份我們分別開展了在園兒童非流行期和流行期攜帶CoxA16 和EV71 現況進行調查，結果如下。

1 對象與方法

1.1 調查對象

深圳某地在園兒童，中班和小班2～5 歲兒童，非流行期調查176 名，流行期調查216 名。

1.2 調查方法

1.21 抽樣方案 按設計的調查表， 對轄區24 家幼兒園進行評價分級，依次為甲等、乙等、丙等。 按照分層隨機整體抽樣的原理，依照評價等級隨機抽取3 所幼兒園的中班、 小班各一個班的在園兒童。

1.2.2 采樣方法 參照衛生部手足口病預防控制指南（2009年版）的要求，根據人群的實際情況，采集咽后壁和兩側扁桃體拭子，0～4℃保存，2h 內送至實驗室檢測。

1.2.3 檢測方法 采用實時熒光定量PCR， 檢測咽拭樣中的EV71和CoxA16。

1.2.4 分析方法 應用SPSS 13.0 統計包對計數資料進行檢驗，對計量資料進行t 檢驗，P<0.05 為有統計學差異。

1.3 試劑

采樣管采用江蘇康健病毒采樣保存套裝， 實時熒光PCR 試劑購自達安基因股份有限公司。

1.4 儀器

美國ABI 7500 型實時熒光定量PCR 儀。

2 結果

2.1 在園兒童手足口病非流行期與流行期病毒隱性感染率

我們在手足口病流行期和非流行期分別采集固定班級的三家幼兒園中班、小班在園兒童咽拭子。 及時送檢，用羅氏提取液提取RNA，再用實時熒光PCR 儀進行擴增。 流行期在園兒童手足口病毒總感染率是3.4%，隱性感染CoxA16 和EV71 的分別為2.3%、1.1%； 非流行期手足口病毒總感染率為5.5%，CoxA16 和EV71 隱性感染率分別為3.2%、2.3%。 流行期與非流行期同一在園兒童群體手足口病病毒隱性感染總感染率有顯著性差(P<0.05,=1.02)，兩個不同時期隱性感染CoxA16 和EV71 隱性感染率也有顯著性差異（P<0.05, =0.33；P <0.05, =0.77）。

2.2 相同時期不同兒童病毒攜帶情況

對在園兒童咽拭子進行實時熒光定量PCR 檢測，結果見表1。 非流行期手足口病毒總感染率為3.4%，CoxA16 和EV71 隱性感染率分別為2.3%、1.1%，均為外地戶籍。同時不同年齡段、不同性別、不同病原體和不同管理水平幼兒園間無顯著性差異；流行期手足口病毒總感染率為5.5%，CoxA16 和EV71 隱性感染率分別為3.2%、2.3%，均為外地戶籍。經統計表明，不同年齡、不同性別、不同病原體、不同管理水平幼兒園間隱性感染率差異不顯著。

3 討論

手足口病的傳染性強，傳播途徑多，傳播方式多為通過密切接觸。 大量病毒存在于患者和健康者咽部、糞便和泡疹液中，通過飛沫、唾液、糞便、污染的水和食物等經呼吸道和消化道傳染。檢測手足口病病原體的方法主要分為血清抗體測定、 核酸檢測和病毒培養。 從傳染病防控角度來看，核酸檢測檢測是手足口病最有效率的防治手段之一。

表1 深圳市某地手足口病流行期和非流行期在園兒童攜帶EV71 和CoxA16 情況

手足口病病原體檢材中，常見的有咽拭子、皰疹液、糞便。在各類樣品中，糞便檢材最為常見，但在感染初期，咽拭子檢材的病毒核酸檢出率最高[3]。王敬軍等人提出咽拭子標本在手足口病疫情的監測中具有方便、快捷的優點，且檢出率較高[4]。本調查認為在評價集體在園兒童病毒隱性感染率時， 在采集手足口病標本過程中，咽拭子是比較理想的檢測樣和采樣方式。

手足口病常年均可發生，夏秋季多見，尤其是5～8月為感染高峰期。但不同地方出現流行高峰會有不同。據歷年傳染病資料顯示：手足口病在深圳是每年3～4月份開始增多，到5～6月會達高峰期或稱易流行期；冬春季較少發生，稱頭年12月到次年2月份為非流行期。 我們分別于1月和5月集中采樣，檢測結果可表明深圳某地當年手足口病在流行期與非流行期，在園兒童CoxA16 和EV71 隱性感染率差異均不顯著。

不同年齡人群均可感染手足口病，但常在嬰幼兒造成暴發，好發于5 歲以下小兒，且3 歲以下發病率最高[5]。 手足口病易發生托幼機構集體感染，我們調查的對象為2-5 歲在園兒童，其在流行期和非流行隱性感染手足口病病毒差異顯著（P<0.05, =1.02）。

手足口病是自限性疾病，預后良好，但也可出現嚴重并發癥，病情進展快，治療不及時可引起死亡，已嚴重影響嬰幼兒健康。 迄今尚無特異而高效的抗手足口病病毒藥物和公認的有效疫苗[6]。 因此加強監測，做好預防控制工作尤為重要，具體措施如下：①加強監測，提高監測敏感性；②做好疫情報告，及時發現患者，采取預防措施，防止擴散；③加強醫療機構的預檢分診，預防醫源性傳播；④加強托幼機構的晨檢，發現病例及時隔離治療，加強兒童餐飲具、玩具、文具、被褥等用品及活動場所的消毒，培養并監督兒童養成良好衛生習慣，加強營養，合理鍛煉，增強免疫力；⑤加強對群眾預防知識的宣傳教育工作。

[1] Chen SC,Chang HL,Yan TR,et al.An eight-year study of epidemiologic features of enterovirus 71 infection in Taiwan[J].Am J Trop,Med Hyg,77(1):188-191.

[2] 吳亦棟,尚世強,陳志敏,等.手足口病病原體流行特征分析及臨床意義[J].中華兒科雜志,2010,48(7):535-539.

[3] 王敬軍,王麗,田小平,等.5676 例手足口病病例分析[J].中華疾病控制雜志,2008,12(6):567-569.

[4] 汪照國,劉曉琳,于萍,等.咽拭子標本對手足口病疫情監測的應用研究[J].預防醫學論壇,2008,14(8):761-763.

[5] Lum Lc,Wong KT,Lam SK,et al.Fatal enterouirus 71 encephalomyelitis[J].J Pediatr,1998,133(6):795-798.

[6] 萬朝敏,徐愛麗.手足口病的研究進展[J].中華婦幼臨床醫學雜志,2009,5(2):106-107.