內臟高敏感大鼠結腸Cajal間質細胞C-KIT表達增加

丁瑞峰，王愛魚，王宏杰，郭元虎，趙鵬程

(包頭醫學院第一附屬醫院消化科，內蒙古包頭014010)

功能性胃腸病(functional gastrointestinal disorders，FGIDs)是以消化系統癥狀為臨床表現，而應用生化、影像學和內鏡檢查等并未發現器質性病變的一類胃腸道疾病［1］。認為其發病與內臟感覺、炎性反應、腸神經系統甚至中樞神經系統調節功能等因素有關，而內臟高敏感是功能性胃腸病癥狀產生的主要原因之一。Cajal間質細胞(interstitial celIs of cajal，ICC)被認為是胃腸慢波的起搏細胞，是調節胃腸運動的重要環節［2］。本研究通過直腸注射冰醋酸建立內臟高敏感大鼠模型［3－4］，探討ICC在內臟高敏感中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級新生Wistar大鼠［內蒙古大學實驗動物中心提供，生產許可證號:SCXK(蒙)2007-0001］，每8～10只與其母鼠共同飼養在同一箱內，發育至25 d后，將母鼠與幼鼠分離。分離后的大鼠雌雄分離，每4只∕籠，給予足夠的食物、水。所有大鼠均在安靜室溫下飼養，晝夜控制為12 h周期。C-KIT一抗和 β-actin為兔多克隆抗體(武漢博士德公司)，二抗為辣根酶標記山羊抗兔IgG(北京中杉金橋公司)。

1.2 方法

1.2.1 動物模型的建立:參照文獻［3－4］，新生大鼠16只隨機分為2組，對照組大鼠自出生后8～21 d每日上午將石蠟油潤滑后的連續硬膜外導管(直徑1.0 mm)緩慢經肛門插入0.5～1.0 cm，注入0.9%氯化鈉注射液0.3～0.5 mL，實驗組注入0.6%冰醋酸溶液0.3～0.5 mL。從第21天后不進行任何實驗操作。

1.2.2 腸道敏感性評估:8周齡時行直腸擴張(colorectal distention，CRD)，觀察大鼠腹部撤離反射(abdominal withdrawal reflex，AWR)評分。清醒狀態下，將石蠟油潤滑后的8F導尿管經肛門插人，氣囊末端距離肛門1.0 cm。用膠布把導管和大鼠尾巴根部纏在一起，固定氣囊，將其放在特制的透明塑料籠(20 cm×8 cm×8 cm)內，大鼠在此籠內只能前后運動，不能轉身。……