高效液相色譜法測定保健食品中洛伐它汀的含量

黑龍江 王守萃

洛伐它汀是八十年代上市的新型調整血脂藥，由于其獨特的療效，被譽為治療心血管系統疾病的里程碑，深受廣大患者的歡迎。洛伐他汀最適于治療高膽固醇血癥，尤其伴有LDL增高患者（型)，是首選的調脂藥。混合型高脂血癥也可用，也可用于腎病或糖尿病伴有高膽固醇血癥患者。對顯著增高的高甘油三酯血癥和乳糜微粒血癥效果較差。與膽汁酸螯合劑合用，可增強降膽固醇效應。本實驗采用高效液相色譜法來測定保健食品中洛伐它汀的含量。

一、實驗部分

（一）儀器、試劑及色譜條件

1.高效液相色譜，帶可變波長紫外檢測器；

色譜柱：C18柱，4.6mm×250mm，5μm，柱溫：30℃。

檢測器：紫外檢測器，檢測波長238nm。

流動相：甲醇（色譜純）:水=80:20。

流速：1.0mL/min。

靈敏度：0.002 AUFS。

進樣量：10μL。

2.電子天平（0.0001g）；

3.超聲振蕩器；

4.洛伐它汀標準儲備液：精密稱取0.0100 g洛伐它汀標準物質用甲醇溶解定容至10mL，此溶液每毫升含洛伐它汀1.0mg，該溶液在（0℃～4℃）條件下保存期為兩個月。

洛伐它汀標準使用液：吸取洛伐它汀標準儲備液5mL于50mL容量瓶，加甲醇至刻度，然后分別吸取此液0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL于10mL容量瓶中，各加甲醇至刻度，即得洛伐它汀0.00μg/mL、5.00μg/mL、10.00μg/mL、25.00μg/mL、50.00μg/mL的標準液系列。

（二）測定方法

1.標準曲線法

（1）標準曲線的繪制

分別進樣含洛伐它汀 0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL的標準液各10μL，進行HPLC分析，然后以峰面積為縱坐標，以洛伐它汀的含量為橫坐標，繪制標準曲線。（圖1）。

圖1 洛伐它汀標準曲線

（2）樣品測定方法

取樣品10 g，研磨，混勻，備用。

取上述樣品1.000 g放入10mL的具塞比色管中，加入甲醇至10mL刻度線，超聲提取5min，靜置10min，過濾膜，待測。

吸取處理后的試樣溶液10μL進行HPLC分析，測定其峰面積，從標準曲線查得測定液中洛伐它汀的含量。

（3）結果計算

樣品中洛伐它汀含量（mg/kg）按式（1）計算：

式中：

X—樣品中洛伐它汀的殘留量，單位為毫克每千克（mg/kg）；

C—從標準曲線上查得測定液中洛伐它汀的含量，單位為毫克每升（mg/L）；

V—樣品定容體積，單位為毫升（mL）；

m—試樣質量，單位為克（g）。

二、實驗結果和討論

（一）方法線性考察

將標準系列進樣，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，計算其相關系數r=0.9999。說明本方法具有良好的線性相關性。數據見表1。

表1 標準系列數據一覽表

（二）方法精密度測量

濃度為11.6mg/l的洛伐它汀溶液平行測定6次，求出其標準偏差和變異系數，結果見表2，其標準偏差為6324.27，變異系數為2.22%。說明本方法有較好的測量精度。

表2 平行測定結果一覽表

（三）方法回收率

從實驗可知選用空白樣品進行添加洛伐它汀回收率試驗。不同添加水平回收率分別為86.34%-93.59%，表中回收率數值為三次平行測定結果的平均值，洛伐它汀在空白試樣中的回收率如下表3。

其中回收率計算公式：

式中：B———方法回收率(%)；

C實測———通過實驗測得的濃度；

C添加———添加的洛伐它汀的濃度。

表3 洛伐它汀在保健品中的回收率

三、結論

（一）以高效液相色譜法測定保健食品中洛伐它汀含量，準確度較高。

（二）本方法線性相關性r=0.9999，變異系數為2.22%，回收率達86%以上。