致仔豬腹瀉大腸桿菌的耐藥性與質粒譜分析

劉玉芹，陳翠珍，楊彩然，賈青輝，董淑珍，李 蓉，鄭新羽，房 海

(河北科技師范學院動物科技學院，河北省預防獸醫學重點實驗室，河北秦皇島，066600)

抗菌藥物是目前防治仔豬大腸桿菌性腹瀉病的主要手段，因此出現了大腸桿菌耐藥譜不斷擴大，多重耐藥情況非常嚴重的現象。細菌通過質粒的接合、轉化、轉導等方式獲得新的耐藥性是造成耐藥現象嚴重的一個重要原因［1］。大腸桿菌是可由質粒介導產生耐藥性的細菌之一，可攜帶含有多種耐藥表型的R質粒，并進行橫向傳播，從而造成耐藥性的菌間傳遞，給疾病的防控帶來困難［2］。因此，對菌株的耐藥性及質粒特征的研究有助于預防和控制細菌耐藥性的發生和蔓延。本試驗對分離自河北省5個不同市縣的12株豬源大腸桿菌進行了15種抗生素的耐藥性檢測，并提取質粒，進行了耐藥譜和質粒譜型的比較分析，探討大腸桿菌耐藥性與質粒圖譜之間的關系。

1 材料與方法

1．1 試驗菌株及質控菌株

2009年分離自河北省滄州、石家莊無極、石家莊正定、邯鄲、衡水等不同地區的已經過系統鑒定、致病性檢驗和藥敏試驗的豬源大腸桿菌12株。質控菌株:ATCC25922由河北科技師范學院預防獸醫學重點實驗室保存。

1．2 培養基及藥品試劑

15種藥敏紙片購自杭州天和微生物試劑有限公司;LB肉湯、MH肉湯、MH瓊脂和麥康凱瓊脂購自北京陸橋技術責任有限公司;λDNA/HindⅢMarker、Goldview、瓊脂糖、Tris等購自東盛生物有限公司;質粒小提試劑盒購于康為世紀生物科技有限公司?！?br>