河北省新樂(lè)市羊梨形蟲(chóng)分子檢測(cè)

陳麗鳳，張香齋，王秋悅，劉朋朋，王思偉，鄒亞學(xué)

(河北科技師范學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北秦皇島，066600)

梨形蟲(chóng)病是一類經(jīng)硬蜱傳播，由梨形蟲(chóng)綱巴貝斯科或泰勒科原蟲(chóng)引起的血液原蟲(chóng)病的總稱。迄今為止，全世界已記載的各種哺乳動(dòng)物的巴貝斯蟲(chóng)有67種，泰勒蟲(chóng)有13種［1］。羊梨形蟲(chóng)病是世界性分布的嚴(yán)重危害養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的一類重要疾病。該病主要呈地方性流行，危害嚴(yán)重，可引起羔羊和外地引進(jìn)羊大量死亡，使慢性發(fā)病的羊發(fā)育遲緩，產(chǎn)肉量和產(chǎn)毛量顯著下降，從而給養(yǎng)羊業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失［2，3］。筆者對(duì)采自河北省石家莊地區(qū)新樂(lè)市某羊場(chǎng)的羊進(jìn)行梨形蟲(chóng)檢測(cè)，以便了解和掌握該地區(qū)羊自然感染梨形蟲(chóng)情況，為預(yù)防該病提供參考。

1 材料與方法

1．1 材料

1．1．1 試驗(yàn)動(dòng)物 31只小尾寒羊，引自河北省新樂(lè)市某羊場(chǎng)。

1．1．2 主要試劑 PCR相關(guān)試劑，2×Taq MasterMix(北京康為世紀(jì)生物科技有限公司);PCR所用引物，GoldViewTM核酸染料，DM2000，血液基因組提取試劑盒，由北京賽百盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供與合成。

1．1．3 儀器設(shè)備 高壓滅菌器(YXQ－LS－18SI，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司)，超純水純化系統(tǒng)(Milli－Q Gradient，法國(guó)Millproe)，電子分析天平(YP601N，上海天平廠)，超級(jí)恒溫水浴箱(601型，金壇市醫(yī)療儀器廠)，高速臺(tái)式離心機(jī)(TGL－16G，上海安亭科學(xué)儀器廠)，可調(diào)微量移液器(0．5 ～10 μL，10 ～100 μL，100～1 000 μL，德國(guó)普蘭德)，PCR 儀(Mastercycler gradient，德國(guó) Eppendorf公司)，微波爐(MC－2480EGR，青島海爾集團(tuán))，雙穩(wěn)定時(shí)電泳儀(DYY－6C型，北京六一儀器廠)，凝膠成像分析系統(tǒng)(BIO－BEST200E，美國(guó)SIM)。以上儀器設(shè)備均由河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。……