不帶電荷極性氨基酸對兔肝中堿性磷酸酶活性的影響

張艷英，關學敏

(河北科技師范學院動物科技學院，河北省預防獸醫學重點實驗室，河北秦皇島，066600)

堿性磷酸酶(alkalinity phosphoric簡稱AP)是一種能催化多種磷酸脂類化合物并能水解釋放無機磷的酶，廣泛存在于動物血液和各種器官內，在骨骼形成以及脂肪合成過程中起重要作用，己作為動物生理活動和疾病診斷的一項重要指標［1］，如當雞發生佝僂癥時血清的堿性磷酸酶活性異常升高［2］。它還是一種底物專一性較低的磷酸單脂酶，在生物體內直接參與了磷酸基團的轉移和代謝過程，維持體內適宜的鈣磷比例，并且在脊椎動物的骨化過程中發揮了重要作用［3，4］。為了滿足生產實踐上的需要，國內以雞組織為材料來分離純化AP并對其性質進行分析的研究工作即已有很多［5，6］，筆者在此基礎上進一步研究幾種不帶電荷極性氨基酸對兔肝中AP活性的影響。

1 材料與方法

1．1 試驗材料及試劑

1．1．1 試驗器材 冷凍離心機(型號GL-20G-Ⅱ，購自上海安亭科學儀器廠)，722分光光度計(型號ST-20606010601，購自上海精密儀器有限公司)。

1．1．2 試驗試劑及其配制 新鮮兔肝(河北科技師范學院動物科技學院試驗室提供)，0．5 mol/L醋酸鎂溶液，0．1 mol/L 醋酸鈉溶液，0．01 mol/L 醋酸鎂-0．01 mol/L 醋酸鈉溶液，Tris-HCl pH 8．8 緩沖液，酚標準溶液，40 mmol/L底物溶液，酶液:D管稀釋5倍，0．5 mol/L氫氧化鈉溶液，質量濃度為3 g/L的4-氨基安替比林(AAP)溶液，質量濃度為5 g/L的鐵氰化鉀溶液，Folin-酚試劑甲，Folin-酚試劑乙，10 mmol/L的甘氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺和絲氨酸。

標準蛋白質溶液:取結晶牛血清白蛋白溶于蒸餾水，質量濃度為250 mg/L。……