抗菌肽對蘆花雞血清激素水平的影響

馬 倩趙衍銅柏明娜韓文瑜馮 新張芳毓王貴平牛淑玲

(1.吉林大學畜牧獸醫學院，吉林長春 130062；2.吉林省農業科學院，吉林長春130062；3.廣東省現代農業集團有限公司，廣東廣州 510000)

在現代家禽的飼養過程中，抗生素的大量使用嚴重影響著禽產品的質量安全，威脅著人類的身體健康。目前，很多國家和地區已開始控制抗生素的使用，積極研發抗生素的替代品。抗菌肽是宿主先天性免疫防御系統產生的一類抵抗外界病原體感染的小分子陽離子肽類生物活性物質，是先天性免疫的重要效應分子[1]。據報道，與傳統抗生素相比，抗菌肽具有抗菌活性強，無耐藥性、無殘留等優點，可以成為抗生素的替代品[2]。研究發現，飼喂動物腸道來源的抗菌肽可以調節雞的體液免疫反應，改善小腸黏膜結構，增強小腸消化吸收能力，進而促進雞的生長并提高飼料利用率[3-4]。但是，抗菌肽在畜牧生產中的實際應用還存在很多問題，例如抗菌肽的生產工藝，抗菌肽的作用機理，抗菌肽對畜禽生長的影響。酵母菌是微生態制劑中相當重要的成員，酵母細胞含有豐富的氨基酸、蛋白質、微量元素、維生素、核酸以及各種消化酶。研究表明,酵母菌應用于多種復合微生態制劑中,有利于家禽生產。但是,酵母菌和抗菌肽的復合使用少見報道。

蘆花雞是吉林省較為原始的肉蛋兼用雞種，具有繁殖性能好、耐粗飼、肉質好等優點。但由于其生長速度較慢，發展十分有限。因此，本試驗通過研究抗菌肽及由抗菌肽和酵母菌組成的抗菌肽制劑對蘆花雞生產性能和血清激素水平的影響，初步探討抗菌肽的作用機制，為抗菌肽的合理利用提供理論依據，并促進吉林省蘆花雞的發展。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

抗菌肽及抗菌肽制劑：由吉林大學畜牧獸醫學院預防獸醫學系自主研制。抗菌肽是中國鱟基因工程抗菌肽，由畢赤酵母菌分泌表達，通過離心分離上清液和菌體，將上清純化得到本試驗所用的抗菌肽，回收的酵母菌作為抗菌肽制劑的成分之一。抗菌肽高效表達酵母菌微生態制劑主要成分是純化的抗菌肽和畢赤酵母活菌。通過前期飼養試驗的結果分析，篩選出最佳添加水平：每千克日糧中添加0.1 g鱟素抗菌肽；每千克日糧中添加由0.1 g鱟素抗菌肽和5×107個酵母活菌組成的抗菌肽制劑。

1.2 試驗動物及管理

選用900只1日齡健康蘆花雞為試驗對象，隨機分成3組，每組3個重復。試驗各組飼養條件一致，管理方式相同。試驗雞采用3層立式籠養，自然光照和通風。飼養全過程自由采食和飲水。免疫措施按照雞場的常規免疫。試驗期為90 d，自1 d開始試驗。

1.3 基礎日糧組成及營養水平（見表1）

表1 基礎日糧組成及營養水平(風干基礎)

1.4 試驗設計

試驗采用單因子設計，對照組（基礎日糧），試驗Ⅰ組（基礎日糧+0.1 g/kg抗菌肽），試驗Ⅱ組（基礎日糧+0.1 g/kg抗菌肽+5×107個/kg酵母活菌）。

1.5 測定指標與方法

1.5.1 生產性能的測定

試驗雞以組為單位，統計初生重、90日齡體重、平均日增重、料肉比。記錄雞群在試驗期的健康狀況、死亡只數，成活率等。

1.5.2 血清激素水平的測定

試驗至 14、28、42、56、70、84 日齡時，分別從每重復隨機取4只試驗雞，翅靜脈采血5～6 ml，將血樣在3 000 r/min下離心10 min，分離血清，-80℃冰箱保存。在吉林大學中日聯誼醫院核醫學科檢測14、28、42、56、70、84 日齡血清生長激素（GH）水平，14、42、84日齡血清三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)水平，檢測儀器為中國科大中佳公司自動放免儀。用雙抗夾心雞IGF-I ELISA試劑盒法測定84日齡血清類胰島素生長因子-I（IGF-I）水平，ELISA試劑盒購自北京鼎國生物技術有限公司。

1.6 數據處理

用Excel軟件整理試驗數據，利用SPSS16.0軟件進行方差分析,LSD法進行組間差異顯著性檢驗，試驗數據以平均值±標準誤表示。

2 結果與分析

2.1 對蘆花雞生產性能的影響（見表2）

表2 日糧添加抗菌肽對蘆花雞生產性能的影響

由表2可知，各組試驗雞的初生重差異不顯著(P＞0.05)；試驗結束時（90 d），試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組的體重分別較對照組提高 6.00%(P＜0.01)、11.67%(P＜0.01)，且試驗Ⅱ組極顯著高于試驗Ⅰ組(P＜0.01)；在整個試驗階段，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組的平均日增重分別較對照組提高 6.10%(P＜0.01)、11.89%(P＜0.01)，且試驗Ⅱ組極顯著高于試驗Ⅰ組(P＜0.01)；試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組的料肉比分別較對照組降低9.70%(P＜0.01)、15.76%(P＜0.01)，且試驗Ⅱ組極顯著低于試驗Ⅰ組(P＜0.01)；試驗Ⅰ組蘆花雞成活率與對照組持平，試驗Ⅱ組較對照組略高 0.67%(P＞0.05)。

2.2 對蘆花雞血清GH的影響（見表3）

表3 日糧添加抗菌肽對蘆花雞血清GH的影響(ng/ml)

由表 3 可見,14、28、42 日齡時,與對照組比較,試驗Ⅰ組血清GH水平分別提高了43.14%、2.35%、10.53%；56、70、84日齡時，試驗Ⅰ組血清GH水平分別降低了7.94%、4.76%、9.41%;與對照組相比,試驗Ⅱ組血清GH水平在14、28、56、70日齡時分別降低了3.92%、8.24%、14.29%、24.76%，在42、84日齡分別提高了6.58%、17.65%；在不同日齡階段，各組間血清GH水平差異均不顯著(P＞0.05)。

2.3 對蘆花雞血清甲狀腺激素的影響（見表4）

由表4可見，14日齡時，試驗組T3水平與對照組無顯著性差異，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組血清T4水平分別較對照組提高 40.37%（P＜0.05）、88.52%（P＜0.01），且試驗Ⅰ組與試驗Ⅱ組T4水平差異極顯著（P＜0.01）；42日齡時，試驗組T4水平與對照組無顯著性差異，試驗Ⅱ組T3水平較對照組顯著降低了34.33%(P＜0.05)，且試驗Ⅰ組與試驗Ⅱ組T3水平差異極顯著（P＜0.01）；84日齡時，試驗組T3、T4水平與對照組相比，均無顯著性差異。

表4 日糧添加抗菌肽對蘆花雞血清甲狀腺激素的影響(ng/ml)

2.4 對蘆花雞血清IGF-I水平的影響（見表5）

由表5可見，試驗Ⅰ組血清IGF-I水平較對照組顯著提高了18.85%(P＜0.05)，試驗Ⅱ組與對照組無顯著性差異。

表5 日糧添加抗菌肽對蘆花雞血清IGF-I水平的影響(ng/ml)

3 討論

3.1 日糧添加抗菌肽對蘆花雞生產性能的影響

本試驗結果表明，在日糧中添加抗菌肽對蘆花雞有一定的促生長作用。王阿榮等[5]研究表明，飼料中添加適量的天蠶素抗菌肽能夠提高斷奶仔豬平均日增重，顯著降低料重比。梁潔等[6]用抗菌肽飼喂肉雞發現抗菌肽能提高肉雞的存欄率，增加肉雞體重和降低料肉比。上述研究與本試驗結果一致，說明抗菌肽能提高蘆花雞的生產性能，且抗菌肽制劑的飼喂效果更好，這可能是因為其含有的酵母活菌發揮了作為益生菌和益生元的部分作用。

3.2 日糧添加抗菌肽對蘆花雞血清激素水平的影響

家禽的生長發育受到體內很多激素的調節，例如垂體釋放的生長激素（GH)，肝臟分泌的胰島素樣生長因子（IGFs），甲狀腺分泌的甲狀腺激素（T3、T4）。營養是影響體內激素分泌的重要因素，營養成分和營養水平可以通過改變體內激素的分泌，發揮對生長發育的調節作用[7]。

GH是調控整個機體最重要的激素，是由垂體合成和分泌的一種多肽類物質。GH控制著動物肌肉和脂肪的生長、代謝和沉積。對于禽類，GH的作用較為復雜，血清GH水平受多種因素的調控，血清GH的水平和動物的生長速度并不相對應。本研究顯示，與對照組相比，試驗組的血清GH水平無顯著性差異。這說明日糧添加抗菌肽對蘆花雞血清GH水平無顯著影響。

甲狀腺激素在動物機體內發揮著調節機體代謝和生長發育等機能的重要作用，包括三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)兩類。研究表明，在調節動物生長方面甲狀腺激素與生長激素表現為協同作用。在生物體內,T4脫碘后轉化為T3才能發揮調節代謝的作用。主要由肝臟分泌的IGF-I是GH促生長作用的介導者,對動物的促生長效應具有重要作用。據報道,IGF-I在動物血清中的水平與體增重呈正相關[8]。陳曉生等[9]研究發現抗菌肽使肉鴨血清中T3、IGF-I水平升高，T4降低。劉忠淵等[10]報道新疆家蠶抗菌肽能提高28日齡雛雞血清T3水平、顯著降低血清T4水平，顯著降低56日齡雛雞血清T3水平，提高血清T4水平。上述報道說明抗菌肽對禽類血清T3、T4水平能產生一定的影響。本試驗結果顯示：抗菌肽能顯著提高14日齡T4水平(P＜0.05)、84 日齡 IGF-I水平(P＜0.05)，抗菌肽制劑能極顯著提高14日齡T4水平（P＜0.01）、顯著降低42日齡T3水平(P＜0.05)。這表明抗菌肽使甲狀腺激素的代謝活動增強，肝臟分泌的IGF-I增加，進而促進蘆花雞的生長發育，提高了蘆花雞的生產性能。從本次試驗甲狀腺素T3、T4水平的變化看，其變化趨勢與上述報道不同，這可能與實驗動物的種屬及抗菌肽的種類有關。

4 結論

日糧中添加適量的抗菌肽對蘆花雞的生長和提高飼料轉化率有明顯的改善作用；抗菌肽可以使部分代謝激素的活動增強，促進蘆花雞的生長和發育。

[1]黎觀紅,洪智敏,賈永杰,等.抗菌肽的抗菌作用及其機制[J].動物營養學報,2011,23(4)：546-555.

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[4]WANG D,MA W,SH E R,et al.Effects of swine gut antimicrobial peptides on the intestinal mucosal immunity in specific-pathogenfree chickens[J].Poultry Science,2009,88(5):967-974.

[5]王阿榮,敖長金,宋青龍,等.日糧中添加天蠶素抗菌肽對斷奶仔豬生產性能和血液生化指標的影響[J].飼料工業，2011(10)：.

[6]梁潔,李運南,董加喜.抗菌肽飼喂肉雞的應用研究[J].現代食品科技，2009(4):416-419.

[7]郭立國,王麗輝,黃學軍.雞的營養與生長軸激素[J].飼料博覽.2004(6):26-27.

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[9]陳曉生,劉為民,溫劉發,等.抗菌肽替代抗生素對肉鴨生產性能及血清代謝激素水平的影響[J].中國家禽，2005(5):7-9.

[10]劉忠淵,徐濤,王啟貴,等.新疆家蠶抗菌肽對雛雞生長性能及血清激素、理化指標的影響[J].中國家禽，2007(22):16-19.