維持性血液透析患者血清誘導人臍靜脈內皮細胞凋亡

王喜超，涂陽科，呂鳳巖

(天津市第一中心醫院腎內科，天津 300192)

在以往的研究中發現血液透析患者有血管新生［1-2］，本研究的前期中也發現血液透析患者血清體外可以誘導血管新生［3］，并且氧化應激是導致血管新生的一個因素［4］。尿毒癥血液透析患者更容易出現嚴重的心血管并發癥，新生血管的喪失而導致的血管功能代償不全可能為其原因之一。細胞凋亡是細胞的程序性死亡［5］，內皮細胞凋亡可能參與了尿毒癥患者新生血管的喪失。而目前未見相關文獻報道。本研究通過體外實驗，對其進行了初步探討。

1 材料與方法

1.1 對象

選取天津市第一中心醫院1998年09月至2008年10月的11例維持性血液透析患者及相同時期10例健康志愿者，所有對象均簽署知情同意書。血液透析患者平均年齡(63.2±4.4)歲，原發病為慢性腎炎、高血壓腎病和多囊腎等。所有患者均用碳酸鹽透析，每周透析3次，每次4.0 h。采用二醋酸纖維素膜透析器。健康對照組平均年齡(58.3±5.1)歲，均為健康志愿者。兩組的年齡、性別組成無統計學差異。

1.2 方法

1.2.1 血清的制備:透析患者在透析中動脈端采血，同時正常對照組清晨空腹采血，取血后立即低溫離心(4 000 r/min，20 min)，取上層血清 -70℃保存備用。分別把透析患者血清及健康志愿者血清混合進行實驗。

1.2.2 內皮細胞培養及實驗分組:HUVECs由重慶醫科大學組胚教研室惠贈(來源于美國ATCC公司)，內皮細胞常規培養于含100 mL/L胎牛血清(杭州四季青公司)的RPMI 1640培養基(Gibco公司)，置于37℃ 5%CO2培養箱中孵育。細胞分為實驗組和對照組，實驗組用含100 mL/L透析患者血清的RPMI 1640培養基，對照組用含100 mL/L健康志愿者血清的RPMI 1640培養基。……