GSTT1基因型和吸煙狀況與肺癌易感性關系

劉京男，周彩存，樸紅梅，安昌善*

(1.延邊大學附屬醫院呼吸內科，吉林延吉133000;2.上海市肺科醫院腫瘤科，上海市 200433)

不同個體對環境致癌劑的易感性存在明顯差異，這與腫瘤易感基因的結構和功能不同有密切關系。GSTT1基因有調節遺傳毒性物質的生物學效應，其多態性會影響人類患癌癥的危險性。GSTT1基因多態性與肺癌的關系存在差異［1－2］。本研究旨在通過檢測吸煙、非吸煙肺癌患者和正常人GSTT1基因多態性，探討GSTT1基因多態性與肺癌遺傳易感性的關系及GSTT1基因多態性和吸煙在肺癌易感性中的交互作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象

肺癌組共100例(鱗癌29例，腺癌40例，腺鱗癌13例，小細胞肺癌18例)，未經放療和/或化療。對照組共135例，為健康人群。肺癌組及對照組均為漢族人，無遺傳性疾病。比較肺癌組和對照組的年齡、性別及吸煙狀況均無顯著性差異(表1)。

1.2 標本采集與保存方法

分別抽取肺癌患者及健康體檢者外周靜脈血3 mL及2 mL置于加有肝素的抗凝試管內，轉入4℃冰箱短期保存備用或直接提取DNA。

1.3 基因組DNA提取

采用血液基因組DNA提取試劑盒(上海超世生物科技有限公司)提取外周血DNA，取所提取的基因組DNA約5 μL進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

1.4 GSTT1基因檢測

合成GSTT1和內對照組β-Globin引物(北京賽百盛(SbS)基因技術有限公司合成)，配制PCR反應液。GSTT1基因 PCR反應條件:94℃預變性4 min，94 ℃ 變性30 s，56 ℃ 退火1 min，72 ℃ 延伸30 s，共30個循環，72℃再延伸7 min。取 PCR擴增產物10 μL在1.5%的瓊脂糖凝膠中進行電泳，經1%溴化乙錠(EB)染色，紫外光下觀測結果，并于凝膠掃描成像系統攝像保存。……