苦瓜多糖提取工藝的優(yōu)化及其抗氧化活性

馬景蕃　江燁等

摘要：采用水提醇沉法提取苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）中的多糖，在單因素試驗的基礎(chǔ)上設(shè)計正交試驗考察提取過程中提取溫度、提取時間、料水質(zhì)量比和Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇對多糖提取率的影響，并對所提取苦瓜多糖的抗氧化活性進(jìn)行了檢測。結(jié)果表明，最佳提取工藝為提取溫度９０℃、提取時間２ｈ、料水質(zhì)量比１∶３５、Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇＝１∶４.0。苦瓜多糖對1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（ＤＰＰＨ·）和超氧陰離子自由基（Ｏ２－·）有較好的清除作用，在試驗范圍內(nèi)清除率隨苦瓜多糖用量的增加而升高。

關(guān)鍵詞：苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）多糖；水提醇沉法；優(yōu)化；抗氧化

中圖分類號：Ｓ６４２．５；Ｒ２８４．２；Ｏ６２９．１２ 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）24－5761-03

苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）屬葫蘆科植物，是一種常用蔬菜。對于苦瓜屬植物的藥用價值人們早有認(rèn)識，在民間被廣為應(yīng)用［１］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實苦瓜具有抗腫瘤、提高免疫功能、降血糖等作用。多糖作為苦瓜的有效成分之一幾乎無毒副作用，在治療腫瘤、免疫力低下、高血糖、衰老、病毒性疾病等方面療效獨特［２］。本試驗采用水提醇沉法從苦瓜中提取粗多糖，考察乙醇添加量、提取溫度、提取時間和料水質(zhì)量比對其提取率的影響，優(yōu)化提取工藝。并對苦瓜多糖的抗氧化性能進(jìn)行分析，為其開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

１ 材料與方法

１．１ 材料

新鮮苦瓜購自當(dāng)?shù)厥袌觯瑢Ⅴr苦瓜洗凈去內(nèi)瓤，切成薄片。置于電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中６０℃烘干至恒重，干燥的苦瓜經(jīng)粉碎后過４０目篩，得到黃綠色苦瓜粉。

所用化學(xué)試劑均為分析純。ＦＺ１０２微型植物粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司；ＤＨＧ－９４１５Ａ電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司；ＨＨ－４數(shù)顯恒溫水浴鍋，金壇市科析儀器有限公司；ＳＨＢ－３循環(huán)水多用真空泵，鄭州杜甫儀器廠；ＲＥ－３０００旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、ＴＤ５Ａ臺式低速離心機、ＡＬ２０４電子天平，海南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司。

１．２ 方法

１．２．１ 原料預(yù)處理 將苦瓜粉用８０％的乙醇（體積分?jǐn)?shù)，下同）回流４ｈ以除去苦瓜中的單糖、低聚糖、甙類等雜質(zhì)［３］，抽濾，濾液經(jīng)回流回收乙醇，干燥后的苦瓜粉濾渣用于提取多糖。

１．２．２ 苦瓜多糖的提取 取１ｇ預(yù)處理后的苦瓜粉→按一定的料水質(zhì)量比加水→置于一定溫度的恒溫水浴鍋中浸提→抽濾→加乙醇沉淀→析出沉淀→４０００ｒ／ｍｉｎ離心２０ｍｉｎ取沉淀層→去蛋白→收集清液，再加入４倍體積的乙醇醇析→取沉淀用乙醚、丙酮反復(fù)洗滌，干燥２４ｈ→得苦瓜粗多糖固體［４］。

粗多糖提取率＝葡萄糖質(zhì)量濃度×稀釋倍數(shù)×樣品溶液體積×換算因子／苦瓜粉質(zhì)量×１００％

１．２．５ 正交試驗 在單因素試驗的基礎(chǔ)上設(shè)計Ｌ９（３４）正交試驗對提取條件進(jìn)行優(yōu)化［１０］。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 單因素試驗結(jié)果

２．２ 正交試驗結(jié)果

２．３ 苦瓜多糖的抗氧化活性分析

３ 結(jié)論

２）苦瓜多糖能有效清除ＤＰＰＨ·和Ｏ２－·，在試驗范圍內(nèi)其清除率隨苦瓜多糖用量的增加而升高，表現(xiàn)出顯著的抗氧化性。

參考文獻(xiàn)：

［１］查 青，董 英，徐 斌．藥食兩用植物（Ⅱ）－苦瓜的藥理作用研究概況［Ｊ］．食品研究與開發(fā)，２００５，２６（３）：３３－３６．

［２］許紅心，倪堅軍．苦瓜的藥用研究概況［Ｊ］．浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，２００１，２５（４）：７３－７５．

［３］張利芳，張名位，黃 文，等．纖維素酶協(xié)同超聲波輔助提取苦瓜多糖工藝優(yōu)化［Ｊ］．農(nóng)業(yè)機械學(xué)報，２０１０（１１）：１４２－１４７．

［４］鄒東恢，梁 敏，楊 勇，等．香菇多糖復(fù)合酶法提取及其脫色工藝優(yōu)化［Ｊ］．農(nóng)業(yè)機械學(xué)報，２００９，４０（３）：１３５－１３８．

［５］何新益，劉金福，李林昊．苦瓜多糖的分離純化及其對ＰＰＡＲ激活作用研究［Ｊ］．食品與機械，２００８，２４（６）：５９－６１．

［６］劉金福，張平平，趙 鑫．苦瓜多糖提取工藝的研究［Ｊ］．天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報，２００３，１０（３）：３０－３４．

［７］吳笳笛，闞國仕，陳紅漫，等．雙酶水解法提取水溶性苦瓜多糖的研究［Ｊ］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００５，３３（１）：７３－７４．

［８］袁 媛，張 華，陳光英．微波萃取苦瓜多糖的研究［Ｊ］．海南師范大學(xué)學(xué)報，２００８，２１（１）：４４－４６．

［９］ 孟協(xié)中，席金萍，李力平，等．枸杞多糖化學(xué)研究的現(xiàn)狀［Ｊ］．寧夏農(nóng)林科技，１９９９（４）：２３－２６．

［１０］范偉平．白花蛇舌草多糖的提取與純化［Ｊ］．南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），２００１，６（４）：２２－２６．

［１１］董 英，張慧慧．苦瓜多糖降血糖活性成分的研究［Ｊ］．營養(yǎng)學(xué)報，２００８，３０（１）：５４－５６．

［１２］董加寶，李 芳．苦瓜多糖的制備及其抗氧化性質(zhì)研究［Ｊ］．湖南科技學(xué)院學(xué)報，２００８，２９（８）：５１－５４．