河南及重慶、安徽部分地區山羊球蟲感染情況與種類調查

衛九健 ，張曉東，張子軍，菅復春，齊 萌，張菲菲，呂亞莉，丁建平，張文靜，王改蘭，寧長申

（1.河南農業大學牧醫工程學院，鄭州 450002；2.安徽農業大學動物科技學院；3.河南省新密市畜牧局）

山羊球蟲病是由寄生于山羊腸道上皮細胞內的艾美耳屬球蟲引起的一種原蟲病，臨床上常表現為腹瀉、消瘦、貧血、生長發育受阻和生產性能下降，嚴重者可導致死亡，羔羊發病率和死亡率較高，給養殖業造成了較大的經濟損失［1-2］。為更好地防治山羊球蟲病，促進養羊業的健康發展，筆者于2011年1月至2012年2月對河南省的8個地區、重慶市的云陽縣和安徽省的合肥市等地區的山羊球蟲感染情況、種類及流行特點進行了調查研究，以期為山羊球蟲病的防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

分別對河南省中牟、登封、魯山、確山、商城、盧氏、汝陽、新安，重慶市云陽和安徽省合肥等地共1 126只山羊逐只經直腸采集糞便樣品，每份10～30 g，分別裝入潔凈的100 mL離心管內，記錄羊的品種、年齡、臨床情況等，帶回實驗室置4°C冰箱保存，待檢。選取河南中牟某羊場的山羊為研究對象，每月定期采集糞樣，進行為期1年的球蟲感染動態研究。

1.2 卵囊檢查與計數

采用飽和蔗糖溶液漂浮法對糞便樣本進行檢查，采用麥克馬斯計數法測定每克糞便中的球蟲卵囊數（OPG）。

1.3 卵囊收集與培養

參照劉光輝等［3］的方法進行球蟲卵囊的收集與培養。

1.4 卵囊形態觀察及種類鑒定

于光學顯微鏡下觀察孢子化前后的球蟲卵囊大小、顏色、形態結構等特征，并用Motic顯微圖像分析處理系統顯微照相，根據卵囊孢子化時間、孢子囊形態結構及卵囊指數等，參照有關文獻［4-10］進行球蟲蟲種鑒定。

2 結果

2.1 山羊球蟲感染情況

經飽和蔗糖溶液漂浮法檢查，1 126份糞便樣本中1 070份發現有球蟲卵囊，總感染率95.03%，河南中牟、登封、魯山、確山、商城、盧氏、汝陽、新安，重慶云陽和安徽合肥等地山羊球蟲感染率分別為95.9%（614/640）、100%（47/47）、95.0%（76/80）、100%（18/18）、86.7%（13/15）、100%（9/9）、100%（17/17）、28.6%（2/7）、92.5%（197/213）和 96.3%（77/80）。

2.2 不同年齡段山羊球蟲感染情況

6月齡以下、6月齡至1歲和1歲以上山羊球蟲感染率分別為 93.3%（458/491）、97.1%（66/68） 和96.3%（546/567），最大OPG值分別為277 600、14 800和26 600，平均OPG值分別為5 282.77、3 550.71和15 07.88。6月齡以下山羊中有6只出現腹瀉癥狀，球蟲卵囊感染強度均較大，最大OPG值達277 600。

2.3 不同品種山羊球蟲感染情況

對8個品種的山羊進行調查，奶山羊、波爾山羊、波爾雜交山羊、酉州烏羊、巫山黑山羊、安徽白山羊、渝東白山羊和魯山牛腿山羊球蟲感染率分別為28.6%（2/7）、96.0%（702/731）、94.0%（78/83）、100%（19/19）、90.0%（90/100）、96.3%（77/80）、100%（26/26）、95.0%（76/80）。

2.4 不同飼養方式山羊球蟲感染情況

舍飼和放牧山羊的球蟲感染率分別為95.7%（838/876）和92.8%（232/250），平均OPG值分別為3 744.35和1 028.62。

2.5 不同月份山羊球蟲感染情況

對中牟某羊場進行為期1年的球蟲感染情況調查，共收集640份糞便樣本，614份為陽性，感染率95.9%，其中，1月、2月、5月、9月和11月山羊球蟲感染率均為100%，3月、4月、6月、7月、8月、10月和 12月球蟲感染率分別為 91.9%（68/74）、91.1%（51/56）、91.7%（44/48）、91.1%（51/56）、95.8%（46/48）、95.8%（46/48）和 96.9%（62/64）。最大OPG值出現在8月份，高達277 600，球蟲平均感染強度春季和夏季逐漸升高，到秋季達到高峰，冬季感染強度明顯降低（詳見圖1）。

圖1 不同月份球蟲感染陽性山羊糞便中卵囊平均感染強度

2.6 球蟲種類及各種球蟲感染率

經飽和蔗糖溶液法檢查的1 070份陽性糞便樣品中，除部分樣品因感染強度小，無法進行球蟲種類鑒定外，共收集813份陽性樣品中球蟲卵囊進行鑒定，發現艾美耳球蟲12種，分別為阿普艾美耳球蟲（E.apsheronica）占4.7%、阿氏艾美耳球蟲（E.arloingi）46.1%、艾麗艾美耳球蟲（E.alijevi）41.6%、斑點艾美耳球蟲（E.punctata）0.4%、蒼白艾美耳球蟲（E.pallida）5.4%、家山羊艾美耳球蟲（E.hirci）76.9%、柯察艾美耳球蟲（E.kocharli）7.5%、克氏艾美耳球蟲（E.christenseni）48.8%、妮氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae）5.4%、山羊艾美耳球蟲（E.caprina）3.7%、羊艾美耳球蟲（E.caprovina）3.0%和約奇艾美耳球蟲（E.jolchijevi）11.3%。詳見表1。

表1 不同調查地點山羊感染艾美耳球蟲種類%

2.7 山羊球蟲混合感染情況

鑒定的813份陽性糞便樣本中有640份感染兩種以上球蟲，混合感染率78.7%，最多可混合感染9種球蟲，多數為2～4種；同時感染2種、3種和4種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為30.3%、24.4%和14.4%；同時感染5種、6種、7種、8種和9種球蟲的羊占球蟲陽性羊的比例分別為5.3%、2.7%、1.1%、0.5%和0.1%。

2.8 各種球蟲的形態結構特征

2.8.1 阿普艾美耳球蟲（E.apsheronica Musaev，1970） 卵囊黃褐色，呈卵圓形，大小為 31.17（22.49～38.26）μm×24.32（17.83～28.54）μm，平均卵囊指數 1.28，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔較小，無極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈長卵圓形，大小平均為14.11 μm×8.96 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，無斯氏體，子孢子頭尾相鄰并列于孢子囊內，孢子化時間為72 h。見圖2-1。

2.8.2 阿氏艾美耳球蟲（E.arloingi Marotel，1905） 卵囊淡黃色，呈橢圓形或稍卵圓形，兩邊較平直，大小為33.58（22.72～37.09）μm×18.72（15.14～24.58）μm，平均卵囊指數1.79，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，鐘形極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈長橢圓形，大小平均為12.26 μm×8.54 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為36h。見圖2-2。

2.8.3 艾麗艾美耳球蟲（E.alijevi Musaev，1970） 卵囊淡黃色或無色，呈球形或亞球形，大小為18.07（13.10～25.46）μm×17.83（12.42～24.76）μm，平均卵囊指數 1.01，卵囊壁兩層，表面光滑，無卵膜孔，無極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈長卵圓形，大小平均為9.35 μm×5.48 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為132 h。見圖2-3。

2.8.4 斑點艾美耳球蟲（E.punctata Landers，1955） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或卵圓形，大小為32.86（22.53～38.79）μm×23.76（16.81～28.57）μm，平均卵囊指數 1.38，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔明顯，無極帽，有極粒，有卵囊殘體，孢子囊呈長卵圓形，大小平均為 8.47 μm×3.98 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為64 h。見圖2-4。

2.8.5 蒼白艾美耳球蟲（E.pallida Christensen，1938） 卵囊黃褐色，呈長橢圓形，大小為 16.83（12.30～20.02）μm×12.27（8.76～15.59）μm，平均卵囊指數 1.37，卵囊壁兩層，表面光滑，無卵膜孔，無極帽，無極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈長卵圓形，大小平均為 8.05 μm×4.28 μm，有孢子囊殘體，無斯氏體，子孢子頭尾相鄰斜列于孢子囊中，孢子化時間為72 h。見圖2-5。

2.8.6 家山羊艾美耳球蟲（E.hirci Chevalier，1966） 卵囊黃褐色，呈短橢圓形或亞球形，大小為25.39（21.82～30.05）μm×19.16（17.15～22.88）μm，平均卵囊指數 1.33，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈寬卵圓形，大小平均為11.05 μm×8.28 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有較小的斯氏體，子孢子頭尾相鄰橫列于孢子囊中，孢子化時間為24 h。見圖2-6。

2.8.7 柯察艾美耳球蟲（E.kocharli Musaev，1970） 卵囊黃褐色，呈短橢圓形或亞球形，大小為24.16（18.49～27.06）μm×19.97（14.25～23.08）μm，平均卵囊指數 1.21，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔不明顯，無極帽，無極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈卵圓形，大小平均為 10.27 μm×7.36 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為72 h。見圖2-7。

2.8.8 克氏艾美耳球蟲（E.christenseni Levine,Ivens and Fritz，1966） 卵囊黃褐色，呈典型的卵圓形，大小為34.82（28.17～46.08）μm×22.59（17.18～27.60）μm，平均卵囊指數1.54，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈卵圓形，大小平均為12.46 μm×8.63 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為120 h。見圖 2－8。

2.8.9 妮氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae Yakimoff and Rastegaieff，1930） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或亞球形，大小為 24.71（18.37～27.96）μm×19.87（14.14～23.66）μm，平均卵囊指數1.24，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔不明顯，無極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈卵圓形，大小平均為14.18 μm×7.53 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，兩個子孢子頭尾相對，沿孢子囊長軸兩邊并列，孢子化時間為57 h。見圖2－9。

圖2 山羊12種孢子化艾美耳球蟲卵囊圖

2.8.10 山羊艾美耳球蟲（E.caprina Lima,1979） 卵囊黃褐色，呈橢圓形或卵圓形，大小為 30.74（25.68～39.96）μm×23.66（18.36～27.64）μm，平均卵囊指數 1.30，卵囊壁兩層，表面光滑，卵膜孔較寬且明顯，無極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈長卵圓形，大小平均為13.35 μm×7.61 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為72 h。見圖2－10。

2.8.11 羊艾美耳球蟲（E.caprovina Lima，1980） 卵囊黃褐色，呈寬橢圓形或亞球形，大小為30.17（23.82～36.07）μm×24.77（18.28～27.22）μm，平均卵囊指數 1.22，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，無極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈卵圓形，大小平均為 12.79 μm×7.52 μm，有孢子囊殘體，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為72 h。見圖2－11。

2.8.12 約奇艾美耳球蟲（E.jolchijevi Musaev，1970） 黃褐色，卵囊呈壺狀或罐狀，上寬下窄，大小為33.81（25.76～36.26）μm×24.75（20.30～27.49）μm，平均卵囊指數1.37，卵囊壁兩層，表面光滑，有卵膜孔，有極帽，有極粒，無卵囊殘體，孢子囊呈卵圓形，大小平均為10.31 μm×6.63 μm，孢子囊殘體呈小顆粒狀，有斯氏體，子孢子頭尾相鄰縱列于孢子囊中，孢子化時間為120 h。見圖2－12。

3 討論

3.1 山羊球蟲感染普遍，嚴重感染導致發病

山羊球蟲病呈世界性分布，其球蟲命名較混亂，目前較公認的寄生于山羊的球蟲有13種，本調查主要參考汪明的報道［4－5］進行蟲種鑒定。陶立等［6］報道廣西圈養山羊球蟲的平均感染率86.68%，鑒定出10種球蟲，優勢蟲種為阿氏、艾麗和雅氏艾美耳球蟲；鮑鳴等［7］報道安徽鳳臺縣山羊球蟲感染率94.64%，鑒定出10種艾美耳球蟲，優勢種為雅氏、阿氏、浮氏和小型艾美耳球蟲；張玲等［8］調查發現洛陽周邊地區山羊球蟲平均感染率36.45%；本次調查發現山羊球蟲總感染率95.0%，鑒定出12種艾美耳球蟲，主要感染蟲種為阿氏、艾麗、家山羊和克氏艾美耳球蟲，不同地區間山羊球蟲感染存在差異，除河南新安山羊球蟲感染率較低外，其他調查點山羊球蟲感染率均較高。調查中發現，6只山羊出現腹瀉和消瘦等癥狀，OPG值高達277 600，表明球蟲的嚴重感染是引起山羊發病和影響養羊效益的重要原因之一，雖然多數羊感染球蟲后無明顯臨床癥狀而呈隱性感染狀態，但其是重要的傳染源。調查發現山羊球蟲混合感染率為78.7%，與文獻報道［7］比較一致，表明山羊球蟲混合感染較普遍，在防治中應引起重視。

3.2 不同年齡段球蟲感染強度存在差異；感染無明顯季節性，但秋季感染強度最大

張玲等［8］報道6個月以內、6～12月齡和1歲以上的山羊球蟲感染率分別為45.26%、35.00%和20.83%，隨年齡增長呈遞減趨勢；李培英等［9］報道合肥地區0～3月齡山羊球蟲感染率達100%；廣西地區圈養山羊以6～12月齡羊球蟲感染率最高，為97.93%，6個月以內和1年以上的山羊球蟲感染率分別為89.39%和74.49%，山羊球蟲的感染強度隨年齡的增長而降低，6月齡以下羊感染強度最大［6］。本次采用飽和蔗糖溶液漂浮法對糞樣進行檢查，各年齡段山羊球蟲感染率均較高，無顯著差異，可能與舍飼條件下環境污染、羊易于接觸球蟲感染等有關；但6月齡以下羊球蟲感染強度大，最大OPG值為277 600，平均OPG值為5 282.77，明顯高于6月齡以上羊，與上述報道相一致。球蟲感染多流行于溫暖濕潤的季節。此次調查發現，各月份山羊球蟲感染率均在91.1%～100%之間，可能與舍飼條件下，圈舍糞尿混積，常年潮濕，冬季保暖措施較好，給球蟲傳播創造了有利條件有關，加之成年羊作為帶蟲者，糞便中排出的卵囊長期污染圈舍環境，故未表現明顯的季節性，但8月份山羊球蟲感染強度最大，可能與夏季環境濕潤，便于球蟲卵囊發育到感染階段而大量感染有關，在該季節應加強羊球蟲病的防治。

3.3 山羊球蟲感染無明顯種間差異，舍飼山羊感染強度高于放牧山羊

國內外大量調查研究顯示，不同品種山羊對球蟲均易感。肖明等［10］報道柴達木絨山羊球蟲檢出率70.49%。本次調查的8個品種山羊，除奶山羊感染率28.6%外（本次調查數量較小，有待進一步研究），其他7個品種山羊的感染率均在90%以上，表明山羊感染球蟲無品種間差異。

李培英等［9］調查發現舍飼羊群球蟲感染率明顯高于放牧羊群，舍飼山羊球蟲感染強度遠高于放牧山羊。本次調查結果顯示，舍飼山羊球蟲感染率與放牧山羊無明顯差異，舍飼山羊的感染強度高于放牧山羊，與上述報道相符。主要是因為舍飼羊群活動范圍小，飼養密度大，較為擁擠，環境潮濕，卵囊不宜暴露在日光照射等條件下，有利于球蟲的傳播和感染。

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［6］陶立，韋志鋒，蘭美益，等.廣西圈養山羊球蟲種類和感染狀況的調查［J］.畜牧與獸醫，2011，43（4）:82-85.

［7］鮑鳴，李培英，劉光林，等.鳳臺縣山羊球蟲種類及感染情況調查［J］.中國獸醫寄生蟲病，2004，12（2）:4-9.

［8］張玲，孔志園，鄭娟，等.洛陽郊區山羊球蟲種類及感染現狀調查［J］.畜牧與獸醫，2011，43（4）:108-110.

［9］李培英，王菊花，周玉珍，等.合肥地區山羊球蟲種類及感染情況調查［J］.畜牧與獸醫，2006，38（12）:20-24.

［10］肖明，劉惠考.柴達木絨山羊球蟲感染情況調查［J］.中國獸醫雜志，2006，42（7）:31-33.