慢病毒介導GDNF基因對食蟹猴骨髓間充質干細胞生物學特性的影響

任振華，王佳茵，王淑艷，張 穎，鄒春林，張 愚*

(1首都醫科大學宣武醫院細胞生物室，北京100053;2安徽醫科大學人體解剖學教研室，合肥230032)

慢病毒介導GDNF基因對食蟹猴骨髓間充質干細胞生物學特性的影響

任振華1，2，王佳茵1，王淑艷1，張 穎1，鄒春林1，張 愚1*

(1首都醫科大學宣武醫院細胞生物室，北京100053;2安徽醫科大學人體解剖學教研室，合肥230032)

目的 探討慢病毒介導膠質源性神經營養因子(GDNF)對食蟹猴骨髓間充質干細胞(cMSCs)生物學特性的影響。方法 無菌條件下取食蟹猴骨髓，梯度密度離心法分離培養cMSCs，以含有GDNF基因的慢病毒感染cMSCs。利用ELISA、Real-time PCR、流式細胞術(FCM)、BrdU摻入法等實驗方法，觀察慢病毒感染后GDNF基因的表達，以及慢病毒感染前后的cMSCs的表面抗原表達、體外增殖和分化能力。結果 感染慢病毒后，體外培養的cMSCs高表達GDNF。慢病毒感染后cMSCs的細胞形態無明顯改變，細胞表面標志CD34、CD90和Stro-1陽性細胞比例增高。BrdU摻入結果顯示，與對照組(0.61±0.11)比較，GDNF慢病毒感染組(0.50±0.13)明顯降低(P＜0.05)。但GDNF慢病毒感染并沒有影響cMSCs體外脂肪誘導分化能力。結論 慢病毒感染影響cMSCs的表面抗原表達和體外增殖能力，但對cMSCs體外脂肪分化能力無影響。

骨髓間充質干細胞;慢病毒;細胞增殖;細胞分化

骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一種異質的成體干細胞，具有自我復制能力的多潛能細胞，在一定條件下，它可以分化成成脂肪、骨及軟骨細胞，廣泛應用于細胞治療和組織工程［1－2］。同時，MSCs容易通過各種載體進行基因修飾，應用于基因治療［3］。另一方面，因MSCs的低免疫原性，在移植治療中扮演免疫抑制和免疫調節作用［4］。……