硫化氫在急性腹膜炎患者血漿中的表達及意義

斯偉宏

（義烏市中心醫院 普外一科， 浙江 金華 322000）

硫化氫（H2S）是繼NO和CO之后的第三氣體信號分子，由關鍵酶CSE和CBS催化L-半胱氨酸代謝產生[1-2]，在心血管疾病[1]、腸缺血-再灌注損傷大鼠腸黏膜屏障、肝臟功能障礙中起保護作用[3-4]，具有抑制[1-5]、促進[6-7]炎癥反應效應。H2S在急性腹膜炎患者血漿中的表達水平及其意義，國內外文獻鮮見報道。故我們加以探討，現闡述如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選擇本院2010年1月到2010年12間急性腹膜炎患者50例（設為A組），其中男30例，女20例，年齡37～60歲，平均（45.5±8.8）歲；體質量45～67 kg，平均（57.12±9.46）kg；病程9～23 h，平均（15.48±6.23）h。急性胃潰瘍穿孔11例，急性十二指腸潰瘍穿孔7例，外傷性結腸破裂25例，絞窄性腸梗阻、腸壞死7例。均無高血壓、慢性阻塞性肺疾病、冠心病、糖尿病等基礎疾病。選擇同期健康體檢者50例為正常對照（設為B組），其中男28例，女22例，年齡34～58歲，平均（43.3±10.2）歲；體質量48～72 kg，平均（60.34±10.27）kg。兩組對象的性別、年齡、體質量比較差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑和儀器：敏感硫電極和PXS-270離子計購于上海雷磁儀器廠，TNF-α、IL-6、NO、CRP、內毒素試劑盒購自南京建成生物工程研究所，ELx800酶標儀為美國Bio-TEK公司產品；5417R低溫高速離心機為德國Eppendorf公司產品。

1.2.2 標本采集：B組禁食12 h、A組入院時抽肘靜脈血6 mL，室溫靜止30 min后以3000 r/min離心15 min，分離血漿，取3 mL置于-80 ℃冰箱冷凍待測，所有血漿統一編號保存，各項指標均統一標準，一批完成檢測。

1.2.3 檢測指標及方法：酶聯免疫吸附（ELISA）法測定血漿中TNF-α、IL-6、CRP表達，敏感硫電極法[8]測定血漿H2S濃度；用動態濁度法檢測血漿中內毒素的含量，化學法測定血漿NO含量。

1.3 統計學處理方法 用SPSS 13.0統計軟件包進行統計處理。計量資料以±s表示，內毒素檢測結果呈偏態分布，取對數處理后呈正態分布，采用兩獨立樣本均數t檢驗，相關性采用直線相關分析。

2 結果

2.1 兩組對象血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內毒素及H2S的檢測結果 A組TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內毒素及H2S均顯著高于B組，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.01）。具體見表1。

2.2 各檢測指標間的相關性 H2S與TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內毒素呈正相關（r=0.735、0.683、0.837、0.748、0.842、0.872、0.764，P＜ 0.01）；NO與 TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、內毒素呈正相關（r=0.893、0.712、0.698、0.647、0.709、0.723，P＜0.01）。

表1 兩組血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內毒素及H2S的水平變化比較（n=50±s）

表1 兩組血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內毒素及H2S的水平變化比較（n=50±s）

與B組比：aP＜0.01

組別 TNF-α IL-6 CRP 內毒素 WBC N NO H2S（ng/L） （ng/L） （mg/L） （EU/L） （×109/L） （×109/L） （μmol/L） （μmol/L）A 49.02±2.62a 437.08±18.43a 66.99±4.86a 1.71±1.02a 16.88±0.94a 10.50±1.17a 119.19±9.93a 42.57±7.18a B 4.08±0.94 227.97±12.92 12.48±1.74 0.06±0.04 6.18±0.86 3.65±0.75 48.43±7.63 24.38±2.69

3 討論

H2S氣體信號分子在人體內存在形式：1/3為氣體H2S，2/3為NaHS，主要通過形成硫酸鹽或硫代硫酸鹽而最終排出體外[1-4]。Zhang等[6]研究結果表明內源性的H2S激活白細胞，介導炎癥因子的釋放，在盲腸穿孔膿毒血癥中起促進炎癥反應作用。本研究發現，A組患者血漿中內毒素、CRP、WBC、N均顯著高于B組（P＜0.01），提示機體存在著膿毒血癥；A組H2S顯著高于B組（P＜0.01），與Zhang等[6]研究結果一致，提示內源性H2S在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中起重要作用。

TNF-α、IL-6、NO是炎癥因子[6-7]。內源性NO可通過抑制血小板和白細胞聚集，清除氧自由基、抑制脂質過氧化和改善微循環等多個環節發揮對腸黏膜屏障的保護作用[3]。過度表達的NO與O2-結合生成過

氧亞硝酸基，誘導細胞凋亡[9]。TNF家族成員及TNF死亡受體-核轉錄因子-кB信號通路在膿毒血癥中起重要作用[10]。本研究結果顯示A組患者血漿中TNF-α、IL-6、NO水平均顯著高于B組（P＜0.01），與Zhang等[6]研究結果一致；H2S與TNF-α、IL-6、NO、CRP、WBC、N、內毒素呈正相關，提示內源性的H2S可能也是一種炎癥因子，在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中起重要作用。有研究表明H2S在心血管疾病[1]、腸缺血-再灌注損傷大鼠腸黏膜屏障、肝臟功能障礙中起保護作用[3-4]，具有抑制[1-5]、促進[6-7]炎癥反應效應。提示H2S氣體信號分子的生物活性效應及其機制可能具有細胞和疾病特異性。但內源性H2S在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中是否起促進炎癥反應作用，尚待進一步研究明確。

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