多花黃精中多糖的免疫活性研究

摘 要 目的：研究多花黃精中多糖的免疫活性作用。方法：將小鼠隨機分組設計實驗組和對照組，測定多花黃精中多糖對小鼠免疫功能的影響。結果：多花黃精中多糖可提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數；增加小鼠溶血素的生成；增加小鼠的臟器指數。結論：多花黃精中多糖具有增強小鼠免疫功能的作用。

關鍵詞 多花黃精 多糖 免疫功能

黃精為百合科黃精屬多年生草本植物的干燥根莖，味甘，性平，無毒，是中國傳統的藥食同源性中草藥。2005版《中國藥典》收載了黃精、囊絲黃精（多花黃精）或滇黃精的干燥根莖入藥。藥理學研究證明黃精中的黃精多糖具有增強免疫、抗炎、抗病毒等多種功能^［1］。因此對當地多花黃精的免疫作用進行了相關研究，為多花黃精的進一步開發利用提供依據。

資料與方法

主要材料：多花黃精為淮北市人民醫院中藥科采購，產地安徽，由安徽師范大學生命科學院專家鑒定為百合科植物多花黃精的根莖；小白鼠來源于淮北市藥品檢驗所實驗室，實驗過程中對動物處置方法符合科學技術部2006年發布的《關于善待實驗動物的指導性意見》^［2］。

儀器及試劑：高效液相色譜系統；島津UV-1601紫外可見分光光度計；玻璃勻漿器；XSP-44X9型生物顯微鏡；流式細胞儀；高壓鍋MLS-3780；環磷酰胺；黃酒（酒精度≥12%）；葡萄糖、95%乙醇、石油醚、氯仿、乙醚、丙酮等均為分析純，補體，重蒸水，生理鹽水。

方法：⑴黃精多糖的提取：取多花黃精3kg，加600g黃酒于不銹鋼鍋中燉制25小時，得酒燉黃精樣品。將樣品干燥、粉碎、過篩，取粉末樣品，分別加10和7倍量體積分數80%乙醇2次超聲，每次30分鐘，過濾后合并濾液，減壓回收濾液至無醇味，蒸餾水定容至3000ml，過濾。濾液過D101大孔吸附樹脂柱，收集水洗液，濃縮至干燥，得到多糖。用高效液相色譜法檢測，發現樣品中主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖等多糖成分。⑵黃精多糖對小鼠免疫功能的影響：①對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響：取小鼠40只，隨機分4組：高、中、低劑量組（400、200、100mg/kg）和對照組。每天給藥1次，灌服量10ml/kg，對照組給予等體積生理鹽水，連續給藥7次，末次給藥后1小時每只鼠腹腔注射5%雞紅細胞混懸液0.4ml，再給雞紅細胞，4小時后處死小鼠，按文獻方法測腹腔巨噬細胞的吞噬功能^［3］。②黃精多糖對小鼠溶血素生成的影響：取小鼠40只，隨機分4組：高、中、低劑量組（400、200、100mg/kg）和對照組，對照組給予等體積生理鹽水。每天給藥1次，連續10天；給藥后第3天每鼠腹腔注射5%雞紅細胞生理鹽水混懸液0.2ml進行免疫，免疫后第7天眼眶取血，離心，取血清用生理鹽水稀釋100倍，取稀釋后血清lml，5%雞紅細胞混懸液0.5ml，10%補體0.5ml混合，在37℃恒溫孵育30分鐘，0℃冰箱中中止反應，離心，取上清液于紫外可見光譜儀540nm處比色，測OD值^［4］。③黃精多糖對小鼠免疫器官的影響：采用臟器指數法，取小鼠50只，隨機分5組：高、中、低劑量組（400、200、100mg/kg）、對照組和模型組。適應3天后，除對照組外，其他各組小鼠尾靜脈給環磷酰胺0.2ml造模，每天灌胃給藥1次，連續10天。末次給藥后24小時，頸椎脫臼處死小鼠，破開腹腔、胸腔，剝取胸腺、脾臟、腎，稱質量。按下式計算免疫器官胸腺、脾臟等臟器指數并比較各組間的差異：胸腺指數胸腺質量/體重×100%；脾臟指數脾臟質量/體重×100%；肝指數肝臟質量/體重×100%。

統計學分析：采用SAS9.0軟件進行單因素方差分析，定量資料數據用（X±S）表示，組間比較采用t檢驗。

結 果

黃精多糖對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響。給藥組中小鼠腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬百分率及腹腔巨噬細胞的吞噬指數高于對照組（P＜0.05），見表1。

黃精多糖對小鼠溶血素生成的影響。給藥組小鼠溶血素生成的OD值均顯著高于對照組（P＜0.05），見表2。

表2 黃精多糖對小鼠溶血素生成的影響（X±S，n10）

注：^{*>/sup>P＜0.05。}

黃精多糖對小鼠免疫器官的影響。各給藥組的臟器指數明顯高于模型組（P＜0.05），見表3。

討 論

研究發現黃精具有增強免疫、降血脂、降血糖、延緩衰老等多種作用。體外實驗表明黃精多糖可直接作用于紅細胞^［5］，增強紅細胞膜Cab受體活性，使紅細胞免疫黏附功能增強。

本實驗研究表明可促進小鼠溶血素生成，說明可增強小鼠體液免疫功能。而黃精多糖對免疫器官的影響，主要表現為免疫器官（胸腺、脾臟）重量的增加，結果顯示，其對胸腺指數的影響明顯大于肝臟和脾臟指數，各給藥組臟器指數明顯高于模型組，通過建模得到受損傷臟器，而給藥組臟器指數相對模型組都有極大的改善，大部分給藥組臟器指數均高于正常組，說明它能改善環林酰胺造成的臟器損傷，修復作用較好。

本研究進一步證實黃精具有寬中益氣、補腎益精、滋陰潤肺、生津補脾等功效，也提示黃精中多糖可能是較好的免疫調節劑。黃精多糖作用廣泛，有進一步研究開發利用的價值。

參考文獻

1 中華人民共和國藥典委員會編.中華人民共和國藥典（2005年版1部）［S］.北京:化學工業出版社，2005:215.

2 中華人民共和國科學技術部.關于善待實驗動物的指導性意見，2006.

3 張庭廷，夏曉凱，陳傳平，等.黃精多糖的生物活性研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2006，12（7）:42-45.

4 彭勃，苗明三，郭會軍，等.扶正排毒片十預環磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的效應［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2006，10（43）:126-128.

5 王紅玲，張渝侯，洪艷，等.黃精多糖對哮喘患兒紅細胞免疫功能影響的體外實驗研究.中國當代兒科雜志，2002，4（3）:233-235.

表1 黃精多糖對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響（X±S，n10）

注：^{*>/sup>P＜0.05。}

表3 黃精多糖對小鼠免疫器官的影響（X±S，n10）

注：^{*>/sup>P＜0.05。}