腸道沙門志賀菌檢驗(yàn)方法探討

摘 要 目的：了解本地區(qū)沙門菌和志賀菌的分布。方法：對本地區(qū)1990～2008年食品從業(yè)人員健康體檢腸道門診及腸道檢測點(diǎn)患者檢出的沙門菌、志賀菌進(jìn)行分類統(tǒng)計。結(jié)果：沙門菌977株，B群占57.22%；D1群占13.72%；E1群占11.88%。志賀菌2522株，B群占80.53%；D群占15.82%；B群中以F2a、1a、1b為主。結(jié)論：該區(qū)兩菌分布情況與國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)報道基本一致。

關(guān)鍵詞 沙門菌 志賀菌 分布

沙門菌屬廣泛分布于自然界，通常寄居在人或動物腸道內(nèi)。本菌屬中有的除引起腸道感染外，還能引起其它臟器或全身性感染，例如腸熱癥、敗血癥等。志賀菌屬亦稱痢疾桿菌屬，引起細(xì)菌性痢疾。人對志賀菌易感，只需少量細(xì)菌進(jìn)入腸道即可引起感染。沙門菌屬和志賀菌屬也是引起食物中毒的重要病原菌。

1990～2008年本區(qū)疾控中心共檢出沙門菌1138株、志賀菌2522株，分別作了鑒定。

資料與方法

檢測對象：本區(qū)食品從業(yè)人員健康體檢、腸道門診及腸道監(jiān)測點(diǎn)患者。

檢測依據(jù)：《標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》（上海市疾控中心）、《衛(wèi)生防疫細(xì)菌檢驗(yàn)》、《沙門菌屬診斷抗原表》（成都生物制成研究所）；GB 7012-1997感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則；GB 16002-1995細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則。

病原學(xué)檢驗(yàn)：①采樣：調(diào)查中采集糞便（肛拭）標(biāo)本，糞便標(biāo)本保存于亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（每份10ml）內(nèi)，血液標(biāo)本分離血清后備用。②標(biāo)本處：糞便標(biāo)本先轉(zhuǎn)種SS、HE瓊脂后，放（37±1）℃恒溫箱21小時，直接進(jìn)行一次分離培養(yǎng)；同時再將增菌管繼續(xù)放置于（37±1）℃恒溫箱，增菌培養(yǎng)18小時后再次轉(zhuǎn)種上述鑒別培養(yǎng)基。③標(biāo)本鑒定：培養(yǎng)21小時左右，將直接分離的培養(yǎng)皿中出現(xiàn)的可疑菌落與沙門AF-O多價血清進(jìn)行1次玻片凝集，在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步用重要的分群“O”單價血清凝集，發(fā)出初步報告。同時挑取可疑菌落接種三糖鐵半固體瓊脂。

結(jié) 果

沙門菌檢出情況 1138株沙門菌中，A-F群共1135株（99. 74%）。其中未分型的有161株：A群17株、B群31株、C群54株、D群3株、E群52株、F群4株。其余977株。977株沙門菌分屬11個血清群，其中B群為首位，占57.22%；其次為D1群占13.72%；E1群（11.88%）。共有54個血清型。

志賀菌檢出情況 2522株志賀菌分布于4個菌群，其中B群為首位（80. 53%）；其次為D群（15.82%），見表1。

表1 2522株志賀菌菌群分布

討 論

因?yàn)榧?xì)菌性食物中毒病原學(xué)的鑒定過程較長。為了爭取報告時間，15小時左右對現(xiàn)場接種（或不經(jīng)增菌直接接種）的平皿中出現(xiàn)的可疑菌落，直接進(jìn)行玻片凝集鑒定，可以提前2天作出初步診斷，為臨床診斷及疫情處理提供技術(shù)支持。

中毒患者雙份血清的抗體測定，可以充分證實(shí)病因和食物中毒的關(guān)系。在條件較差的基層疾病預(yù)防控制中心，這一檢測手段顯得更是不容忽視。

恢復(fù)期10份血清中有3份無抗體增長現(xiàn)象，可能與及時抗菌等綜合治療、療程短、細(xì)菌繁殖數(shù)量少、抗原攻擊不強(qiáng)有關(guān)。確切原因有待進(jìn)一步探討。

由于沙門菌在20℃以上肉類組織中能大量繁殖。又因沙門菌不分解蛋白和產(chǎn)生吲哚，污染肉類食品后，其感官性狀仍然良好，人們進(jìn)食污染的食物后，往往不被察覺。此外，農(nóng)村宴席加工方法不符合衛(wèi)生要求，容易交叉污染等原因，引起食物中毒的比例大。所以加強(qiáng)這方面的宣傳教育，提高群眾自我保健意識，實(shí)屬非常重要。

沙門菌含菌體抗原、鞭毛抗原、表面抗原，由于表面抗原的存在，可阻礙菌體抗原與抗體的凝集。表面抗原是一種不耐熱的、不穩(wěn)定的抗原，其化學(xué)成分為糖脂，經(jīng)加熱60～100℃即被破壞。因此，把細(xì)菌制成濃混懸液后，加熱破壞表面抗原，露出菌體抗原與相應(yīng)的免疫血清發(fā)生凝集，故沙門志賀菌陽性檢出率，有明顯的提高。

參考文獻(xiàn)

1 沙門菌感染［J］.開卷有益·求醫(yī)問藥，2004，（5）.

2 張燕，朱超.我國沙門菌病和菌型分布概況［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2002，（3）.