探究pH對(duì)酶活性的影響

摘要：酶的活性受環(huán)境條件的影響，尤其是對(duì)溫度及pH的變化非常敏感，表現(xiàn)有最適溫度和最適pH的現(xiàn)象。在最適溫度及最適pH的環(huán)境中，酶的活性最強(qiáng)，酶促反應(yīng)速度最高；低于或高于最適溫度和最適pH，酶活性變?nèi)酰复俜磻?yīng)速度降低。除溫度及pH外，某些化學(xué)物質(zhì)可抑制或促進(jìn)酶的活性。可抑制酶活性的化學(xué)物質(zhì)，稱為酶的抑制劑，可促進(jìn)酶活性的化學(xué)物質(zhì)，稱為酶的激活劑。環(huán)境pH直接影響到酶和底物的解離狀態(tài)，從而影響到酶與底物的結(jié)合和反應(yīng)速度。在某一定pH時(shí)，酶活性大最大值，這一pH成為酶的最適pH。環(huán)境pH高于或低于最適pH時(shí)，酶的活性降低，遠(yuǎn)離最適pH時(shí)，甚至?xí)?dǎo)致酶的變性失活。不同的酶最適pH不盡相同。酶的最適pH不是一個(gè)特征性的物理常數(shù)，對(duì)于一個(gè)酶，其最適pH因緩沖液和底物的性質(zhì)不同而有差異。

關(guān)鍵詞：pH；酶活性；生物學(xué)

測(cè)定酶的最適pH值，是進(jìn)一步了解酶生物學(xué)的基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶為材料來觀察酶活性受pH影響的情況。唾液中含有唾液淀粉酶。淀粉在該酶的催化作用下會(huì)隨著時(shí)間的延長而出現(xiàn)不同程度的水解，從而得到各種糊精乃至麥芽糖、少量葡萄糖等水解產(chǎn)物。而碘液能指示淀粉的水解程度——淀粉（藍(lán)色），紫色糊精（紫色），紅色糊精（紅色）、麥芽糖及少量葡萄糖（黃色），通過觀察淀粉水解程度從而間接的測(cè)出唾液淀粉酶的最適pH值。結(jié)果測(cè)得pH在6.81左右水解最徹底，故唾液淀粉酶的最適pH值在6.81左右。

一、材料與方法

（一）器材和試劑

1.器材

試管及試管架、燒杯、恒溫水浴箱、冰塊、白瓷板

2.試劑

（1）0.5%淀粉溶液：稱取0.5g可溶性淀粉，加少量預(yù)冷的蒸餾水，在研缽中調(diào)成糊狀，再徐徐倒入約90ml沸水，同時(shí)不斷攪拌，最后加水定容為100ml即成。要求新鮮配制。

（2）不同pH值緩沖液的配置：

取8個(gè)50毫升錐形瓶，編號(hào)。按下表中的比例，用吸量管添加0.2M磷酸氫二鈉溶液和0.lM檸檬酸溶液，制備pH5.0一8.0的8種緩沖溶液。

（3）碘-碘化鉀溶液：碘化鉀3g；蒸餾水100ml；碘1g。

先將碘化鉀溶于蒸餾水中，待全部溶解后再加碘，振蕩溶解。將此液保存在棕色玻璃瓶?jī)?nèi)。

（4）唾液的獲取

用蒸餾水漱口，然后用舌尖抵住下顎，微微低頭，將下嘴唇擱在燒杯邊緣，讓唾液自然流入燒杯中

（二）實(shí)驗(yàn)過程

取8支干燥的試管，編號(hào)。每支試管加入已獲取的唾液2ml。將8個(gè)錐形瓶中不同pH的緩沖液各取3毫升，分別加入相應(yīng)(l一8號(hào))的試管中。混勻后，同時(shí)置于37～38℃水浴中保溫。約1min后，再向每個(gè)試管中添加0.5%淀粉溶液1ml，混勻。由8支試管中各取出1滴置白瓷板上，加一滴碘-碘化鉀溶液檢驗(yàn)淀粉的水解度，觀察各管呈現(xiàn)的顏色。判斷在不同pH值下淀粉被水解的程度，可以看出pH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響，并確定其最適pH。

（三）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

二、實(shí)驗(yàn)分析

由結(jié)果可得：當(dāng)pH值為6.8時(shí)，唾液淀粉酶活性最強(qiáng)，所以唾液淀粉酶的最適pH值為6.8左右。當(dāng)pH值過小或過大時(shí)，酶的活性就會(huì)受到抑制，所以從某種意義上說pH值過高或過低這個(gè)因素是唾液淀粉酶的抑制劑。

參考文獻(xiàn)：

[1] 許冰，原媛 《pH值對(duì)酶活性影響的實(shí)驗(yàn)觀察》《臨床合理用藥》.2010.3（10）