大口徑毛細管氣相色譜法測定丙帕他莫中3種有機溶劑的殘留量

【摘要】 目的 建立丙帕他莫中3種有機溶劑殘留量的測定方法。方法 用大口徑毛細管柱氣相色譜法，以外標法計算殘留溶劑的含量。結果 3種有機溶劑均完全分離，乙醇、丙酮、二氯甲烷的線性范圍分別為100.72～1007.2 μg/ml（r=0.9997）、103.86～1038.6 μg/ml （r=0.9996）、12.94～129.4 μg/ml（r=0.9997）， 平均回收率分別為98.9%、99.5%、101.3%，RSD分別為2.1%、1.3%、1.6%。結論 所建方法靈敏、準確，可用于丙帕他莫中3種殘留溶劑的同時測定。

【關鍵詞】 丙帕他莫； 有機溶劑殘留量； 毛細管氣相色譜

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丙帕他莫為非成癮性的解熱鎮痛藥，是對乙酰氨基酚的前體藥物。靜注或肌注后，可迅速被血漿酯酶水解，釋出乙酰氨基酚而起作用，作用機制類同于后者。通過使用非甾體類鎮痛藥的前體藥物，選擇性的抑制中樞內前列腺素的生成，可產生與嗎啡類相近似的鎮痛效果。臨床主要用于疼痛的對癥治療，尤其是外科手術后疼痛及癌癥疼痛^［1］。由于在合成工藝中使用了乙醇、丙酮、二氯甲烷有機溶劑，均列為藥品必須限制的第二類、第三類毒性有機溶劑，故需檢查藥物中的有機溶劑殘留量。為有效控制產品質量，保證用藥安全，特建立了毛細管氣相色譜法測定本品中的乙醇、丙酮、二氯甲烷3種有機溶劑的含量。該法簡便靈敏，準確可靠，結果準確。

1 實驗部分

1.1 儀器與試藥 HP5890型氣相色譜儀，FID檢測器(美國惠普公司)；GC2002色譜工作站；Sartorius 1712型分析天平（德國Sartorius公司）。丙帕他莫原料（批號：040601、040602、040603）；乙醇（第三類）、丙酮（第三類）、二氯甲烷（第二類）均為分析純。

1.2 色譜條件和系統適用性試驗 HP5890氣相色譜儀-FID-GC2002色譜工作站；色譜柱：HP-5毛細管柱（30 m×0.53 mm×2.65 μm）；柱溫：柱溫30 ℃，保持3 min，以30 ℃/min升至200 ℃，保持1 min；進樣器溫度：200 ℃；檢測器溫度：240 ℃；載氣：He；柱前壓：50 kPa。乙醇、丙酮和二氯甲烷的理論塔板數大于5000；分離度大于1.5。空白溶劑GC圖譜見圖1，無水乙醇(tR=0.97 min)、丙酮(tR=1.16 min)、二氯甲烷(tR=1.49 min)標準溶液和供試品溶液GC圖譜見圖2和圖3。

1.3 溶液的制備

1.3.1 對照品溶液的制備 精密稱取無水乙醇500 mg，丙酮500 mg，二氯甲烷60 mg，置于100 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。各精密吸取上述溶液各5.0 ml置于50 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，即得對照品溶液。

1.3.2 供試品溶液的制備 精密稱取本品0.5 g于5 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，超聲5 min，搖勻，靜置，取上清液，高速離心（r=15000轉/min）5 min，即得供試品溶液。

1.4 方法考察

1.4.1 線性考察 取無水乙醇0.5 g，丙酮0.5 g，二氯甲烷0.06 g，精密稱定，置于100 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得對照品儲備液。將此溶液分別稀釋5倍、10倍、20倍、25倍、50倍，得一系列不同濃度的對照品標準溶液。精密量取上述標準溶液2 μl進樣，記錄色譜圖，將峰面積(A)與濃度(C)進行線性回歸，結果見表1。

表1 線性范圍

組分線性范圍（μg/ml）回歸方程相關系數（r）

乙醇100.72～1007.2A=582849C-239870.9997

丙酮103.86～1038.6A=508884C-164490.9997

二氯甲烷12.94～129.4A=78090C-399.69880.9997

1.4.2 檢測限與定量限 取低濃度的混合標準溶液進行逐步稀釋，以2 μl進樣測定，以S/N=3計，測定乙醇、丙酮、二氯甲烷檢測限，結果見表2。

1.4.3 精密度試驗 取上述對照品溶液，平行進樣6次，按無水乙醇的主峰計算其精密度，結果如表3所示，從試驗結果可知，方法的精密度符合要求。

表2 乙醇、丙酮、二氯甲烷檢測限和定量限

樣品檢測限（μg/ml)定量限（mg/ml）

乙醇0.25180.10

丙酮0.260.10

二氯甲烷6.50.01

精密稱取無水乙醇500 mg，丙酮500 mg，二氯甲烷60 mg，置于100 ml的容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，精密吸取此溶液1 ml于100 ml的容量瓶，加水定容至刻度，作為標準溶液。精密量取上述標準溶液2.0 μl進樣，重復進樣6次，量取峰面積，并計算其相對標準偏差RSD考察其進樣精密度，結果見表4。

1.4.4 穩定性試驗 取供試品溶液，于1 h、2 h、3 h、6 h、9h分別精密吸取2 μl進樣，乙醇、丙酮、二氯甲烷峰面積的 RSD分別為1.15%、2.49%、1.82%。

1.4.5 重復性試驗 取同一批號丙帕他莫樣品（批號：040601）5份，每份按照“1.5 樣品測定”項下方法測定含量，每次進樣2 μl，結果乙醇、丙酮、二氯甲烷的RSD分別為2.21%、2.96%、2.48%，表明分析方法精密度良好。

1.4.6 加樣回收試驗 精密稱取已知乙醇、丙酮、二氯甲烷殘留量丙帕他莫(批號:040601)0.5 g，精密加入乙醇、丙酮、二氯甲烷混合標準溶液適量， 混勻后按照“1.5 樣品測定”項下方法測定含量，并計算回收率，乙醇、丙酮、二氯甲烷的平均回收率（n=5）分別為98.9%、99.5%、101.3%，RSD分別為2.1%、1.3%、1.6%。

1.5 樣品測定 照《中國藥典》2005年版二部附錄ⅧP有機溶劑殘留量測定法檢查。精密稱取無水乙醇500 mg，丙酮500 mg，二氯甲烷60 mg，置于100 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。各精密吸取該溶液5.0 ml于50 ml的容量瓶，加水稀釋至刻度，即得對照品溶液。精密稱取本品0.5 g于5 ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度，超聲5 min，搖勻，靜置，取上清液，高速離心（r=15000轉/min）5 min，即得供試品溶液。精密量取標準品溶液、供試品溶液各2 μl，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜峰，按外標法以峰面積計算乙醇、丙酮和二氯甲烷分別不得過0.5％、0.5％和0.06％。取三批樣品（批號：040601、040602、040603），照上述方法進行測定，結果見表5。

從實驗結果可以看出，三批樣品乙醇、丙酮和二氯甲烷的限量合格，符合《中國藥典》2005年版的有關規定。

2 討論

2.1 限度的規定 乙醇、丙酮和二氯甲烷均為丙帕他莫合成過程中引入的對人體有害的有機溶劑，人用藥品注冊技術規范國際協調組織(ICH)將二氯甲烷列為第二類必須控制的毒性試劑，將乙醇和丙酮列為第三類必須控制的低毒性試劑?！吨袊幍洹罚?005年版）將乙醇、丙酮和二氯甲烷限量分別定為0.5％、0.5％和0.06％^［2］，從檢測結果來看，三批樣品中的乙醇、丙酮和二氯甲烷的殘留量都遠遠小于規定值。

2.2 溶劑和色譜條件的選擇 因為丙帕他莫是水溶性藥物，根據藥典要求，應首選無有機物的水做溶劑，大量的水溶液在進樣口汽化后進入色譜柱會影響其柱效，故色譜柱選用耐水的固定相Porapak Q，以減少柱的流失，同時也能有效分離乙醇、丙酮和二氯甲烷^［3］。柱溫起始溫度為30 ℃，保證了乙醇、丙酮和二氯甲烷的良好分離，再使用程序升溫，可使色譜柱凈化，使基線平穩，提高檢測靈敏度。本實驗結論準確可靠，方法簡便快捷，能很好地測定丙帕他莫中的有機溶劑殘留量。

參 考 文 獻

［1］ 沈永倩，于布為，朱泳，等.鹽酸丙帕他莫和哌替啶用于術后鎮痛的比較研究.中華醫學雜志，2000，80(1):45-47.

［2］ 中華人民共和國國家藥典委員會.中國藥典.第2部.北京:化學工業出版社，2005：30-31，54-56.

［3］ 朱新華，賀凌云，張永東，等.氣相色譜法測定鹽酸丙帕他莫中的殘留溶劑.湖南師范大學學報#8226;醫學版，2006，3（2）：33-35.

（收稿日期：2011-08-29）

（本文編輯：車艷）