針刺“足三里”\\“腎俞”\\“關元”\\“三陰交”對圍絕經期大鼠性腺軸的調節作用

作者單位：150036 黑龍江省護理高等專科學校（付麗艷）；黑龍江省森工總醫院（趙晶）；黑龍江中醫藥大學（劉洋）

通訊作者：劉洋

【摘要】 目的 從生殖內分泌的角度探討電針治療圍絕經期綜合征的作用機制。方法 將45只16月齡圍絕經期大鼠隨機分為圍絕經期對照組、針刺（電針“足三里”、“腎俞”、“關元”、“三陰交”）組及電針非經穴點組，另將15只4月齡大鼠設為青年對照組。電針刺激結束后，檢測各組血清雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、促黃體生成素（LH）、下丘腦多巴胺（DA）、下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）。結果 （1）與青年對照組比較，各項指標均有顯著性變化（P<0.05，或P<0.01）。（2）針刺組與圍絕經期對照組比較，針刺組對血清E2、FSH、LH、下丘腦DA、GnRH有顯著調節作用（P<0.05，或P<0.01）。結論 電針“足三里”、“腎俞”、“關元”、“三陰交”對圍絕經期大鼠的調節作用與性腺軸有關，可通過調節下丘腦-垂體-卵巢軸的功能治療圍絕經期綜合征。

【關鍵詞】 針刺； 圍絕經期； 性腺軸； 調節

圍絕經期綜合征（peri-menopausal period）又稱更年期，指婦女一生中自性成熟期進入老年期的過渡階段，一般為45～55歲。此期中，卵巢功能逐漸退化，引起下丘腦-垂體-卵巢內分泌軸的功能失調，導致以植物神經系統功能紊亂為主，并伴有心理癥狀的一組癥候群。在這一特殊時期，隨著卵巢功能的衰退，機體的生殖內分泌環境也發生相應的改變。隨著社會發展、生活及工作節奏的不斷加快，圍絕經期綜合征的發病率日漸增高。據統計資料顯示，我國婦女圍絕經期綜合征的發病率約占87%。現代醫學主要采用對癥及激素替代治療（HT），其不良反應大，禁忌證多^［1］，安全性尚待研究。尋求一種有效且風險較低的治療方法十分必要。近幾年來，中藥及針灸治療圍絕經期綜合征的研究取得很大進展^［2］。為此，本實驗以16個月圍絕經期大鼠為實驗對象，觀察電針“足三里”、“腎俞”、“關元”、“三陰交”對圍絕經期大鼠子血清雌激素（E2）、促黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、下丘腦多巴胺（DA） 、下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）的影響，進一步探討電針對圍絕經期綜合征的可能機理。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 實驗動物:Wistar雌性大鼠組，16個月圍絕經期大鼠60只，體重（410±20） g；4月齡年輕大鼠20只，體重（200±20） g。均由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供。

1.2 動物分組及模型復制 采用自然老化的圍絕經期大鼠模型^［3］。采用陰道涂片法（vaginal smeartest，VST）^［4］，根據5次涂片的陰道細胞學表現，篩選符合本實驗要求的大鼠并進行分組。從60只16月齡Wistar雌性大鼠中選取符合不規律的動情周期，或無排卵持續動情期，或反復偽孕，或持續無動情狀態的大鼠45只，用隨機數字表分為3組，每組15只，即圍絕經期對照組、電針非經穴點組及電針“足三里”、“腎俞”、“關元”、“三陰交”組。從20只4月齡Wistar雌性大鼠中選取陰道細胞學表現為動情周期規律性強的大鼠15只，作為青年對照組。

1.3 取穴定位于電針操作 按照《實驗針灸學》取穴定位。足三里:大鼠膝關節后外側，在腓骨小頭下約5 mm處取之。腎俞：第2腰椎棘突下旁開7 mm。關元:取大鼠于仰臥位，于腹正中線，臍與恥骨聯合前緣連線2/5處取之。三陰交:大鼠小腿內側，內踝與膝關節連線1/5處取之。非經穴點取以上四穴旁開5 mm處。每組針后接G6805-Ⅱ型電針儀，220 V，用2 Hz與100 Hz交替出現的疏密波電針治療，強度以局部輕微顫抖為度，時間10 min，1次/d，連續5 d為一個療程，1個療程結束后休息1 d，共4個療程。青年對照組、圍絕經期對照組動物每天只進行抓取刺激，不作針刺。

1.4 標本采集 針刺30 d后，于最后針刺結束24 h后，將所有實驗大鼠斷頭取血，放置4 ℃的冰箱中，靜置4 h以上，3000 r/min離心處理后，取上清液，保存在零下20 ℃的冰箱中，待用于各種激素濃度的測定。

1.5 指標檢測 E2、FSH、LH、GnRH等采用ELISA法測定。按試劑盒說明書操作程序進行。

1.6 統計結果 數據采用SPSS 12.0軟件處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，多組間統計資料采用方差分析（one-way ANOVA），組間兩兩比較采用StudentNewman Keuls檢驗（SNK），P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 電針對血清E2、FSH、LH含量的影響 與青年對照組比較，圍絕經期對照組、電針非經穴點組及電針組E2含量均顯著下降（P<0.05），FSH和LH含量均顯著上升（P<0.01，或P<0.05）。與圍絕經期對照組比較，電針組E2含量顯著上升（P<0.05），FSH和LH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針非經穴組E2、FSH、LH含量無明顯差異（P>0.05）。見表1。

表1 各組血清E2、FSH、LH含量（x±s）

2.2 電針對下丘腦DA、GnRH含量的影響 與青年對照組比較，圍絕經期對照組下丘腦DA、GnRH含量顯著上升（P<0.05，或P<0.01）;與圍絕經期對照組比較，電針組下丘腦DA、GnRH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針非經穴組血清下丘腦DA、GnRH含量無明顯差異（P>0.05）。見表2。

表2 電針對下丘腦DA、GnRH含量的影響（x±s）

3 討論

現代中醫認為圍絕經期，是婦女在絕經前后，腎氣漸衰，腎陰不足、陽失潛藏或腎陽虛弱，經脈失卻溫煦的狀態，發生一系列臟腑氣血不協調的證候。治療上主要采用補腎、調理沖任二脈為基本原則。本實驗中選取足三里、腎俞、關元與三陰交四穴，其中“足三里”是“足陽明胃經”的主要穴位之一，它具有調理脾胃、補中益氣等功能；“腎俞”益腎助陽，強腰利水；“足三里”與“腎俞”同為全身強壯真陽之要穴。現代國內外研究指出，在內分泌系統方面，對垂體-腎上腺皮質系統功能有雙向性良性調節作用。“關元”為任脈與足三陰經的交會穴，也是任脈與沖脈的交會穴;“三陰交”為肝脾腎三經交會穴，其在生理上相互調節，病理上互為影響，故治療上通過三陰交穴可調理沖、任、督、帶的病變。沖脈、任脈與肝、脾、腎關系密切，取之可以調理沖任，和調臟腑，是針刺治療圍絕經期綜合征的有效處方之一^［5］。本實驗選用疏密波、高低頻混用的刺激，一則避免大鼠產生耐受^［6］，二則因為低頻刺激引起經典神經遞質如β-EP釋放，高頻刺激引起遞質共存^［7］，選用混頻可以更好地發揮針刺效應。圍絕經期大鼠各項指標指出卵巢功能減退，雌、孕激素水平下降對下丘腦和垂體的周期性反饋性抑制減弱，下丘腦-垂體-卵巢軸平衡失調，下丘腦弓狀核促性腺激素釋放激素（GnRH）的脈沖式釋放增加，垂體FSH、LH升高，體內雌激素水平下降，免疫活性細胞不能獲得生理劑量的雌激素刺激，這種內分泌變化影響了自主神經中樞及其支配下的各臟器功能。本研究表明，圍絕經期模型大鼠的主要表現為下丘腦-垂體-卵巢軸的功能改變。本實驗發現電針非經穴組血清E2、FSH、LH下丘腦DA、GnRH含量與圍絕經期對照組比較，雖有改變但無統計學意義（P>0.05）。電針對血清E2、FSH、LH的含量與圍絕經期對照組比較，電針組E2含量顯著上升（P<0.05），FSH和LH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針組下丘腦DA、GnRH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01）。說明電針組的各項指標與圍絕經期對照組比較，主要表現在對生殖內分泌激素和下丘腦神經遞質的調節。下丘腦、垂體和卵巢之間存在著復雜和密切的聯系，但這種聯系并非孤立的，它和內、外環境也有密切關系。來自內、外環境的刺激，可以通過中樞神經系統影響下丘腦分泌GnRH，繼而改變垂體及卵巢的功能。多巴胺與中樞神經系統電活動、軀體運動、精神情緒活動、垂體內分泌功能、心血管活動的調節相關。卵巢是體內雌激素合成、分泌的主要部位，當卵巢功能衰退時，腎上腺皮質等器官可起代償作用，而電針可能加強這一作用，促進腎上腺皮質內側區的功能活動，提高腎上腺源性雄激素和雌激素進入血液的水平。雄激素在脂肪、肝臟等組織中為合成雌激素的前體，在芳香化酶的作用下轉化為雌激素，從而提高血中雌激素的含量。本研究表明，電針組對圍絕經期模型大鼠的調節作用主要通過對下丘腦-垂體-卵巢軸功能的干預^［8］，調節有關激素水平，調節交感神經及腎上腺髓質的神經功能活動，從而保持體內激素水平和內環境的穩定，緩解圍絕經期癥狀。

參 考 文 獻

［1］ Grady D，Gebretsadik L，Kerlikowske K，et al.Hor-mone replacement therapy and endometrial cancer risk:a meta analysis.Obstet Gynecol，1995，85 （2）:304-313.

［2］ 沈潔，沈梅紅，李忠仁.針灸治療圍絕經期綜合征臨床及機制研究進展.山東中醫雜志，2008，27（1）:62-64.

［3］ 程化奇，熊舜華，殷新龍，等.大鼠圍絕經期實驗模型研究.上海實驗動物科學，1993，13（4）:192.

［4］ 李玉柱，劉鳳俊，單存密，等.“圍絕經期”動物模型試制.佳木斯醫學院學報，1991，14（3）:198.

［5］ 程潔，李忠仁.針灸治療圍絕經期綜合征選穴規律的研究.南京中醫藥大學學報，2010，26（1）:21-23.

［6］ 林文注，王佩.實驗針灸學.上海:上海科學技術出版社，1999:102.

［7］ 韓濟生.神經科學綱要.北京:北京醫科大學出版社，1991:344.

［8］ 何宗寶，胡玲，沈曉明，朱齊超.電針不同組合穴位對圍絕經期大鼠生殖內分泌免疫網絡功能的調節作用.安徽中醫學院學報，2010，29（6）：40-43.

（收稿日期：2011-03-09）

（本文編輯：車艷）