XE-2100血液分析儀兩種血小板測(cè)定方法對(duì)血液病患者血小板計(jì)數(shù)的影響

[摘要] 目的 通過(guò)XE-2100血液分析儀電阻抗法（PLT-I法）和熒光染色激光散色法（PLT-O法）檢測(cè)血液病患者血小板數(shù)量，探討兩種方法對(duì)血液病患者血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。方法 以50例健康者和150例血液病患者的外周血為研究對(duì)象，采用XE-2100血液分析儀PLT-I法、PLT-O法和顯微鏡法同時(shí)測(cè)定血小板，以顯微鏡法結(jié)果為參考。結(jié)果 健康者用PLT-I法和PLT-O法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。血液病患者PLT-O法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， 但PLT-I法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 XE-2100血液分析儀在測(cè)定血液病患者的血小板時(shí)，用PLT-O法有較好的準(zhǔn)確性。

[關(guān)鍵詞] XE-2100血液分析儀；血液病；血小板測(cè)定；準(zhǔn)確性

[中圖分類號(hào)] R558 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2011）26-53-02

The Impact of Platelet Counting Setected by XE-2100 Automatic Hematology Analyzer in Hematological Patients

PENG Songqing WU Xiaolai

Department of Laboratory，Shengzhou City People's Hospital in Zhejiang Province Shengzhou City，Shengzhou 312400，China

[Abstract] Objective To analyze the accuracy of electric impedance （PLT-I） method and optical （PLT-O） method for platelets counting by XE-2100 hematology analyzer in hematological patients. Methods The blood samples from 50 healthy person and 150 hematological patients were collected for platelet counting. The platelet of these samples were simultaneously assayed by PLT-I method and PLT-O method with reference to manual counting. Results When the blood from healthy person was assayed by PLT-I method and the determination of platelet PLT-O， the result of platelet counting was not significant different in comparison with manual counting（P＞0.05）. When the blood from hematological patients was assayed by PLT-I method and PLT-O，the result of platelet counting by PLT-O method was no significant different compared with manual counting（P＞0.05）， whereas the result of platelet counting by PLT-I method was significantly different compared with manual counting （P＜0.05）. Conclusion Blood platelets from hematological patients were assayed by XE-2100 hematology analyzer； PLT-O method has a good accuracy.

[Key words] XE-2100 hematology analyzer； Blood disease； Platelet counting； Accuracy

目前各種型號(hào)的血液分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床，實(shí)驗(yàn)室對(duì)血液分析儀器的要求也在逐漸提高，而為實(shí)驗(yàn)室和臨床關(guān)注的有核紅細(xì)胞、幼稚白細(xì)胞、異常血小板等測(cè)定的正確性問題，已成為臨床檢驗(yàn)工作者關(guān)注的焦點(diǎn)。臨床工作中有一部分標(biāo)本特別是血液病患者標(biāo)本存在巨大血小板、血小板聚集、小紅細(xì)胞及細(xì)胞碎片等干擾血小板計(jì)數(shù)[1，2]，從而影響血小板測(cè)定結(jié)果的正確性。本文旨在比較和分析XE-2100血液分析儀PLT-I法和PLT-O法對(duì)某些血液病患者血小板測(cè)定的準(zhǔn)確性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 健康組 50例為健康體檢未發(fā)現(xiàn)異常的健康者，其中女25例、男25例，平均年齡37歲。

1.1.2 血液病患者組 150例為2008年1月～2011年3月在嵊州市人民醫(yī)院門診及住院患者，其中再生障礙性貧血（AA）20例，男8例、女12例，平均年齡39歲；缺鐵性貧血（IDA）女性患者30例，平均年齡36歲；特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）女性患者20例，平均年齡47歲；急性粒細(xì)胞性白血病（AML）20例，男14例、女6例，平均年齡50歲；慢性粒細(xì)胞性白血病（CML）20例，男13例、女7例，平均年齡61歲；多發(fā)性骨髓瘤（MM）20例，男15例、女5例，平均年齡59歲；惡性淋巴瘤20例，男7例、女13例，平均年齡56歲，上述所有患者均診斷明確。

1.2 儀器與試劑

XE-2100血液分析儀、配套試劑（上海科華公司）及全血質(zhì)控品（日本東亞公司）。CX21型Olympus顯微鏡（歐林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會(huì)社）；牛鮑改良血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；20μL微量采血管；EDTA-K2抗凝真空采血管（浙江康是公司）。血小板計(jì)數(shù)液（草酸銨法稀釋液）按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版配制[3]。

1.3 方法

1.3.1 采血 用EDTA-K2抗凝真空采血管采健康者及血液病患者肘靜脈血2mL，充分混勻。

1.3.2 血液分析儀和手工顯微鏡法血小板測(cè)定 先在XE-2100血液分析儀用PLT-I法和PLT-O法檢測(cè)血小板，再用顯微鏡法按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程計(jì)數(shù)血小板[3]，每份標(biāo)本2次計(jì)數(shù)，誤差小于10%，取均值與PLT-I法、PLT-O法結(jié)果相比較。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，血小板測(cè)定結(jié)果以（χ±s）表示，組間比較用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 PLT-I法、PLT-O法血小板計(jì)數(shù)精密度結(jié)果

見表1。兩種血小板測(cè)定方法精密度（CV）均在儀器容許范圍內(nèi)，但是PLT-O法CV高于PLT-I法。其中儀器血小板測(cè)定精密度容許范圍CV＜4.0%。

2.2 XE-2100血液分析儀PLT-I法、PLT-O法與顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果比較

健康者在XE-2100血液分析儀上用PLT-I法和PLT-O法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；血液病患者PLT-O法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， 但PLT-I法測(cè)定血小板與顯微鏡法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），測(cè)定結(jié)果見表2。

3 討論

血小板測(cè)定是臨床血液性疾病診斷最重要的全血指標(biāo)之一，由于血小板體積小，容易發(fā)生粘附、聚集和變性破壞，而且檢測(cè)時(shí)干擾因素較多，常難以得到正確的計(jì)數(shù)結(jié)果。許多儀器（如電阻抗型血細(xì)胞分析儀）測(cè)定血小板有較好的重復(fù)性，但對(duì)巨大血小板、血小板凝集、小紅細(xì)胞或細(xì)胞碎片等標(biāo)本往往無(wú)法得到準(zhǔn)確的結(jié)果。顯微鏡法計(jì)數(shù)血小板操作繁瑣且費(fèi)時(shí)，重復(fù)性差，不適合大批量操作，因此靈敏、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)血小板具有重要的實(shí)際臨床意義。

本文對(duì)XE-2100血液分析儀PLT-I法與PLT-O法在某些血液病患者中血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性進(jìn)行了比較和分析。XE-2100測(cè)定血小板有兩種檢測(cè)方法，即電阻抗法（PLT-I法）和熒光染色激光散色法（PLT-O法）。PLT-I法采用紅細(xì)胞/血小板檢測(cè)通道，利用鞘流電阻原理檢測(cè)血小板，其優(yōu)點(diǎn)鞘流電阻法檢測(cè)的顆粒數(shù)多，能達(dá)到20~25萬(wàn)顆粒，而且檢測(cè)時(shí)沒有細(xì)胞并行，因此檢測(cè)的重復(fù)性較好，無(wú)需特殊試劑因而經(jīng)濟(jì)實(shí)用，缺點(diǎn)是檢測(cè)的顆粒信號(hào)不能反映體積（2～20 fl）以外的其他方面的信息，如標(biāo)本中存在的小紅細(xì)胞、細(xì)胞碎片、細(xì)菌、雜物等，依靠體積信號(hào)辨別則無(wú)法解決。PLT-O法采用血小板/網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)通道，采用的光源為633nm波長(zhǎng)的半導(dǎo)體激光束，染料為Plymethine（聚次甲基）和Oxazine（惡嗪），因血小板體積較小，但是顆粒中存在少量RNA，可被染料輕微著色而激發(fā)出熒光，同時(shí)通過(guò)前向散射光檢測(cè)顆粒大小、熒光強(qiáng)度反映細(xì)胞內(nèi)核酸的含量，對(duì)于巨大血小板或凝集塊、細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞等特殊標(biāo)本則更能取得準(zhǔn)確的結(jié)果，因此對(duì)血液病患者標(biāo)本檢測(cè)時(shí)有較好的正確性，但是PLT-O法檢測(cè)的顆粒一般僅4~6萬(wàn)個(gè)，重復(fù)性會(huì)略遜于PLT-I法。

骨髓造血功能指標(biāo)之一是血小板的數(shù)量和質(zhì)量，正確的血小板結(jié)果對(duì)血液病的診斷、治療及預(yù)后有著重要意義[4]。臨床實(shí)際工作中可用PLT-I法作為常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)，當(dāng)遇到某些血液病患者或一些特殊標(biāo)本（如混有大型血小板或小球性紅細(xì)胞時(shí)或細(xì)胞碎片等），儀器屏幕和報(bào)告單上會(huì)有一標(biāo)記“”提示PLT-I結(jié)果可信度低（血小板異常），建議使用PLT-O法再次檢測(cè)，使血小板結(jié)果更加可信，這樣可節(jié)約試劑成本、降低復(fù)查次數(shù)，但在一些特殊病例如EDTA依賴性的血小板聚集時(shí)應(yīng)與顯微鏡法復(fù)核，使結(jié)果更準(zhǔn)確、可靠。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Tatsumi N，Tsuda I，F(xiàn)unahara Y．Assessment of he-matological data obtained by the aperture impedancemethod in blood from patients with thalassemia or he-moglobinpoathy[J]．ICMR Annals，1998，8（1）：49-60.

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[3] 葉應(yīng)嫵，王毓三．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]．第3版．南京：東南大學(xué)出版社，2006：136-137．

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（收稿日期：2011-06-14）