兩種HIV抗體診斷試劑盒檢測早期感染的比較

[摘要] 目的 比較兩種HIV抗體診斷試劑盒檢測HIV早期感染的性能。方法 采用兩種試劑盒對血液樣本進行檢測，并對其中5份HIV抗體陽性血漿樣品進行稀釋，然后用ELISA檢測。對檢測結果呈陽性反應的稀釋樣品分別用兩種HIV抗體確證試劑盒進行檢測以測試其靈敏度，比較兩種試劑盒檢測結果及靈敏度。結果 兩種方法共檢出91份陽性，確證68份陽性標本，其余23份確證為陰性。北京萬泰試劑盒和英科新創試劑盒檢測假陽性率分別為13.92%和15.00%，兩種試劑盒假陽性率相似（P＞0.05）；2份質控品英科新創試劑出現漏檢；其中有2套系列稀釋樣品英科新創已顯示為陰性，北京萬泰仍能檢出陽性，且稀釋8倍時北京萬泰試劑仍檢出陽性。結論 北京萬泰診斷試劑盒與英科新創診斷試劑盒相比，可以更靈敏地檢測出HIV抗體。

[關鍵詞] HIV；抗體；艾滋病血清學診斷；酶聯免疫法

[中圖分類號] R446.6 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）26-87-02

Comparison of Two HIV Antibody Diagnostic Reagent Kit in Confirming Early HIV Infection

ZHOU Jiaoping GAO Jialiang PAN Tengfei YU Songyi

Clinical Laboratory Department，the People's Hospital of Yinzhou District in Zhejiang Province，Ningbo 315040，China

[Abstract] Objective To compare the performance of two HIV antibody diagnostic reagent kit in confirming early HIV infection. Methods All plasma specimens were detected by the two kits，five HIV antibody-positive plasma specimens were diluted and detected by ELISA．The above diluted specimens were detected with the two HIV antibody diagnostic reagent kits to analyze their sensitivity. Results All 91 samples had been diagnosed with the two kits，68 samples were confirmed，the others 23 samples were negative. The FPR of Wantai-RIBA kits and InTec kits were 13.92% and 15.00%. The FPR of two kits were similar（P＞0.05）. Two Samples QC specimens had been not detected by InTec kits，and two samples were diluted to 8 fold still been detected by Wantai-RIBA kits. Conclusion Compared with InTec，Wantai-RIBA diagnostic reagent kit have the better sensitivity of diagnosticing HIV antibody.

[Key words] HIV；Antibody；AIDS serodiagnosis diagnosis；ELISA

HIV感染的發病率在不斷升高，早期的診斷是及時防護和治療的關鍵。HIV抗體檢測是目前較為普遍的診斷方式，依據2009年修訂版《全國艾滋病檢測技術規范》制定的常規程序分為篩查試驗和確證試驗兩個步驟，篩查試驗呈陽性反應的樣品，必須再做確證試驗以明確診斷[1]。HIV抗體診斷試劑種類很多，目前普遍采用酶聯免疫法（ELISA）檢測，具有敏感性高、特異性強特點。本研究選擇兩種國產人類免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗體診斷試劑盒進行對比試驗，觀察兩者的準確性及靈敏度，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

標本收集于2006年1月~2011年6月送檢的8349份血液樣本。血漿標本的分離、保存和離心等嚴格按照試驗室規范操作，并經寧波市疾病控制中心HIV確證實驗室確證。

1.2 試劑及儀器

人類免疫缺陷病毒HIV（1+2型）抗體診斷試劑盒（分別來自北京萬泰生物醫藥有限公司生產，批號I20101206和英科新創（廈門）科技有限公司，批號20111104）。所用儀器美國伯樂公司BIO-RAD MODEL680型酶標儀，BIO-RAD MODEL1575型洗板機；北京市醫療設備廠電熱三用水浴箱BS2-Ⅰ型。質控品來自于美國伯樂公司（編號00101，批號E10F205）。所用試劑均經衛生部生物制品所批檢，并在有效期內使用。

1.3 方法

嚴格按照試劑盒說明書對所有血液標本同時使用兩種試劑進行HIV檢測初試，檢測結果不相符及陽性血樣進行雙孔復試，后經寧波市疾病控制中心HIV確證實驗室免疫印跡法確證。對其中5例HIV抗體陽性血漿樣品進行稀釋，然后用ELISA檢測。對檢測結果呈陽性反應的稀釋樣品分別用兩種HIV抗體確證試劑盒進行檢測。兩種試劑盒對10份質控品進行檢測。

1.4 統計學處理

采用SPSS16.0軟件包進行統計學分析，率的比較行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種試劑盒檢測結果

8349份血液樣本，經兩種試劑盒平行檢測，共檢測出91份陽性標本，其中北京萬泰試劑檢測陽性79份和英科新創試劑檢測陽性80份，由寧波市疾病控制中心HIV確證實驗室確證68份陽性標本，其余23份確證為陰性，檢出率為0.814%（68/8349）。其中11份（13.92%）北京萬泰試劑檢測結果為假陽性，而英科新創均為真陰性；其余12份（15.00%）英科新創檢測結果為假陽性，萬泰試劑檢測為真陰性，英科新創和北京萬泰假陽性率相似，差異無統計學意義（χ2=1.239，P＞0.05）。見表1。

2.2 兩種試劑對于質控品的檢測結果

兩種試劑對10種質控品進行平行檢測，2份英科新創試劑出現漏檢（S/CO值為0.4~0.6），北京萬泰試劑均檢出陽性（S/CO值為1.75~2.50）。

2.3 兩種對確證標本稀釋后檢測結果

對5個確證陽性標本進行稀釋，其中有2套系列稀釋樣品英科新創已顯示為陰性，北京萬泰仍能檢出陽性。北京萬泰試劑盒靈敏度較英科新創試劑盒高，確證陽性標本及其稀釋標本檢測結果見表2。

3 討論

目前，我國HIV感染人數不斷增長，并呈現上升的趨勢。本院近5年共檢出68例HIV陽性感染者，檢出率為0.814%，而2011年1~6月我院已檢出17例HIV陽性患者，較往年明顯增加。隨著社會的發展，人們健康意識的提高，更多的高危人群接受HIV檢測，因此，在受檢人群擴大的情況下，可能會出現檢出率的升高[2]。為了能滿足檢測需求，盡量避免假陽性檢測結果的出現，選擇試劑成為重要的環節。本研究選擇了目前較為普遍使用的兩種HIV抗體診斷試劑盒進行檢測對比，兩種試劑盒均為我國自行研制生產的產品，價格方面相較進口產品具有明顯的優勢，符合臨床減輕患者負擔、優化醫療資源的目標[3，4]。本研究結果顯示，檢測效果方面兩種試劑盒均存在一些假陽性，但是兩者之間的差異不明顯。HIV不僅是一種病原體，其帶來的后果也讓人們對之產生恐懼，而假陽性可能會帶來一些不必要的糾紛。兩種試劑盒均屬于第4代試劑，其在固相載體上同時包被抗p24的單克隆抗體和HIV抗原，可能相互干擾，影響了免疫反應的特異度。篩查實驗需有較高的敏感度，如果具備較好的確證試驗，可容許篩查試驗試劑特異度稍低[5，6]。兩者對質控品進行平行檢測時，發現英科新創存在漏檢的情況，北京萬泰表現良好。而對稀釋確證陽性標本的檢測比較發現，北京萬泰的靈敏度更高。

綜上所述，兩種國產試劑檢測性能之間存在一定的差異，北京萬泰與英科新創診斷試劑盒相比，可以更靈敏地檢測出HIV抗體。而在臨床檢測過程中本著對患者負責的態度，應加強各方面的準備，應用標準質控血清對試劑進行質量控制和評價，并以國家權威機構的試劑評估結果為選用試劑盒的依據。還應該加強檢驗人員的業務培訓，避免HIV陽性樣品漏檢，確保檢測結果的準確有效，并且必須經由確證試驗證實。

[參考文獻]

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[5] 亞勇，尤鳳興，姜永．HIV抗體檢測篩查試驗假陽性原因分析[J]．中國艾滋病性病，2008，14（7）：68-69．

[6] 呂傳臣，馬雪梅，曾毅. 人類免疫缺陷病毒（HIV）檢測技術的研究進展[J]. 臨床和實驗醫學雜志，2006，5（4）：421-423.

（收稿日期：2011-06-29）