產低溫蛋白酶海洋細菌的篩選及發酵條件

郭艾英，凌 云，張志雯

(1河北科技師范學院生命科技學院，河北秦皇島，066600;2中糧華夏長城葡萄酒有限公司)

蛋白酶是一類可催化蛋白質水解反應的酶，是重要的工業用酶之一，已被廣泛應用于食品、洗滌、皮革、飼料等工業。目前國內蛋白酶在常溫和低溫下酶活力不高，不能滿足市場需求，大規模用酶主要依賴進口［1］。海洋微生物自身生長環境(高壓、高鹽、低溫、低營養、低光照等)決定其分泌的胞外酶具有在低溫和高鹽存在下能夠繼續保持較高的活力，并且經過溫和的熱處理即可使低溫酶活力喪失或低溫菌株選擇性失活，而不會影響產品的品質，這使得該酶也能夠應用于某些條件苛刻的生產工藝中［2～4］。對海洋微生物低溫酶的研究與開發，已在國內外引起了廣泛關注。由海洋微生物生產低溫酶已成為發達國家開發新型酶制劑的重要途徑［5～7］，國內已經從黃海海水、北極沉積物或海水中分離到多株產低溫蛋白酶的菌株［1，8～10］，其菌種、酶的性質也不盡相同。作者首次從渤海海域采集的樣品分離獲得一株產蛋白酶活力較高的菌株HYM－16，初步鑒定為黃色桿菌屬，該菌株所產的蛋白酶在4℃條件下處理48 h，酶活保持不變，屬低溫酶，筆者對其生長條件進行分析，以期為工業應用和后續研究奠定理論和應用基礎。

1 材料和方法

1．1 樣品采集

2009年10月上旬于渤海秦皇島海域東經119°60′，北緯39°93′附近，采集海水樣品共20份。

1．2 培養基

1．2．1 營養瓊脂培養基 牛肉膏5 g/L，蛋白胨10 g/L，瓊脂20 g/L，作為菌體初篩和斜面菌種保藏用。……