老年慢性左心衰嚴重程度與循環EMP62E和Toll樣受體水平變化的關系

陳 穎,李 俠,郭 燕,胡有東,周華蘭,楊海晨,李 霞,韓雪花

(徐州醫學院附屬淮安醫院老年病科,江蘇淮安,223002)

新近研究認為,循環內皮細胞微顆粒(EMP62E)、Toll樣受體 2(TLR2)和 Toll樣受體4(TLR4)水平在炎癥反應中起著重要作用,所介導的信號通路與冠心病(CHD)、高血壓病、動脈粥樣硬化等心血管疾病的發生發展有著密切的關系[1]。但EMP62E、TLR2和 TLR4水平與老年慢性心力衰竭關系的研究相對較少[2]。該項臨床研究旨在探討EMP62E、TLR2和 TLR4水平變化與老年慢性左心衰及其嚴重程度的關系,揭示EMP62E、TLR2和T LR4在老年慢性左心衰發生發展中的可能機制。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2008年1月～2009年1月本院左心衰患者90例,入選患者均未服用非甾體抗炎藥和類固醇激素,均符合老年慢性左心衰臨床診斷標準[3]。經病史、臨床體檢和實驗室檢查排除急性心肌梗死、房顫、右心室功能受損、心源性休克、糖尿病、腦卒中、腫瘤、感染、血液系統疾病、免疫系統疾病、近期手術、外傷、腎功能不全、肝臟疾病和發熱等。根據美國紐約心臟病學會(NYHA)的心功能分級方案和LVEF將所有入選者分成5組:LVEF 50%～70%為對照組,LVEF 40%～49%為Ⅰ級組,32%～39%為Ⅱ級組 LVEF,LVEF 27%～31%為Ⅲ級組,LVEF 22～26%為Ⅳ級組。心衰組病因及各組LVEF基本資料,見表1。各組間年齡和性別差異無統計學意義(P>0.05)。在分析老年慢性左心衰患者 EMP62E、TLR2和 TLR4水平時,按照病因分成高血壓左心衰組、CHD左心衰組和對照組:高血壓左心衰組35例,LVEF(35.20±6.39)%;CHD左心衰組55例,LVEF(32.36±6.88)%。3組之間年齡和性別差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 心衰組病因及各組LVEF基本資料( ±s)

表1 心衰組病因及各組LVEF基本資料( ±s)

病因(例)組別 n 男性 年齡(歲)LVEF(%)高血壓 CHD對照組 30 12 67.13±5.70 - - 63.97±4.65Ⅰ級組 24 13 68.79±7.92 12 12 42.67±2.06Ⅱ級組 27 15 68.81±8.97 15 12 34.26±3.17Ⅲ級組 21 11 72.14±6.71 5 16 29.05±1.07Ⅳ級組 18 11 72.39±7.37 3 15 25.17±1.42

1.2 EMP62E、TLR2和 TLR4檢測方法[4]

入選者均清晨空腹采集肘靜脈血6 mL。應用美國貝克曼庫爾特公司的EPICS?ALT RA TM Flow Cytometer with Hypersort TM流式細胞儀檢測外周血 EMP62E,以個/μ L表示EMP62E的表達水平。主要試劑為FITC-標記的EMP62E單克隆抗體,PE-IgG1為同型對照;所用抗體均購自AbD serotech公司。檢測外周血單核細胞表面TLR2和TLR4的表達,以平均熒光強度(MFI)表示T LR2和 TLR4的表達水平。主要試劑為FITC-標記的小鼠抗人CD14抗體、PE-標記的小鼠抗人TLR-4抗體以及FITC-標記的小鼠抗人T LR-2抗體,并設置IgG2a為同型對照。研究所用抗體均購自AbD serotech公司。

1.3 LVEF的檢測[5]

90例老年慢性左心衰患者采用飛利浦HDI5 000多普勒超聲顯像儀測定 LVEF。判斷EMP62E、TLR2和TLR4與左心功能指標變量間相關性和依存性。

2 結 果

2.1 EMP62E、TLR2和 TLR4在心衰組表達

左心衰患者各組中EMP62E、TLR2和TLR4表達顯著高于對照組,差異有統計學意義(P<0.01),且隨著左心衰程度的加重,EMP62E、TLR2和TLR4表達水平明顯上升。各組間兩兩比較,相互差異都有統計學意義(P<0.01),見表2。

表2 TLR2、TLR4和EMP62E在不同左心功能組間比較( ±s)

表2 TLR2、TLR4和EMP62E在不同左心功能組間比較( ±s)

與對照組比較,＊＊P<0.01;與Ⅰ級組比較,##P<0.01;與Ⅱ級組比較, P<0.01;與Ⅲ級組比較,△△P<0.01。

組別 n TLR2(MFI)T LR4(M FI)EM P62E(個/μ L)對照組 30 2.75±0.83 1.45±0.4 165.83±29.82Ⅰ級組 24 4.24±2.48＊＊ 2.58±1.82＊＊ 291.04±21.95＊＊Ⅱ級組 27 4.16±0.93＊＊ 2.61±0.53＊＊ 493.19±42.36＊＊##Ⅲ級組 21 6.36±0.74＊＊ 5.03±0.74＊ 605.14±49.37＊＊Ⅳ級組 18 7.99±1.10＊＊△△ 6.34±1.46＊＊△△ 1092.72±102.82＊＊△△

2.2 TLR2、TLR4和EMP62E在不同病因心衰組的表達

TLR2、T LR4和EMP62E 在對照組、CHD 左心衰組和高血壓心衰組間比較差異均有統計學意義(P<0.05或 P<0.01),TLR2、T LR4和EMP62E水平變化趨勢為:冠心病組>高血壓組>對照組。見表3。

表3 TLR2、TLR4和EMP62E在不同病因心衰組間的比較( ±s)

表3 TLR2、TLR4和EMP62E在不同病因心衰組間的比較( ±s)

與對照組比較,＊＊P<0.01;與冠心病組比較,#P<0.05,##P<0.01

組別 n T LR2(MFI)T LR4(M FI)EM P62E(個/μ L)對照組 30 2.75±0.83 1.45±0.42 156.83±29.81冠心病組 55 6.06±2.14＊＊ 4.21±2.13＊＊ 637.51±316.04＊＊高血壓組 35 4.58±1.71＊＊## 3.37±1.75＊＊ 485.40±213.97＊＊#

2.3 TLR2、TLR4和EMP62E與左心衰嚴重程度的相關性

TLR2、TLR4與LVEF均成負相關關系(P<0.05),即隨著左心功能的降低(LVEF值不斷減小),外周血單核細胞表面T LR2、TLR4表達增多。EMP62E與LVEF呈負相關(P<0.01),即隨著 LVEF值的下降,外周血EMP62E表達增多。

3 討 論

研究證實[6],內皮細胞損傷在動脈粥樣硬化形成和粥樣斑塊的穩定性中有著重要的作用,而其作用機制為內皮細胞損傷后氧化應激反應增強,促使冠心病、高血壓病、動脈粥樣硬化等心血管疾病發生發展。急性冠脈綜合征(ACS)、穩定性心絞痛(SAP)和頸動脈硬化患者的循環單核細胞、內皮細胞和粥樣硬化斑塊中T LR2和TLR4的表達明顯升高。因此,TLR2和 TLR4與內皮損傷、動脈粥樣硬化的發生發展以及動脈粥樣硬化斑塊的不穩定性有關[7-8]。實驗研究證實,TLR信號通路的激活可通過有害炎癥反應促使白細胞聚集、細胞因子異常表達、心肌缺血、再灌注損傷、活化促凋亡信號反應通路、心肌梗死后心肌細胞凋亡、心肌梗死面積擴大、心臟幾何構型異常和心臟功能障礙[9]。

EMP62E、TLR2和TLR4三種危險因素共同促使老年慢性左心衰發生發展的可能機制是[10],氧化應激(OS)導致能量代謝障礙引起內皮細胞凋亡,促使內皮損傷和內皮功能失調。OS激活內皮表面附著的中性粒細胞,釋放炎性蛋白S100A12并與內皮細胞表面晚期糖基化終末產物受體相互作用,通過絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)和核轉錄因子κ B(NF-κ B)信號途徑,誘導促炎信號級聯反應上調血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)和細胞間黏附分子-1(ICAM-1)表達,導致內皮細胞損傷。氧化應激狀態促使內皮細胞激活和凋亡,釋放EMP62E,通過一氧化氮(NO)信號轉導途徑降低NO依賴性血管舒張作用,引起嚴重內皮功能失調。TLR2和TLR4的共刺激作用促使 NF-κ B表達,活化 NF-κ B信號通路,導致心肌缺血和心肌細胞收縮功能失調。TLR2和TLR4信號轉導途徑還可通過共同的下游銜接蛋白,即髓樣分化因子88,導致內皮損害更加嚴重,老年慢性左心衰進一步惡化。本研究認為,早期檢測EMP62E、TLR2和TLR4表達水平的變化判斷內皮細胞功能,可能有助于老年慢性左心衰診斷、治療和預后的評估。

[1]王 妍,陶 軍,涂 昌,等.高血壓患者循環內皮細胞微顆粒水平的變化[J].中華老年心腦血管病雜志,2006,8(4):222.

[2]李 俠,郭 燕,胡有東等.循環內皮細胞微顆粒和高敏C反應蛋白水平變化與慢性左心衰竭嚴重程度的相關性研究[J].中華老年醫學雜志,2011,30(6):472.

[3]Ahmed A.DEFEAT Heart Failure:Clinical manifestations,diagnostic assessment,and etiology of geriatric heart failure[J].Heart Failure Clin,2007,3(4):389.

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[5]Gimelli A,Landi P,Marraccini P,et al.Left ventricular ejection fraction measurements:accuracy and prognostic implications in a large population of patients with known or suspected ischemic heart disease[J].Int J Cardiovasc Imaging,2008,24(8):793.

[6]徐正平,朱健華,鄒瑞秀,等.卡托普利對動脈粥樣硬化大鼠內皮素轉換酶表達的影響[J].實用臨床醫藥雜志,2007,11(7):56.

[7]Monaco C,Gregan SM,Navin TJ,et al.Toll-like receptor-2 mediates inflammation and matrix degradation in human atherosclerosis[J].Circulation,2009,120(24):2462.

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