醫院感染病原菌監測及耐藥性的探析

智新慧

醫院感染是指住院患者住院期間發生的感染以及在醫院內獲得出院后發生的感染，現代醫療技術發展增加了侵入性操作、抗生素使用、放療化療、免疫抑制劑推廣等，均可能致使醫院感染問題加重，導致臨床耐藥菌株增加[1]。由于醫生使用抗生素治療感染時全憑經驗，存在盲目性，導致更多耐藥菌株產生。為此，本文旨在對2009年10月～2010年6月住院患者的標本進行病原菌種類分布、菌株耐藥性分析，以期達到提高抗生素合理使用水平的目的，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2009年10月～2010年6月住院患者的660份常規送檢標本，包括患者的痰液、中段尿、傷口分泌物、糞便、胸腹水、膽汁等各類送檢標本，排除同一患者的相同部位重復菌株，共分離出病菌457株。

1.2 質控菌株

本試驗選用的質控菌株來自衛生部的臨床檢驗中心，菌株包括：大腸埃希菌ATCC 25922、金葡菌ATCC 25923、白色假絲酵母菌ATCC 90029、銅綠假單胞菌ATCC 27853。

1.3 實驗儀器和試劑

包括K-B紙片、ATB全自動微生物藥敏鑒定分析儀、哥倫比亞瓊脂、藥敏板、鑒定板及相關配套試劑等。

1.4 實驗方法

1.4.1 標本檢測

送檢標本的細菌分離培養均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》（第3版）進行，將檢出的細菌作革蘭染色、生化反應鑒定，得出菌種分離鑒定結果。

1.4.2 藥敏實驗

采用K-B紙片瓊脂擴散法、稀釋法（包括肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法）、E試驗法、儀器法進行定性定量檢測細菌是否對藥物耐藥[2]。

1.4.3 耐藥菌的檢測方法

上述鑒定篩選出MRS及ESBLs菌株，按CLSI2005年版本所推薦的方法，使用頭孢西丁紙片確證葡萄球菌屬的MRS；采用雙紙片協同法對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產ESBLs菌株進行確證[3]。腸球菌中的高耐藥菌株對高濃度慶大霉紙片(120μg/m)的抑菌直徑圈≤6mm可判為耐藥，抑菌圈直徑7～9mm時,應進一步用肉湯稀釋法測MIC以確證。肺炎鏈球菌檢測采用1μg苯唑青霉素紙片，抑菌圈直徑＞20mm提示對青霉素G敏感,如抑菌圈直徑＜19mm，提示該菌對青霉素耐藥或中度敏感,需用稀釋法進一步確證。測試ESBLs采用雙紙片協同試驗，β-內酰胺內酶監測采用產色頭孢菌素法、碘-淀粉測定法。

2 結果

2.1 病原菌檢出

共分離出457株病原菌，革蘭氏陰性桿菌278株（60.8%），革蘭氏陽性菌116株（25.4%），真菌63株（13.8%）；G-菌中以銅綠假單胞菌居首位，G+菌以葡萄球菌為主，63株真菌中白色假絲酵母菌共41株（9.0%）。G-菌及G+菌檢出見表1。

表1 檢出G-菌及G+菌情況[n(%)]

2.2 藥敏試驗及耐藥性結果

2.2.1 藥敏試驗

G+球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率普遍＞50%，金葡菌對青霉素耐藥達100.0%，G+球菌僅對萬古霉素較為敏感；革蘭陰性桿菌對各種抗菌藥物的抗藥程度不等，對亞胺培南、阿米卡星較為敏感。

2.2.2 耐藥情況

①革蘭陰性菌的耐藥情況見表2；②革蘭氏陽性菌中對各種常用抗菌藥物的耐藥率見表3；③真菌耐藥率：真菌中占首位的白色假絲酵母菌對常用抗真菌藥保持較高的敏感性。

表2 革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率分布（%）

表3 G+菌對抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

本次調查院內感染的致病菌種類主要以革蘭氏陰性菌為主，其次為革蘭陽性菌及白色假絲菌屬，與國內相關報道結果基本一致[4]。在所有檢出的病原菌中，銅綠假單胞菌位居首位，占所有檢出病菌的12.5%，對多種常用抗菌藥物的耐藥率達50.0%以上，臨床醫生不合理的單藥應用是導致泛耐藥銅綠假單胞菌的根本原因。

本次調查結果顯示，本院發生的醫院感染中，各種致病菌對常用抗菌藥物的耐藥率不容樂觀，抗菌藥物的臨床使用情況有待改善。革蘭陰性菌對阿米卡星、環丙沙星、亞胺培南有較高敏感性，大多數革蘭陽性菌對哌拉西林、氨芐西林耐藥率達80.0%以上。革蘭氏陽性菌中的金葡菌對青霉素、紅霉素、氨芐西林的耐藥率分別達到100.0%、89.2%、93.4%，其他葡萄球菌對青霉素、紅霉素、氨芐西林、苯唑西林也達到80.0%以上，此外，金黃色葡萄球菌對除了萬古霉素、阿米卡星、氯霉素以外的其他抗菌藥物均顯示高耐藥性（＞50.0%）。根據藥敏試驗結果，建議慎重使用萬古霉素、阿米卡星為預防性用藥, 以保護其敏感性。

致病菌產生耐藥菌株，與臨床醫生的不規范使用抗菌藥物有關。醫院感染治療時,建議對感染病人的標本進行細菌培養、藥敏實驗，根據結果適當選用抗菌藥物，可減緩耐藥菌的產生。

[1] 梁學柱.醫院感染病原菌的構成及耐藥性分析[J].安慶醫學，2007,28（2）：39-41.

[2] 張衛華.細菌耐藥機理及其耐藥細菌的檢測與臨床[M].中國社區醫師醫學專業，2010,(35),12:151.

[3] 楊秀云，和建波，等.醫院感染病原菌的臨床分布特征及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2010,20（9）：1313-1315.

[4] 邱菊紅，何貴元,周成芳.臨床常見醫院感染病原菌及耐藥性觀察[J].中國消毒學雜志，2011,28（1）：45-47.