糖尿病小鼠模型的建立及荔枝核復(fù)方治療效果的實(shí)驗(yàn)研究

何勝 陸曉峰 銀彩林 李紅妃 梁海燕 張樹球

糖尿病嚴(yán)重威脅人類健康，其發(fā)病率不斷上升，由于其發(fā)病原因和機(jī)理尚未完全闡明，因而尚無根治藥物。為此，通過建立糖尿病動物模型深入研究本病的發(fā)病機(jī)理和治療藥物顯得尤為重要，四氧嘧啶和鏈佐霉素是目前國內(nèi)外使用的主要造模藥物。陳莉和梁丹等人曾用本地產(chǎn)的老品種酸荔枝核提取液做實(shí)驗(yàn)證明有降動物血糖作用[1-2],與傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)利用荔枝核治療消渴病相符合,本文使用四氧嘧啶造模，用另一品種良種甜荔枝核復(fù)方治療，研究其治療效果。現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報道如下。

1 試劑與方法

1.1 試劑 四氧嘧啶為sigma產(chǎn)品，分析純、硫脲、硼酸、鄰甲苯胺、冰醋酸均為國產(chǎn)分析純。總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）試劑盒，購自四川成都邁克試劑公司。

1.2 治療藥物 鹽酸二甲雙胍，購自市內(nèi)藥店;荔枝核復(fù)方合劑，由荔枝核、柚子果、番石榴果等果類提取制成，內(nèi)含0.1g/ml生藥。由我院海爾福研制中心提供。

1.3 動物 小白鼠90只，昆明種，鼠齡2個月，健康，雌雄各半。由學(xué)院動物室提供。

1.4 造模 將小鼠分成四組：正常組15只、模型組25、治療1組25、治療2組25只。后三組造模。用四氧嘧啶腹腔注射，按220/kg體重劑量，蒸餾水溶解后注射，一次完成。測定造模前、注射四氧嘧啶后5d血糖。血糖高于10.0mmol/l以上者作為治療和統(tǒng)計對象。

1.5 治療 治療1組用中藥治療,取原液0.1ml/只，用蒸餾水稀釋到0.4ml/只，1次/d，治療2組為標(biāo)準(zhǔn)對照組，用鹽酸二甲雙胍，按成人50kg體重劑量折算，蒸餾水溶解后灌胃，1次/d。連續(xù)灌胃7d,測定治療后血糖。

1.6 測定方法 血糖用鄰甲苯胺微量法。從小鼠尾巴取20ul全血測定[3]。總膽固醇（TC）用COD-CE-APA酶法測定。甘油三酯（TG）用GPO-POD酶法測定。具體操作按說明書。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用SSTP軟件（由上海科技出版社提供，2.00版本）統(tǒng)計，方差分析，Q檢驗(yàn)。結(jié)果用（x±s）表示。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 90只小鼠,用75只造模,造模過程死亡10只,占13.3%,血糖升高大于10mmol/L42只,占56%。

2.2 造模前后與治療后血糖含量測定結(jié)果 造模前各組血糖含量無明顯差異(P＞0.05),造模后造模組血糖含量明顯升高,P＜0.05,P＜0.01；治療后治療1組和治療2組血糖明顯降低，以二甲雙胍組降的幅度較大，模型組治療后雖也有一定下降,但無治療兩組明顯，但三個實(shí)驗(yàn)組仍明顯高于正常組，見表1。

表1 造模前后與治療后血糖含量比較

2.3 治療后血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）含量測定結(jié)果 組間甘油三酯有明顯差異，見表2。

表2 治療后血清總膽固醇、甘油三酯含量比較

3 討論

3.1 造模前各組小鼠血糖無明顯差異。造模過程死亡率較高,可能與使用四氧嘧啶劑量較大有關(guān),但血糖升高并不明顯,原因有待研究,造模后5d，造模組血糖均比造模前明顯升高，也比正常組明顯升高（P＜0.01）,但有部分不高,成功率只有56%,可能與四氧嘧啶保存時間較長有關(guān),或者與小鼠品種耐受性有關(guān),因?yàn)樗玫膭┝考鹤銐虼骩4]。

3.2 治療1組、治療2組治療7d后血糖明顯低于治療前，用二甲雙胍的治療2組下降更明顯,說明有一定效果,不同品種的荔枝核也有作用,但均未達(dá)到正常組水平,而相比之下,模型組也有一定降低,但幅度較小,原因有待研究。

3.3 甘油三酯各組比較,治療1組明顯低于模型組;但正常組也較高,有待探討。膽固醇各組比較無明顯差異，有報道，糖尿病患者的甘油三酯和膽固醇也僅有部分病人發(fā)生異常[5-6]。

[1] 陳莉,黃日越,鐘文晴,等.荔枝核提取液治療小鼠糖尿病模型生化指標(biāo)的干預(yù)作用[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2008，14(3):27-28.

[2] 梁丹,黎衛(wèi)沖,潭冬菊,等.糖尿病小鼠模型的建立及中藥荔枝核提取液對其治療的實(shí)驗(yàn)研究[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2009，15(18):41-42.

[3] 安乙敏.生化檢驗(yàn)學(xué)[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社出版，1990：68.

[4] 黃松.糖尿病動物模型研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J].廣西醫(yī)學(xué),2002,24（1）：46-47.

[5] 趙世華,趙文娟,閻勝利,等.吡格列酮和二甲雙胍治療2型糖尿病的對照研究[J].天津醫(yī)藥,2004,32(8):463-465.

[6] 錢榮立.糖尿病與血脂異常[J].中國糖尿病雜志,2000,10（2）:125.