琥珀酸對(duì)水貂胃蛋白酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及生產(chǎn)性能的影響

王凱英，李光玉，鮑 坤，劉佰陽(yáng)，常忠娟，孫偉麗

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林 吉林 132109）

酸性環(huán)境是飼料組分在體內(nèi)被充分消化吸收、有益菌群合理生長(zhǎng)、病原微生物受到有效抑制的必要條件，在飼料中添加酸化劑是調(diào)節(jié)胃內(nèi)pH的有效手段。大量研究表明，添加酸化劑能夠改善日糧適口性，提高采食量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率[1－3]。酸化劑包括單一型有機(jī)酸化劑、單一型無(wú)機(jī)酸化劑、全酸復(fù)合型酸化劑、酸鹽復(fù)合型酸化劑等幾種形式。不同形式的酸化劑作用不同。琥珀酸屬于單一的有機(jī)酸化劑。琥珀酸不僅能改變飼料pH，而且還參與三羧酸循環(huán)，對(duì)能量代謝有直接促進(jìn)作用。原蘇聯(lián)學(xué)者研究表明，飼料中添加琥珀酸能提高雞等動(dòng)物的免疫力和抗應(yīng)激能力，另?yè)?jù)美國(guó)研究者試驗(yàn)表明,琥珀酸對(duì)脂肪酶活性和胰島素活性均有明顯促進(jìn)作用，另外琥珀酸也可經(jīng)糖異生途徑轉(zhuǎn)變成葡萄糖，為機(jī)體供能[4－11]，王凱英等研究表明琥珀酸對(duì)水貂胃內(nèi)容物pH、體重、體長(zhǎng)、主要器官重量等生長(zhǎng)發(fā)育性能和血液生化指標(biāo)均有顯著影響[12]。本文將就琥珀酸對(duì)水貂胃蛋白酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、毛皮品質(zhì)等主要生產(chǎn)性能的影響進(jìn)行研究，為進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)于2008年9月23日～12月7日在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇健康、體重相近、120日齡的雄性短毛黑水貂（Mustla vison）60只，體重平均為（1 306.37±100.18）g（±S），P＞0.05。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和日糧配制

水貂隨機(jī)分成4組，每組15頭，組間體重?zé)o顯著差異（P＞0.05），單籠飼養(yǎng)。以膨化玉米、豆粕、海雜魚(yú)、雞腸、食鹽、預(yù)混料等配制成基礎(chǔ)日糧，配方見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)日糧中添加0、0.2%、0.4%、0.8%琥珀酸配制成試驗(yàn)日糧：A、B、C、D。

表1 試驗(yàn)水貂基礎(chǔ)日糧配方和營(yíng)養(yǎng)成分Table 1 Composition and nutrient contents of basal diet （%）

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)動(dòng)物由專(zhuān)人飼養(yǎng)，每日8：00、15：00投喂兩次，自由采食、保證飲水。

1.5 樣品采集

1.5.1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化數(shù)據(jù)采集

于11月25～28日進(jìn)行消化試驗(yàn)，采用全收糞法收集水貂糞便，并對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量、糞便排泄量等精確計(jì)量，飼料、糞便樣本處理后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.2 體尺、毛皮樣本采集

檢驗(yàn)毛皮成熟后于12月7日取皮，結(jié)合取皮進(jìn)行體尺、皮重、皮長(zhǎng)等數(shù)據(jù)的精確測(cè)定；在水貂背部正中連根拔取貂毛，放自封袋中備用。

1.5.3 胃內(nèi)食糜采集

在水貂處死后迅速取出胃，并進(jìn)行賁門(mén)、幽門(mén)雙側(cè)結(jié)扎，取出胃內(nèi)食糜，以?xún)龃婀苤斜４嬖谝旱袀溆谩?/p>

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

應(yīng)用胃蛋白酶測(cè)定試劑盒（南京建成生物），測(cè)定水貂胃內(nèi)食糜中胃蛋白酶活性；依據(jù)張麗英飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)[13]，測(cè)定粗蛋白、粗脂肪、鈣、磷的消化吸收率；精確計(jì)量水貂皮重和皮長(zhǎng)；用顯微鏡計(jì)數(shù)法和纖維分析儀，測(cè)定各組水貂毛絨密度和針、絨毛長(zhǎng)度。

1.7 數(shù)據(jù)整理和分析

數(shù)據(jù)用Excel進(jìn)行整理，用SAS軟件中的DUCAN程序進(jìn)行方差分析和多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)水貂胃蛋白酶活性的影響

結(jié)合取皮進(jìn)行水貂胃蛋白酶活性測(cè)定，結(jié)果如表2所示。采食30 min后各處理間胃蛋白酶活性差異不顯著（P＞0.05）；采食2.5 h后各處理間胃蛋白酶活性差異顯著（P＜0.05），其中C處理活性最高，顯著高于其他三個(gè)處理，而B(niǎo)處理活性最低；在采食4.5 h后各處理間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 不同處理水貂胃蛋白酶活性Table 2 Effect of different group on activity of pepsin in furring mink

2.2 不同處理對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的影響

2.2.1 不同處理對(duì)水貂干物質(zhì)采食量的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，A、B、C、D四個(gè)處理組間水貂干物質(zhì)平均日采食量分別是124.49±19.78A、124.20±2.92A、122.88±11.10A、123.97±5.94A，都在120 g左右，不同處理飼料間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2.2 不同處理對(duì)飼料粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、鈣（Ca）、磷（P）消化率的影響

由表3可知，不同處理間CP、Ca、P消化率差異極顯著（P＜0.01），其中處理C顯著高于其他三組；EE消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同處理對(duì)CP、EE、Ca、P消化率的影響Table 3 Apparent digestibility of CP,EE,Ca,P (%)

2.3 不同處理對(duì)水貂生產(chǎn)性能的影響

由表5可知，不同處理間水貂皮長(zhǎng)差異顯著（P＜0.05），C組在所有處理中最高；鮮皮重差異顯著（P＜0.05），C組在所有處理中最高；針毛長(zhǎng)度差異顯著（P＜0.05），A組顯著低于C、D兩處理組；絨毛長(zhǎng)度無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 不同處理對(duì)水貂生產(chǎn)性能的影響Table 4 Effect of different treatments on production performance in furring mink

3 討論與結(jié)論

3.1 琥珀酸添加量對(duì)水貂胃蛋白酶活性的影響

胃蛋白酶活性直接影響動(dòng)物對(duì)食物中粗蛋白的消化率，并反映動(dòng)物的健康水平[14]。胃蛋白酶活性受到pH、蛋白酶前體、溫度、反應(yīng)底物濃度以及其他相關(guān)條件的共同影響。王凱英等研究表明，在水貂相同的鮮基礎(chǔ)料中添加不同劑量琥珀酸，能夠顯著影響飼料的pH，飼料pH與琥珀酸添加量呈負(fù)相關(guān)；水貂胃內(nèi)容物pH是按時(shí)間點(diǎn)先降后升，并且pH最低的并不是飼料酸度最高的處理組，即本試驗(yàn)設(shè)計(jì)范圍內(nèi)水貂消化液分泌旺盛時(shí)，其胃內(nèi)容物pH以C處理組最低，即琥珀酸添加量為0.4%時(shí)水貂胃內(nèi)容物pH最低[12]。這是因?yàn)轱暳系乃嵝赃^(guò)高，在胃內(nèi)引起胃酸分泌反饋性抑制[15]。本試驗(yàn)水貂胃蛋白酶活性變化規(guī)律和前面提到的水貂胃內(nèi)容物pH變化規(guī)律相反，一方面是因?yàn)槲竷?nèi)pH直接影響胃蛋白酶活性，適宜的范圍內(nèi)pH越低胃蛋白酶活性越高；另一方面，琥珀酸添加到飼料中，在水貂體內(nèi)產(chǎn)生綜合作用，不同劑量對(duì)水貂消化道、消化腺產(chǎn)生的影響不同，從消化液分泌量到不同成分含量均有差異，只有適宜的劑量會(huì)使得胃蛋白酶前體激活加強(qiáng)，即琥珀酸添加量為0.4%時(shí)水貂胃蛋白酶活性最高。可見(jiàn)和所有酸化劑一樣，琥珀酸在水貂飼料中的用量必須適度。添加琥珀酸對(duì)水貂消化液具體分泌量和濃度變化的影響有待進(jìn)一步深入研究。

3.2 琥珀酸添加量對(duì)水貂營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用的影響

3.2.1 琥珀酸對(duì)水貂干物質(zhì)采食量的影響

動(dòng)物干物質(zhì)采食量是動(dòng)物自身狀態(tài)（即性別、所處生理時(shí)期、饑餓與否和饑餓程度等），與飼料特性（能量濃度、含水率、適口性等）共同作用的結(jié)果，本試驗(yàn)中各處理組水貂性別相同、出生日期相近、所處生理時(shí)期相同、體重?zé)o顯著差異（P＞0.05），都是處于自由采食的狀體，而且基礎(chǔ)日糧相同，只是添加琥珀酸劑量不一樣，結(jié)果表明各處理間水貂干物質(zhì)采食量無(wú)顯著差異（P＞0.05），可知本試驗(yàn)范圍內(nèi)各組添加琥珀酸對(duì)水貂日糧適口性無(wú)顯著影響。

3.2.2 琥珀酸對(duì)水貂CP、EE、Ca、P消化率的影響

CP、EE、Ca、P是對(duì)水貂身體極其重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收除與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)自身特征（化合形式、在日糧中的濃度和相互比例等）相關(guān)外，還與消化道中的消化液濃度、pH、特定消化酶活性有關(guān)。本試驗(yàn)中基礎(chǔ)日糧相同，所以各處理間日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度和相互比例均無(wú)差異，日糧中琥珀酸添加量不同對(duì)消化液分泌量、濃度、pH影響不同，這就使得消化酶活性有所變化，如表2各處理間胃蛋白酶活性差異顯著（P＜0.05），所以CP、Ca、P等消化吸收與pH有直接關(guān)系的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，受琥珀酸添加量影響極顯著（P＜0.01）；EE的消化率和體內(nèi)脂肪酶活性關(guān)系緊密，脂肪酶在偏堿性的環(huán)境條件下活性較高，隨著pH下降，脂肪酶活性下降[16]，同時(shí)飼料中添加適量的琥珀酸對(duì)EE的消化也有促進(jìn)作用[11]，本試驗(yàn)中隨著琥珀酸添加量不斷增加，EE的消化率先升高后降低，以C處理最高，也正是這一原因。另外劉桂林、Blank、常青等研究表明，延胡索酸、能顯著提高仔豬回腸末端CP、GE消化率，檸檬酸能顯著提高虹鱒魚(yú)對(duì)Ca、P、Fe、Mg等元素的吸收利用率，其原理也是飼糧酸化能夠促進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)中間代謝和蛋白質(zhì)合成，這和琥珀酸的作用原理是相同的，也印證了琥珀酸應(yīng)用的科學(xué)性[17－19]。

3.3 琥珀酸添加量對(duì)水貂生產(chǎn)性能的影響

皮長(zhǎng)、皮重、毛絨密度、針絨毛長(zhǎng)度是考察水貂毛絨等級(jí)的關(guān)鍵指數(shù)，直接決定著水貂的生產(chǎn)性能。由表5飼料中添加琥珀酸對(duì)水貂皮長(zhǎng)、皮重、針毛長(zhǎng)度等顯著影響（P＜0.05），其中C處理組為各組中最高；絨毛長(zhǎng)度差異顯著（P＜0.05），C處理組仍為各組中最高。這是因?yàn)槿占Z中添加適宜劑量的琥珀酸對(duì)水貂蛋白酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率均有顯著促進(jìn)作用，而C處理正是本試驗(yàn)中的適宜劑量，因此該組水貂皮張延展性、皮板韌性、成熟度均為各組最佳，表現(xiàn)為皮長(zhǎng)、皮重顯著優(yōu)于其他處理，同時(shí)毛絨生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)適宜，針絨毛長(zhǎng)度也是各處理組之冠。因?yàn)槿訐p傷貂皮，所以未對(duì)貂皮取樣，無(wú)法獲得毛絨密度數(shù)據(jù)，有待今后研究。

由以上試驗(yàn)結(jié)果可知，在相同基礎(chǔ)鮮料中添加不同比例的的琥珀酸，不論是對(duì)于胃蛋白酶活性、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化還是生產(chǎn)性能的影響，都是添加0.4%的琥珀酸為最佳。

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