梅花鹿仔鹿配合日糧適宜蛋白質(zhì)水平的研究

王 欣，李光玉，崔學(xué)哲，寧浩然，鮑 坤，劉佰陽(yáng)

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林 吉林 132109；2.江蘇科技大學(xué)蠶業(yè)研究所，江蘇 鎮(zhèn)江 212018）

蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)供給對(duì)梅花鹿的生長(zhǎng)發(fā)育及鹿茸的生長(zhǎng)具有關(guān)鍵性的作用。我國(guó)飼養(yǎng)梅花鹿的主要目的是為獲取鹿茸，而仔鹿生長(zhǎng)階段是雄性梅花鹿生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期，此期的生長(zhǎng)快慢將對(duì)成年后的鹿茸產(chǎn)量產(chǎn)生一定的影響。飼料中蛋白質(zhì)主要以氨基酸的形式被機(jī)體吸收利用，用以合成動(dòng)物自身所特有的蛋白質(zhì)，從而滿足其生長(zhǎng)、修復(fù)組織及合成各種酶、蛋白質(zhì)、激素、血紅素、膽汁酸等的需要，這些蛋白質(zhì)的功能是其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)所不能代替的[1]。飼料中蛋白質(zhì)水平在一定程度上會(huì)影響仔鹿生長(zhǎng)發(fā)育和其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。因此，研究梅花鹿早期生長(zhǎng)過(guò)程中體內(nèi)蛋白質(zhì)的消化率是極其重要的。

雄性梅花鹿除生長(zhǎng)發(fā)育及代謝需要大量蛋白質(zhì)之外，繁殖期及生茸期的蛋白質(zhì)需要量也比平時(shí)明顯增高。有研究表明，梅花仔鹿育成期精料補(bǔ)充料適宜的粗蛋白質(zhì)水平為28%，每日每頭平均需可消化粗蛋白219～232 g；2～3歲梅花鹿越冬期精料補(bǔ)充料中適宜粗蛋白質(zhì)水平為l6%～18%，每日每頭可消化粗蛋白194～221 g[2]。高秀華等對(duì)1、3、4及5歲以上梅花鹿生茸期日糧中蛋白質(zhì)適宜水平的研究結(jié)果分別為22.44%、19%、15.9%及16.6%，但是對(duì)于梅花鹿仔鹿配合日糧適宜蛋白質(zhì)水平的研究缺少實(shí)際的有效資料[3－6]。

隨著我國(guó)養(yǎng)鹿業(yè)的發(fā)展，利用顆粒配合飼料飼養(yǎng)梅花鹿的集約化模式已初步形成，但對(duì)于梅花鹿仔鹿配合日糧適宜蛋白質(zhì)水平的研究仍有待研究。本研究旨在通過(guò)蛋白質(zhì)在體內(nèi)的消化規(guī)律，研究不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)梅花鹿仔鹿干物質(zhì)采食量、體重、各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)采食量及消化率、料重比和血清總蛋白、白蛋白及尿素氮濃度的影響，為合理設(shè)計(jì)梅花鹿仔鹿配合日糧中的蛋白質(zhì)水平提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用14頭梅花鹿仔鹿，隨機(jī)分為A、B、C、D 4組，并分別飼喂含粗蛋白質(zhì)10.27%，14.26%，15.61%和18.60%的配合日糧。各仔鹿出生體重?zé)o顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)于2010年3月4日～5月10日在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所茸鹿實(shí)驗(yàn)基地完成。

1.2 試驗(yàn)日糧

配合日糧由膨化玉米、豆粕、花生粕、玉米蛋白粉、豆秸粉、苜蓿草粉、糖蜜、食鹽及添加劑組成?；旌暇鶆蚝?，制成直徑0.4 cm，長(zhǎng)度1.2～1.5 cm顆粒飼料備用。

飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 梅花鹿仔鹿飼養(yǎng)試驗(yàn)配合飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition of complete formula fed to experimental animals(Air dried basis)（%）

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)鹿分圈飼養(yǎng)（圈舍規(guī)格為20 m×10 m），由固定人員飼喂，消除外界環(huán)境和管理不同對(duì)鹿產(chǎn)生的應(yīng)激影響。每天供給2次日糧，時(shí)間分別為7:00和16:00，自由飲水。

1.4 樣品采集與制備

梅花鹿仔鹿消化率采用內(nèi)源性指示劑法，即鹽酸不溶灰分法進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)第1～3天，測(cè)定梅花鹿采食量，分別稱(chēng)量每天飼料的給予量以及第2天飼料的剩余量，測(cè)定平均每日每頭梅花鹿的采食量。試驗(yàn)第2～4天進(jìn)行糞樣采集，采樣于早飼前進(jìn)行，按部分收糞法采集當(dāng)天新鮮糞便，每圈選取6個(gè)點(diǎn)，糞樣的收集嚴(yán)格避免沙粒鹿毛等污染，以免影響測(cè)定結(jié)果精確度。其中一份先在80℃下殺菌2 h，然后在65℃烘箱中烘干至恒重，測(cè)定干物質(zhì)含量，烘干后粉碎過(guò)40目篩制成樣品，測(cè)定樣品中的鈣和磷；另一份加10%硫酸處理后，置于65℃烘箱中，烘干后粉碎，過(guò)40目篩，測(cè)定粗蛋白。同時(shí)測(cè)定各組飼料粗蛋白及鈣、磷的含量。4月8日、4月23日及5月10日，早飼前對(duì)仔鹿進(jìn)行麻醉，頸靜脈采血10 mL，4 000 r·min－1離心10 min分離血清樣品，并分裝于1.5 mL Eppendorf管中，－20℃冰箱保存?zhèn)溆茫脕?lái)測(cè)定血液血清總蛋白、白蛋白及尿素氮濃度。

1.5 測(cè)試項(xiàng)目與方法

飼料及糞中蛋白質(zhì)含量采用BUCHI－324型全自動(dòng)定氮儀測(cè)定，飼料及糞中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率采用2N鹽酸不溶灰法測(cè)定，樣品中干物質(zhì)、鈣、磷含量等采用實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法進(jìn)行測(cè)定[7]。血清中總蛋白（Total protein,TP）濃度用雙縮脲法測(cè)定。血清中白蛋白（Albumin,ALB）濃度用溴甲酚綠比色法測(cè)定。血清中尿素氮（Blood urea nitrogen,BUN）濃度用二乙酰一肟顯色法測(cè)定方法。以上測(cè)試所用試劑盒均為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

記錄仔鹿2010年3月4日至5月10日的增重情況。以測(cè)定梅花鹿仔鹿平均日增重，并計(jì)算料重比，其計(jì)算公式為：料/重=平均日耗料量（g·頭－1）/平均日增重（g·頭－1）。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2003進(jìn)行整理，并用SAS 8.0中的ANOVA程序進(jìn)行拉丁方試驗(yàn)的方差分析，用DUNCAN程序進(jìn)行顯著性比較。表中結(jié)果均為±S，其中P＜0.05為結(jié)果顯著，P＜0.01為結(jié)果極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)梅花鹿仔鹿生長(zhǎng)的影響

不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)仔鹿體重的影響見(jiàn)表2。

表2 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)體重的影響Table 2 Effects of different level proteins on weight

從表2中可以看出，梅花鹿仔鹿體重、增重及平均日增重均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著水平（P＞0.05），B組梅花鹿平均日增重達(dá)到128.73 g·頭－1，而A、C組梅花鹿的平均日增重均未達(dá)到 100 g·頭－1。

2.2 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)梅花鹿仔鹿蛋白質(zhì)表觀消化率的影響

不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)干物質(zhì)（DM）、粗蛋白（CP）采食量及表觀消化率的影響如表3所示。

表3 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)干物質(zhì)、粗蛋白采食量及表觀消化率的影響Table 3 Effects of different level proteins on the intake and apparent digestibility of DM and CP

從表3中可知，隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，仔鹿對(duì)干物質(zhì)采食量、食入粗蛋白量、可消化粗蛋白量均增加，但差異并不顯著（P＞0.05），其中，D組食入粗蛋白量最高，每日平均為522.66 g，C組可消化粗蛋白量較高，每日平均為126.66 g。B組料重比最低。不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)仔鹿干物質(zhì)表觀消化率無(wú)顯著性影響（P＞0.05），且隨蛋白質(zhì)水平的增加而增加，這與高秀華，李光玉等的研究結(jié)果相一致[8]。高秀華等通過(guò)試驗(yàn)得出，在干物質(zhì)采食量相近的情況下，不同蛋白質(zhì)水平對(duì)干物質(zhì)表觀消化率無(wú)顯著性影響，與劉佰陽(yáng)，李光玉通過(guò)仔鹿消化代謝實(shí)驗(yàn)證明的結(jié)論也一致[9]。仔鹿粗蛋白表觀消化率隨日糧蛋白質(zhì)水平的升高而降低，D組極顯著低于C組和A組（P＜0.01）。

圖1 食入粗蛋白及可消化粗蛋白的量Fig.1 Crude protein intake and digestible crude protein intake

由圖1可知，隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，雄性梅花鹿仔鹿食入粗蛋白的數(shù)量增加，18.60%蛋白質(zhì)組最高，每頭每天食入粗蛋白522.66 g。這可能與全價(jià)混合飼料中精粗飼料的比例有關(guān)，由于18.60%蛋白質(zhì)組飼料中，精料部分使用的膨化玉米、豆粕、花生粕和玉米蛋白粉中蛋白質(zhì)含量比較高，因此被梅花鹿采食的量也較多，食入粗蛋白的數(shù)量就最大。梅花鹿仔鹿對(duì)可消化粗蛋白的采食量隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提供而提高，但高蛋白質(zhì)水平組有所降低，15.61%蛋白質(zhì)組可消化粗蛋白量為126.66 g·（d·頭）－1。由于沒(méi)有被仔鹿利用的蛋白質(zhì)會(huì)隨消化系統(tǒng)排泄到自然界中，對(duì)環(huán)境造成污染，在梅花鹿科學(xué)飼養(yǎng)中研究如何減少蛋白質(zhì)的排出量，提高蛋白質(zhì)的消化利用率，對(duì)仔鹿生長(zhǎng)具有積極的作用，它在保證良好瘤胃微生物環(huán)境的同時(shí)，能夠降低飼料及飼養(yǎng)成本，減輕仔鹿排泄物對(duì)環(huán)境產(chǎn)生的污染。

圖2 不同蛋白質(zhì)水平對(duì)粗蛋白消化率的影響Fig.2 Effects of different level proteins on crude protein digestibility

如圖2所示，本試驗(yàn)結(jié)果表明日糧蛋白質(zhì)水平P與粗蛋白消化率CPD之間呈負(fù)相關(guān)性，其相關(guān)性方程為：CPD=－24.936ln（P）+97.067，R2=0.8826，n=4（P＞0.05）。可見(jiàn)，日糧蛋白質(zhì)水平的提高并沒(méi)有增加粗蛋白消化率，這可能與雄性梅花鹿仔鹿瘤胃對(duì)粗蛋白的降解能力有限及日糧中優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料的含量有關(guān)。

2.3 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)梅花鹿仔鹿鈣、磷食入量及消化率的影響

不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)仔鹿鈣、磷食入量及消化率的影響見(jiàn)表4。

表4 不同蛋白質(zhì)水平對(duì)鈣、磷食入量及消化率的影響Table 4 Effects of different level proteins on the intake and apparent digestibility of Ca and P

從表4中可以看出，隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，仔鹿對(duì)食入鈣及食入磷的量均增加，但差異并不顯著（P＞0.05）。日糧不同蛋白質(zhì)水平對(duì)仔鹿鈣消化率無(wú)顯著性影響（P＞0.05），但對(duì)仔鹿磷消化率的影響顯著（P＜0.05）。

2.4 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)梅花鹿仔鹿血液生化指標(biāo)的影響

不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)仔鹿血清總蛋白、白蛋白及尿素氮的影響見(jiàn)表5。

各組仔鹿血清總蛋白濃度之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）（見(jiàn)表5），當(dāng)日糧蛋白質(zhì)水平大于14.26%時(shí)，仔鹿血清總蛋白濃度隨日糧蛋白質(zhì)水平的提高而增加。

仔鹿血清白蛋白濃度之間未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著水平（P＞0.05）。隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，仔鹿血清尿素氮濃度極顯著升高（P＜0.01）。4月23日，D組仔鹿平均血清尿素氮濃度最高，為364.39 mg·L－1。

表5 不同蛋白質(zhì)水平對(duì)血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of different level proteins on serum biochemical parameters in serum（mg·L-1）

圖3 蛋白質(zhì)采食量與血清尿素氮濃度的關(guān)系Fig.3 Relationship between protein intake and concentration of serum BUN

如圖3所示，隨著蛋白質(zhì)采食量CPI的增加，血清尿素氮濃度BUN也增加，兩者間的回歸方程為：BUN=0.406 CPI+141.05，R2=0.9082，n=4（P＞0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，血清尿素氮濃度與梅花鹿仔鹿蛋白質(zhì)采食量關(guān)系密切。尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，血清尿素氮也是腎功能的主要指標(biāo)之一，其濃度升高與降低與日糧蛋白質(zhì)的采食量的多少有關(guān)。機(jī)體長(zhǎng)期食入高蛋白質(zhì)日糧，腎負(fù)擔(dān)增加，腎小球?yàn)V過(guò)率降低，血液中血清尿素氮的濃度就會(huì)增加。因此，控制梅花鹿日糧中蛋白質(zhì)采食量在養(yǎng)鹿生產(chǎn)中也是對(duì)其實(shí)施的一種保護(hù)措施。

3 討論

目前，有關(guān)雄性梅花鹿仔鹿配合日糧適宜蛋白質(zhì)水平的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)針對(duì)梅花鹿這一生理時(shí)期，進(jìn)行不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)其飼養(yǎng)、消化及血清生化分析的試驗(yàn)，通過(guò)配合日糧中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)其生長(zhǎng)及消化性能的影響來(lái)篩選最佳的雄性梅花鹿仔鹿配合日糧的蛋白質(zhì)水平。

雄性梅花鹿的鹿茸是可以每年完全再生的哺乳動(dòng)物器官，鹿茸的再生依賴(lài)于角柄的存在，而營(yíng)養(yǎng)與角柄生長(zhǎng)有著特殊的關(guān)系。Fennessy與Suttie等早在八十年代初就已經(jīng)得出結(jié)論[10－11]，在鹿的體重達(dá)到一定的閥值時(shí)（馬鹿約56 kg），角柄才開(kāi)始生長(zhǎng)，體重由營(yíng)養(yǎng)水平?jīng)Q定，而與年齡和季節(jié)無(wú)關(guān)。蛋白質(zhì)水平是決定營(yíng)養(yǎng)水平的重要指標(biāo)之一，因此對(duì)雄性梅花鹿仔鹿蛋白質(zhì)水平進(jìn)行調(diào)控，為進(jìn)一步研究蛋白質(zhì)與梅花鹿鹿茸生長(zhǎng)的關(guān)系打下基礎(chǔ)。

利用配合顆粒飼料飼養(yǎng)梅花鹿在養(yǎng)鹿業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家相當(dāng)普遍，但在我國(guó)尚不多見(jiàn)。為適應(yīng)當(dāng)前養(yǎng)鹿業(yè)向集約化、規(guī)?；?jīng)營(yíng)方向發(fā)展的需要，我們根據(jù)仔鹿生長(zhǎng)過(guò)程中的營(yíng)養(yǎng)需要和飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制不同蛋白質(zhì)水平配合顆粒飼料配方，并結(jié)合國(guó)內(nèi)外的生產(chǎn)工藝生產(chǎn)配合顆粒飼料，以確定適宜仔鹿生長(zhǎng)的配合顆粒飼料配方。馬澤芳等人通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)觀察[12]，育成雄性梅花鹿對(duì)顆粒飼料的采食效果優(yōu)于常規(guī)飼料，且提高了適口性，這可能與壓粒過(guò)程中顆粒飼料中所含淀粉原料（玉米）發(fā)生了糊化。有人研究在提供動(dòng)物顆粒飼料或粉狀飼料時(shí)，大多數(shù)動(dòng)物也更喜歡顆粒飼料。本試驗(yàn)所用配合飼料原料全面、豐富，包括仔鹿生長(zhǎng)所需要的粗飼料、精飼料以及鹿用飼料添加劑，大大改善了仔鹿對(duì)飼料的適口性，這也是鹿業(yè)規(guī)?；B(yǎng)殖的發(fā)展方向之一。

從四種不同蛋白質(zhì)水平配合日糧對(duì)雄性梅花鹿仔鹿的粗蛋白消化率可知，10.27%蛋白質(zhì)組具有最高的消化率，并且隨著蛋白質(zhì)水平的提高消化率具有極顯著下降趨勢(shì)（P＜0.01），18.60%蛋白質(zhì)組的消化率僅有24.00%。此結(jié)果表明，給予雄性梅花鹿仔鹿高蛋白質(zhì)水平日糧不但沒(méi)有促進(jìn)仔鹿對(duì)蛋白質(zhì)的消化率，反而使其降低，而低蛋白質(zhì)水平卻能維持梅花鹿應(yīng)有的瘤胃消化體系，使得其對(duì)粗蛋白的消化率高于其他組。另外，此消化試驗(yàn)間接證明了，日糧中粗飼料比例較多時(shí)對(duì)促進(jìn)瘤胃消化功能以及瘤胃中蛋白質(zhì)降解有一定的作用。

14.26%組仔鹿體增重較高，干物質(zhì)消化率較高，料重比較低。隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，各組仔鹿對(duì)干物質(zhì)采食量增加，在飼喂低蛋白質(zhì)水平日糧時(shí)就可以使得仔鹿體重增加，滿足仔鹿生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，且保證仔鹿適宜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。對(duì)大多數(shù)動(dòng)物，日糧中蛋白質(zhì)缺乏可導(dǎo)致采食量降低，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)缺乏降低了消化酶的合成量，并抑制瘤胃細(xì)菌的發(fā)酵作用，導(dǎo)致體蛋白質(zhì)分解。由此試驗(yàn)中雄性梅花鹿仔鹿干物質(zhì)采食量與每日體增重的比例可知，蛋白質(zhì)水平高的日糧不一定會(huì)導(dǎo)致梅花鹿日增重量最高，而14.26%蛋白質(zhì)組日糧的料/重比為最低，可以推測(cè)，14.26%蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)梅花鹿仔鹿的生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用。

一般來(lái)說(shuō)，梅花鹿瘤胃體系中氮可通過(guò)瘤胃中氮素再循環(huán)以及部分過(guò)瘤胃蛋白來(lái)利用，而沒(méi)有被利用的氮會(huì)隨著機(jī)體的消化系統(tǒng)排泄到自然界中，對(duì)環(huán)境造成污染。因此，有效控制仔鹿對(duì)蛋白質(zhì)的采食量及消化率，可以控制仔鹿代謝產(chǎn)物對(duì)環(huán)境造成的危害。由于高蛋白組配合日糧中額外添加了玉米蛋白粉，使得飼料成本增加，將會(huì)給一般的梅花鹿養(yǎng)殖企業(yè)帶來(lái)一定的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。雖然此試驗(yàn)表明，日糧中蛋白質(zhì)水平較高時(shí)雄性梅花鹿仔鹿對(duì)粗蛋白及可消化粗蛋白的食入量較高，但其消化率的降低還是說(shuō)明了仔鹿對(duì)蛋白質(zhì)消化能力的欠缺。因此綜合以上所有考慮，雄性梅花鹿仔鹿配合日糧蛋白質(zhì)水平以14.26%為宜。

4 結(jié)論

仔鹿體重、增重及平均日增重?zé)o顯著性差異（P＞0.05），14.26%組平均日增重為128.73 g·d－1·頭－1；仔鹿干物質(zhì)消化率各組之間差異顯著（P＜0.05）；14.26%組料重比最低；食入鈣、食入磷及鈣消化率無(wú)顯著性差異（P＜0.05），對(duì)仔鹿磷消化率的影響較顯著（P＜0.05）；18.60%組粗蛋白消化率極顯著低于10.27%組和14.26%組（P＜0.01）；仔鹿食入粗蛋白量增加，18.60%蛋白質(zhì)組最高，為522.66 g·d－1·頭－1；各組血清總蛋白及白蛋白濃度之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；血清尿素氮濃度極顯著升高（P＜0.01）。

梅花鹿仔鹿配合日糧適宜蛋白質(zhì)水平為14.26%。

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