247例人乳頭狀病毒感染與宮頸病變關系的分析

張 蓓,林清平,陳小苑

(福建省廈門市第二醫院婦產科,福建廈門,361021)

人乳頭狀病毒(HPV)感染的檢測是篩查和預防宮頸癌的關鍵問題之一。本研究采用核酸分子快速導流雜交基因微陣列分型檢測技術,以廈門市第二醫院婦科門診及住院女性HPV感染患者為研究對象,探討HPV感染與宮頸病變的關系。

1 對象和方法

搜集2008年12月～2011年8月廈門市第二醫院婦科門診及住院女性2385例宮頸HPV分型檢測結果,其中HPV感染共502例,陽性檢出率21.04%,選擇感染高危型HPV又可追查到同期宮頸病理結果的患者209例,感染低危型HPV(因子宮肌瘤、子宮腺肌癥等疾病術前行HPV檢測,術后宮頸病理結果)的患者38例。患者年齡26 64歲,平均36歲。本研究以這247例患者為研究對象,探討HPV感染與宮頸病變的關系。

根據我院病理科診斷,247例患者根據宮頸病變程度將其分成4組:①慢性宮頸炎組,86例,占34.82%;②低級別鱗狀上皮病變組,包括CIN I 63例,占25.51%;③高級別鱗狀上皮病變組,包括CIN Ⅱ49例,CIN Ⅲ36例,共占34.41%;④宮頸癌組,13例,均為鱗狀細胞癌,占5.26%。

主要試劑及儀器:HPV核酸擴增分型檢測系統,包括DNA提取試劑盒、PCR擴增試劑盒及雜交試劑盒和醫用核酸分子快速雜交儀由潮州凱普生物科技有限公司生產,TC-25/H基因擴增儀由杭州博日科技有限公司生產。

樣本采集和測定:①HPV分型標本取樣步驟及要求以潮州凱普生物有限公司生產的一次性宮頸細胞采集器取宮頸脫落細胞標本,先用棉簽將陰道或宮頸過多的分泌物輕輕擦拭干凈,再用專用宮頸刷伸入宮頸口處輕輕轉動宮頸刷使其順時針旋轉5圈,然后再放入專用細胞保存液試管中。以上標本均于4℃保存,2周內檢測。②HPV的分型檢測 嚴格按照凱普HPV分型檢測試劑盒要求進行DNA提取,PCR擴增,快速導流雜交,顯色后對樣本進行結果判斷,共能檢測16、18 、31 、33 、35 、39 、45 、51 、52 、56 、58 、59 、68 、6 、11 、42、43、44 、53、66、CP8304 等 21 種 HPV 基因型 。

所有數據錄入計算機,采用Minitab15統計軟件進行統計學分析。

2 結 果

2.1 HPV檢測結果

在247例HPV感染患者中,檢出21種亞型中的18種亞型,共314株HPV病毒,未檢出42、43及44亞型。高危型HPV感染率最高的3種亞型分別是:16型21.97%(69/314),52型17.52%(55/314),58型11.15%(35/314),其他亞型分別為33型5.41%(17/314),18型5.1%(16/314),31型4.46%(14/314),68型3.5%(11/314),56型3.5%(11/314),39型2.23%(7/314),51型1.91%(6/314),45型1.59%(5/314),59型1.27%(4/314),35型0.64%(2/314);低危型HPV感染率最高的3種亞型分別是:53型7.32%(23/314),CP8304型5.73(18/314),6型2.87%(9/314),其他亞型分別為11型1.91%(6/314),66型 1.91%(6/314)。單一高危型感染152例;單一低危型感染37例;多重感染58例,其中僅同時感染多種高危型31例,同時感染多種低危型1例,同時感染高危和低危型26例。

2.2 HPV感染類型與宮頸病變的關系

根據患者感染的HPV類型,可以把患者分為3組:A組:僅感染高危型HPV(包括單一亞型感染和多種亞型混合感染),B組:僅感染低危型HPV(包括單一亞型感染和多種亞型混合感染),C組:同時感染高危型和低危型HPV的混合型感染。3種感染與宮頸病變類型間的關系見表1。

表1 HPV類型與宮頸病變類型間的關系

2.3 多重HPV感染與宮頸病變的關系

為了研究多重HPV感染與宮頸病變類型的關系,本研究將HPV多重感染患者分為:D組,僅同時感染多種高危亞型HPV;E組,同時感染多種低危亞型HPV。將感染單一HPV患者分為:F組,僅感染一種高危亞型HPV;G組,僅感染一種低危亞型HPV。結果見表2。

表2 HPV多重感染與宮頸病變類型間的關系

從表2可見,感染多種高危亞型HPV與感染單一高危亞型HPV對感染者的病變類型并無影響。本次研究中因感染多種低危亞型HPV樣本量過少,故無法完成與單一低危亞型HPV感染的比較。

2.4 不同宮頸病變類型患者中HPV亞型分布

慢性宮頸炎組中檢測出 16、18、31、33、39、51、52 、56、58 、59、68、6、11 、53、66、CP8304 亞型,感染率最高的3種亞型分別是:52型 27.18%(28/103),16型10.68%(11/103),CP8304型10.68%(11/103);低級別鱗狀上皮病變組中檢測出16 、18、31、33、35、39 、45、52、56、58、59 、68、6、11、53.、66、CP8304 亞型,感染率最高的3 種亞型分別是:52型16%(16/100),68型14%(14/100),16型12%(12/100);高級別鱗狀上皮病變組中檢測出 16、18、31 、33、45、51 、52、56、58、59 亞型,感染率最高的3種亞型分別是:16型41.05%(39/95),18型26.31%(25/95),52型13.68%(13/95);宮頸癌組中檢測出 16、18、45、56、58 、68亞型,感染率最高的3種亞型分別是:16型50%(8/16),18型18.75%(3/16),45型12.5%(2/16)。HPV16與宮頸病變嚴重程度明顯相關,他在宮頸癌、高級別鱗狀上皮病變組、低級別鱗狀上皮病變組和宮頸炎組感染率分別為50%、41.05%、12%、10.68%。4組HPV感染率相比差異顯著(χ2=40.525,P<0.01)。

3 討 論

宮頸癌是女性生殖系統中發病率占第1位的婦科惡性腫瘤,嚴重威脅了婦女的生命健康。德國科學家Harald Zur Hausen因提出人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌發病的相關性學說而獲得2008年諾貝爾生理和醫學獎,使得宮頸癌發病的傳統腫瘤研究模式轉化為以HPV感染為中心的新病因學的研究模式。持續性高危型HPV感染導致宮頸病變和宮頸癌發生學說的確立,使宮頸癌成為目前唯一一種病因明確的可以預防和治愈的惡性腫瘤[1-2]。宮頸癌在全球婦女癌癥死亡率中位居第2位,每年全球大約有50萬新發宮頸癌病例,約20萬人死于宮頸癌。HPV作為宮頸癌的主要病因的發現揭示了其感染性疾病的本質,這對預防和治療都產生了巨大的影響[3]。目前已經分離出 100多種HPV基因型,不同類型的HPV致病力存在較大的差異。根據與女性生殖道疾病的關系,HPV被分為高危型群和低危型群,其中以高危型與宮頸癌的發生關系最為密切[4]。

從表1的結果來看,單純高危型HPV感染與單純低危型HPV感染組相比,高危型HPV感染者宮頸癌構成比顯著高于低危型HPV感染者。提示宮頸癌的發生與高危型HPV關系密切。

高危型HPV持續感染是宮頸癌及癌前病變發生發展的必要條件,而HPV的多重感染是否會增加和促進宮頸癌變的發生目前卻無統一說法。多數人認為,多重感染并不增加宮頸癌的發生率[5-6],但也有學者認為多重感染促進宮頸癌的發生[7]。本研究中從表2結果來看,高危型HPV的多重感染與單一亞型感染比較(χ2=1.284,P>0.05)不同宮頸疾病的構成比差別不顯著,與周武等的研究結果相一致[8]。提示高危型HPV無論單一或多重感染并不改變宮頸病變的程度。

宮頸癌組織中主要感染的HPV基因型存在地理差異。在本次研究中宮頸癌的主要感染型別依次是:16型(50%),18型(18.75%),45型(12.5%),與國際癌癥研究協會的調查基本相近[5]。宮頸癌及高級別鱗狀上皮病變組中HPV16型感染率均居首位,且隨病變級別增加感染率逐步上升,提示HPV16型感染仍是宮頸癌的最大威脅。

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