AQP5在宮頸鱗癌中的表達及意義

蘇 琳,吳王飛,張 翔

(南京醫科大學附屬南京市婦幼保健院,1.婦產科;2.病理科,江蘇南京,210004)

水的跨膜轉運是細胞生存生長的關鍵條件。尤其對于腫瘤細胞來說,其快速增殖、分裂和侵襲轉移等特性更離不開水的微環境,腫瘤細胞比正常細胞更需要水分子的快速跨膜轉運。近年來,人們發現水通道蛋白(AQPs)能夠介導水快速被動的跨生物膜轉運,是水進出細胞的主要途徑[1],AQPs作為一個關鍵因素參與多種腫瘤的生長、轉移[2]。已經發現,哺乳動物水通道蛋白家族有13個成員(AQP0～AQP12)[3]。到目前為止,只報道了AQP1、AQP4和AQP8與宮頸鱗癌的發生發展和預后有關。而AQP5與宮頸鱗癌的相關研究在國內外鮮有報道。因此,本研究旨在應用免疫組織化學技術檢測AQP5在宮頸鱗癌組織中的表達和分布特點,并且分析AQP5與宮頸鱗癌的臨床病理因素之間的關系,探討其在宮頸鱗癌發生發展過程中的作用,現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

標本取自南京市婦幼保健院病理科2009年1月～2010年12月手術及門診活檢宮頸標本共85例,其中正常宮頸上皮組織35例,年齡28～67歲,平均48.5歲;宮頸鱗癌患者 50例,年齡25～68歲,平均46.7歲。所有患者術前未接受化療、放療或免疫治療。

1.2 方法

1.2.1 標本的處理:收集的全部標本均經10%中性甲醛液固定,梯度脫水、浸蠟和包埋。所取蠟塊行5 μ m連續切片 、烘烤、脫蠟 、HE 染色、透明和封片。以上標本均經醫院病理科2位副主任以上職稱的病理醫師診斷證實,并有完整的臨床和病理資料。

1.2.2 免疫組織化學:應用兔抗人AQP5多克隆抗體(購自美國ABCAM公司)對宮頸鱗癌組織及對照正常組織AQP5蛋白行免疫組化DAB法檢測。染色過程如下:石蠟切片梯度酒精脫水后,3%過氧化氫孵育10 min,微波修復抗原10 min,滴加非免疫血清,室溫孵育1.5 h,加入1∶200兔抗人AQP5多克隆抗體4°C過夜,經DAB顯色,蘇木素復染,封片。存在棕黃色或棕褐色顆粒判為陽性細胞,選背景清晰陽性表達效果好的切片作統計學分析。每張切片隨機選擇10個高倍視野,計數1 000個細胞中的陽性細胞取其平均數計算陽性細胞表達率(%)。

2 結 果

2.1 AQP5蛋白在不同宮頸組織的表達

AQP5蛋白在正常宮頸組織中幾乎不表達,但是在宮頸鱗癌組織中主要位于細胞膜上。以細胞膜上表達AQP5的細胞認為是AQP5表達陽性,結果發現AQP5在宮頸鱗癌組織中平均表達陽性率為36.89%。宮頸鱗癌組織中AQP5的表達顯著高于正常宮頸組織(P<0.01)。見圖1。

圖1 AQP5在正常宮頸組織和宮頸鱗癌組織中的表達和定位(400倍)

表1 50例宮頸鱗癌組織中AQP5與臨床病理因素間的關系

2.2 AQP5與臨床病理因素之間的關系

通過免疫組織化學方法,對50例宮頸鱗癌組織中AQP5的表達率進行分析。AQP5與宮頸鱗癌臨床病理因素之間的關系,見表1。根據平均表達陽性率高低將宮頸鱗癌組織分為2組:高表達組24例和低表達組26例。腫瘤組織中AQP5蛋白表達與患者年齡、腫瘤大小、分級、FIGO分期無關,但伴淋巴結轉移腫瘤組織中AQP5表達明顯高于未轉移者(P<0.01)。

3 討 論

宮頸鱗癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一,嚴重威脅女性的健康和生命。盡管目前宮頸鱗癌的治療手段在不斷提高,但是人們對宮頸鱗癌的預后還不是特別滿意。人們認為提高宮頸鱗癌的預后關鍵還依賴于早期預測。因此尋找好的宮頸鱗癌預測及預后指標至關重要。

AQPs是具有高度選擇性的水通道特異蛋白質家族,種類多,在機體中的分布比較廣泛。目前研究顯示,AQPs主要在細胞質膜上表達,它能夠促進細胞遷移和參與血管形成[4-5],在多種不同來源的腫瘤中都有強表達,尤其是具有侵蝕性的腫瘤。AQP5是AQPs家族蛋白成員之一,它定位于人染色體12q3,由265個氨基酸組成,分子量27kD。研究表明AQP5在多種腫瘤的發生發展中具有重要的作用[6-7]。Shen等[8]發現AQP5在胃癌組織中高表達,并且和淋巴結轉移和淋巴血管侵襲相關;AQP5在非小細胞肺癌的侵襲中具有重要作用,是非小細胞肺癌新的治療靶點和預后指標[9];卵巢惡性及交界性腫瘤組織中AQP5表達明顯高于良性腫瘤和正常卵巢組織,且和淋巴結轉移密切相關[5];此外,沉默AQP5能夠抑制結腸癌細胞增殖,并且體外成瘤實驗表明抑制AQP5能夠影響裸鼠成瘤并且抑制腫瘤生長[10]。

盡管很多研究表明AQP5在腫瘤生長、侵襲和轉移中具有重要的作用,但是在宮頸鱗癌中的作用卻鮮有報道。本研究中通過免疫組織化學方法,檢測了AQP5在宮頸鱗癌和正常宮頸組織中的表達和定位,發現AQP5在正常宮頸組織中幾乎不表達,而在宮頸鱗癌組織中主要定位癌細胞的細胞膜上。進一步通過分析宮頸鱗癌組織中AQP5的表達與臨床病理因素間的關系,發現AQP5表達高低和患者的年齡、腫瘤大小、分級、FIGO分期無關,僅僅和淋巴結轉移相關,提示AQP5可能參與宮頸鱗癌的轉移,可能成為宮頸鱗癌有效的預后指標。

總之,AQP5蛋白表達與宮頸鱗癌的淋巴結轉移相關,而與年齡、腫瘤大小、分級、國際婦產科協會(FIGO)分期無關,宮頸鱗癌中AQP5蛋白高表達可能和惡性腫瘤的生物學行為相關。

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