高效液相色譜法測定硫酸羅通定注射液中羅通定的含量

邵雪力

（河南省周口市食品藥品檢驗所，河南 周口 466000）

硫酸羅通定注射液，本品為淡黃色至黃色的澄明液體，遇光受熱色澤加深。本品具有鎮痛、鎮靜、催眠及安定作用。本品的作用機制尚待闡明，可能與通過抑制腦干網狀結構上行激活系統、阻滯腦內多巴胺受體的功能有關。治療量無成癮性。適用于消化系統疾病引起的內臟痛（如胃潰瘍及十二指腸潰瘍的疼痛）、一般性頭痛、月經痛、分娩后宮縮痛。適用于緊張性疼痛或因疼痛所致的失眠患者。國家藥品標準采用紫外-可見分光光度法測定含量，本文采用HPLC法，對硫酸羅通定注射液進行含量測定。實驗結果表明，本法專屬性強、穩定性好，可作為含量測定的質控指標之一。

1 儀器及工作條件

島津LC-2010C型全自動高效液相色譜儀，SCL-10AVP型紫外檢測器，N2000液相色譜數據工作站；92sM-202ADR電子分析天平；PHS-3C酸度計；AS5150A型超聲波振蕩器。羅通定對照品（批號：100452-200301，中國藥品生物制品檢定所），硫酸羅通定注射液，規格：2mL∶60mg（市售品，天津藥業焦作有限公司，批號：100506；廣西河豐藥業有限公司，批號：091001與批號：100803），磷酸二氫鉀溶液、庚烷磺酸鈉溶液及三乙胺均為分析純；甲醇為色譜純；水為純化水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：磷酸鹽緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1∶1），含0.2%三乙胺，用磷酸調pH至6.55）-甲醇（40∶60），檢測波長為280nm，流速為1mL/min。柱溫：30℃；進樣量：20μL。在此條件下，羅通定保留時間為：12.7min。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取羅通定對照品0.0278g，置于100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取濾液10mL于100mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取20μL進樣測定，記錄色譜圖。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取本品1mL（約相當羅通定30mg），置于100mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取濾液10mL于100mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取20μL進樣測定，記錄色譜圖。

2.4 線性關系的考察

精密稱取羅通定對照品0.0278g，置于100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。精密量取儲備液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0mL分別置于50mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻；按上述色譜條件，各取20μL進樣，記錄色譜圖，以峰面積Y為縱坐標，對照品進樣量（mg/mL）為橫，進行線性回歸。得回歸方程（n=6）為：Y=45.912X-6.8502 r=0.9997，線性范圍為：5.56～139μg/mL。

2.5 重復性實驗

精密量取同一批號樣品1mL（約相當于羅通定30mg）3份，按樣品測定項下的方法測定羅通定的含量，分別為：99.8%、100.2%、100.5%，RSD為0.35%。

2.6 穩定性實驗

取重復性實驗中的第一份溶液，室溫下在0、1、2、3、4h測定，記錄各峰面積并計算RSD，計算得RSD=0.41%，n=5，結果表明，本品的供試品溶液在室溫4h內基本穩定。

2.7 精密度試驗

取同一份對照品溶液，連續進樣5次，每次20μL，計算各成分的峰面積并計算RSD，結果RSD為0.35%，表明該系統的精密度較好。

2.8 加樣回收率實驗

精密稱取已知含量的樣品（批號：091001）1mL（約相當于羅通定30mg）5份，分別置于100mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取10mL于100mL容量瓶中，分別精密加入羅通定對照品儲備液27.8μg，加流動相稀釋至刻度，照樣品測定項下的方法測定，結果見表1。

表1 回收率測定結果表（n=5）

2.9 樣品含量的測定

按上述“2.1”色譜條件，從“2.2”、“2.3”中，各取20μL進樣測定，記錄色譜圖；按外標法以峰面積計算，測得結果與國家藥品標準[1]方法比較，結果見圖1、2和表2。

圖1 對照品圖譜

圖2 樣品圖譜

表2 用本法和標準法測定羅通定含量結果（n=3）

3 討 論

3.1 流動相的選擇

參考同品種國家藥品標準的流動相[1]，以磷酸鹽緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1∶1），含0.2%三乙胺，用磷酸調pH至6.55-甲醇（40∶60）較合適，且保留時間適宜；加入0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液，能提高柱效，加入三乙胺可改善拖尾。

3.2 本法與國家藥品方法相比較，二者結果無明顯差別，且該方法簡便快捷，用來作為注射液的含量控制其準確度已足夠，為藥品標準的制定提供了一定的參考。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫藥科技出版社,2010.