胃癌前病變微血管密度的表達及其臨床意義▲

李素艷 林瑤光 蔣建坤 劉 瑩 蔣敦科 李 萍

(1廣西醫科大學第一附屬醫院老年消化科，南寧市 530021;2廣西醫科大學第一附屬醫院病理科，南寧市 530021)

胃癌和其他部位的腫瘤一樣，其發生發展也是一個多因素、多步驟的復雜過程，了解胃癌的發生發展過程對早期診斷胃癌提供了重要的線索和依據，也為早期治療提供了必要前提。實體腫瘤的生長依賴于新生血管的生成，腫瘤血管的生成是腫瘤生長和轉移的必要條件，血管生成為腫瘤的生長提供了營養，也為腫瘤細胞轉移提供了通道。微血管密度(microvessel density，MVD)測定是臨床上判定腫瘤惡性程度和預后的重要的生物學指標［1，2］。本研究采用免疫組化法對輕度淺表性胃炎組織、胃癌前病變組織及胃癌組織進行MVD檢測，以了解不同病變組織中MVD的表達情況及其臨床意義。

1 材料和方法

1.1 材料 收集廣西醫科大學第一附屬醫院2007年10月至2008年10月胃鏡活檢標本蠟塊75例，其中輕度淺表性胃炎作為正常對照組15例，不典型增生和腸上皮化生即胃癌前病變組25例，早期胃癌組17例，進展期胃癌組18例。男 49例，女 26例;年齡 18～77歲，平均(52±3.35)歲。所有病例和標本要求滿足以下條件:經10%甲醛溶液固定，石蠟包埋;未經放療和化療。

1.2 試劑 主要試劑為鼠抗人CD34單克隆抗體、濃縮型DAB試劑盒和多聚賴氨酸，均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 方法 標本經10%中性福爾馬林液固定，常規脫水包埋，4 μm厚連續切片，分別進行HE染色和免疫組化染色。免疫組織化學染色法具體操作步驟如下:采用EnVision(二步法)，按EnVision超敏試劑盒說明書操作，經微波行抗原修復，DAB顯色，最后用蘇木素復染、脫水、封片。每批染色均設陰性對照(以PBS代替一抗)和用已知陽性片作陽性對照。

1.4 MVD判斷標準及計算方法 結果判斷由兩位經驗豐富的病理醫師來判讀。MDV測定計數按Weidner法進行計算。先在低倍鏡(10×)下選取微血管最豐富的熱區(hot spot)，避開腫瘤壞死和出血區域。然后在高倍視野下計算該區域視野的微血管數目，取平均值作為MDV［3］。

1.5 統計學處理 采用SPSS 11.0統計軟件進行統計分析，組織中MVD的表達差異性及其和EGFR的相關性采用方差分析。

2 結果

2.1 MVD表達情況 各組病例MVD表達隨著病變惡性

圖1 MVD在組織中的表達(SP×400)

3 討論

MVD是對新生血管生成做出定量描述的一個指標。MDV在對照組、胃癌前病變組、早期胃癌組和進展期胃癌組之間相比有明顯差異(P＜0.05)。隨著病變惡性程度的增加，MVD值逐漸增加，各組間的差異有統計學意義，說明MVD值越高，病變惡性程度越高。

腫瘤是由各種不同的基因蛋白共同作用來影響細胞增殖和生化的。腫瘤血管是腫瘤生長和轉移的物質基礎，惡程度的增加而增加，各組間表達差異有統計學意義(P＜0.05)。具體情況如表1所示。

表1 各組病例MVD表達情況

2.2 MVD和EGFR表達的相關性 各組病例MVD和EGFR的表達呈正相關關系，如表2所示。

表2 各組病例MVD和EGFR的相關性

圖2 EGFR在進展期胃癌組織中的表達(SP×400)

2.3 MVD和EGFR表達特征 MVD(CD34)陽性產物呈棕黃色顆粒狀，定位于血管內皮細胞胞質和胞膜，凡是陽性著色的孤立內皮細胞或內皮細胞簇均被認為是一條獨立血管，只要結構不連續，分支結構也作為一個血管，如圖1所示。EGFR陽性細胞膜或細胞漿呈棕黃色顆粒狀，如圖2所示。性腫瘤具有誘發宿主血管生成的能力。已經發現，在腫瘤形成早期并沒有血管出現，這時腫瘤生長緩慢呈線性增長，并可長期處于休眠狀態。當形成腫瘤血管后，腫瘤進入指數生長期而迅速生長，并可出現轉移。多血管是腫瘤具有侵襲性的特征。近年來對腫瘤血管生成的研究表明，血管生成在實體腫瘤的惡變、生長、轉移等方面起至關重要的作用。腫瘤血管生成已成為判斷惡性腫瘤轉移與否及預后的重要指標。趙坤等［4］研究發現，MVD值越高，淋巴結轉移的發生率越高，臨床分期也發生遞增，說明MVD與淋巴結轉移及臨床分期呈正相關。同時研究還發現MVD值與浸潤程度、轉移密切相關，并呈顯著正相關趨勢。提示CD34抗原不僅能客觀地反映腫瘤中MVD，并能作為判斷胃癌轉移與否及預后的重要依據。本研究結果顯示，MVD均數在對照組、胃癌前病變組、早期胃癌組和進展期胃癌組中呈逐級上升趨勢，且與EGFR之間呈正相關，與潘衛新等［5］研究顯示EGFR值與MDV呈正相關一致。與李素艷等［6］研究結果顯示胃對照組、胃癌前病變組、早期胃癌組和進展期胃癌組織中，隨著病變惡性程度增加，EGFR的表達率逐漸增加，表明EGFR的表達率高低與病變的惡性程度有關相一致，而EGFR值與MDV呈正相關。

綜上所述，我們可以根據胃癌前病變組織中MVD和EGFR表達的高低及陽性與否來判斷他們的預后情況，從而決定對他們采取不同的治療措施。兩者均可作為判斷胃癌前病變患者病情及預后判斷的參考指標。

［1］魏麗軍，李建民，從 娟，等.宮頸癌微血管計數和血管內皮生長因子的表達［J］.中國藥物與臨床，2004，4(5):344 －346.

［2］熊正文，徐昌富，李宏偉，等.非小細胞肺癌中血管內皮標記物顯示微血管密度的對比研究［J］.中華胸心血管外科雜志，2003，19(4):223－225.

［3］Weidner N.Intratumor microvessel density as a prognostic factor in cancer［J］.Am J Pathol，1995，147(1):9 －19.

［4］趙 坤，杜金榮.結腸癌與直腸癌的MVD對比研究［J］.齊齊哈爾醫學院學報，2010，31(15):2355 －2357.

［5］潘衛新，卜 平，朱海航.胃癌及癌前病變中的TFF21、EGFR表達與血管再生的相關性研究［J］.臨床消化病雜志，2009，21(6):339－341.

［6］李素艷，蔣建坤，林瑤光，等.胃癌前病變表皮生長因子受體表達及其意義［J］.廣西醫學，2010，32(7):766 －768.