應用幾丁糖-膠原-二丙酸倍他米松緩釋復合膜提高周圍神經修復療效的實驗研究

陸九州,蔣軍健,徐建光,徐文東,徐雷,勞杰,顧玉東

復旦大學附屬華山醫院手外科,上海200040

神經縫合口局部的疤痕增生是阻礙周圍神經損傷修復的一個重要原因[1,2]。疤痕組織可與損傷神經粘連、直接壓迫、并影響神經血供;也可生長入縫合口間隙,阻礙近端再生的神經纖維通過縫合口,阻礙神經再生,影響其功能恢復。本研究將二丙酸倍他米松(甾體類激素)加入具有緩釋功能的幾丁糖-膠原復合膜中,應用于神經縫合口周圍,觀察其促進神經再生、提高神經功能恢復的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 ①動物:健康雄性SD大鼠36只,體質量(150±10)g,由中科院實驗動物中心提供。②主要試劑與材料:酸溶性幾丁糖(購于上海其勝生物制劑有限公司);膠原(購于Sigma公司);二丙酸倍他米松(購于比利時先靈葆雅公司);聚-DL-乳酸膜(購于成都迪康中科生物醫學材料有限公司);神經絲蛋白(Neurofilament,NF)兔多克隆抗體(購于美國Abcam公司),異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)標記的羊抗兔IgG(購于美國Sigma公司)。Phasis四道程肌電誘發儀(購于意大利 ESAOTE公司);Axiocam M R R3熒光顯微鏡(購于德國Carl Zeiss公司)。

1.2 方法

1.2.1 幾丁糖-膠原-二丙酸倍他米松緩釋放系統制備 3%酸溶性幾丁糖與1.5%膠原以1∶9混合,再逐漸加入二丙酸倍他米松混懸液,各1 mL,充分混合60 min,200轉/min攪拌下逐漸滴入36%甲醛2 mL,5 min后灌入模具內,靜置1 h后脫模,蒸餾水清洗后冰凍真空抽干機間斷干燥12 h,4℃下存放。

1.2.2 分組與手術 SD大鼠隨機分為A、B、C組,各組 12只。10 g/L戊巴比妥鈉40 mg/kg體質量腹腔注射麻醉大鼠,俯臥位固定。取大鼠右股后部斜切口,在手術顯微鏡(×6)下解剖脛神經,距脛神經入腓腸肌以近約1.5 cm切斷,以神經外膜上血管走行為標記,9-0無損傷線縫合神經外膜4針,針距與邊距大小以使軸突不膨出、外膜不內翻為宜。……