恩度胸腔灌注治療惡性胸腔積液的作用研究

李延文,李子明,陸 舜

(上海交通大學附屬胸科醫院,上海,200030)

肺癌是目前人類因癌癥死亡的最主要原因之一,它的發病率在北美、歐洲均列于各種腫瘤之首[1]。肺癌常常累及胸膜腔而形成惡性胸水。惡性胸水發病率高,預后差,中位生存期僅4個月,并且常常伴有呼吸困難、胸悶、氣急、乏力等癥狀,嚴重影響著晚期肺癌患者的生活質量。恩度是我國學者自主創新研發的新型人血管內皮抑素,作用機制在于抑制腫瘤新生血管形成,阻斷腫瘤細胞的營養供應[2]。目前有研究[3-4]表明,血管內皮抑制素能直接抑制血管內皮細胞增殖、遷移、分化,促進內皮細胞凋亡并對抗VEGF促進新生血管形成和增加血管通透性的作用。動物腫瘤模型研究發現[5-6]:胸腹腔內直接給予重組人血管內皮抑制素等可以抑制動物模型胸、腹腔內腫瘤的生長,并能有效防止惡性胸、腹水的形成和再發,與化療藥物之間有一定的協同作用。

本研究比較治療前良、惡性胸腔積液中VEGF及IL-8水平,再通過比較治療前后患者胸水VEGF及IL-8水平變化研究恩度胸腔灌注治療惡性胸水的客觀療效及不良反應,為臨床應用提供新的理論基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選自2008年12月～2009年12月間住本院接受診治的60例胸腔積液患者,分為:①肺癌組:共40例,男 16例,女24 例;年齡39～ 75歲,平均61歲。其中腺癌31例,鱗癌9例。所有病例均經各種檢查獲得病理診斷。②良性病變組:共20例,男 11例,女9例;年齡29～75歲,平均58歲。其中結核性胸膜炎14例,肺炎旁積液5例,膿胸l例,胸水檢查符合炎癥診斷,抗感染治療后胸水吸收。

1.2 方法

2組病例均于治療前在B超引導下行胸腔穿刺,無菌條件下采集胸水標本10 mL,并測定胸水VEGF及IL-8含量。良性病變組予抗感染治療后胸水吸收。肺癌組于胸腔置管后2～3 d內盡量將胸水引流干凈,記錄引流量,并予胸腔注射恩度,完畢后患者需每15 min～2 h變換體位1次,使得藥物在胸腔內充分彌散。用藥結束24 h重新開放引流,行胸水VEGF及 IL-8含量測定。

胸水標本均以3 000 r/min離心15 min,將胸水上清液放入2 mL Eppendoff管中,-20℃低溫冷凍備用。用雙抗體夾心酶聯免疫吸附實驗法(ELISA)測定胸腔積液VEGF與IL-8水平(pg/mL)。試劑盒由美國Bender MedSystems公司提供,操作方法按試劑盒說明書,采用全自動酶標儀(MK3型,芬蘭 THERMO公司)檢測,在450 nm讀取光密度(OD)值,以630 nm作為校正。

2 結 果

如表1所示,治療前2組患者胸腔積液中均可檢測到VEGF與IL-8,肺癌組胸水VEGF與IL-8水平明顯高于良性病變組,差異有統計學意義(P<0.01)。肺癌組恩度治療后較治療前胸水VEGF與IL-8水平顯著下降,差異有統計學意義(P<0.01)。40例惡性胸腔積液的患者中,CR 2例,PR 3例,SD 30例,PD 5例,疾病控制率(CR+PR+SD)87.5%。

表1 2組治療前VEGF和IL-8水平比較及肺癌組治療前后VEGF和IL-8水平比較

3 討 論

肺癌的發病率正在不斷上升,由于早期癥狀不明顯,發現時大部分已屬晚期。惡性胸腔積液是晚期肺癌的一個常見的并發癥,其發展迅速,如不及時處理常導致胸悶、氣急、心慌、不能平臥,并伴有大量的體液和蛋白質的消耗,給患者帶來極大的痛苦,甚至生命危險,因而肺癌并發惡性胸腔積液的診治具有很重要的意義。有研究表明惡性胸腔積液形成機制主要與血管通透性增高和淋巴回流受阻有關。新生血管是腫瘤快速生長的條件,并為腫瘤細胞進入血液和淋巴循環播散提供了間接途徑。現有研究表明內皮抑素是目前有效的內源性血管生長抑制劑之一,通過抑制血管內皮細胞增殖可以一定程度上減少惡性胸腔積液的形成。

血管內皮生長因子(VEGF)是重要的促血管生成因子。Fontanini等[7]研究提示非小細胞肺癌中VEGF呈高表達狀態,腫瘤細胞能通過自分泌方式產生VEGF。它能增加血管的通透性、刺激內皮細胞增生、誘導膠原酶等的表達。VEGF與VEGFR結合后通過酪氨酸磷酸化激活磷酸酶活性,并引起信號級聯反應和血管生成。有研究表明,血管內皮抑制素能直接抑制血管內皮細胞增殖、遷移、分化,促進內皮細胞凋亡并對抗VEGF,促進新生血管形成和增加血管通透性的作用,且不易產生耐藥性[8]。動物腫瘤模型研究發現:腹腔內給予表達血管內皮抑制素的轉基因治療或腹腔內直接給予重組人血管內皮抑制素等可以抑制胸、腹腔內腫瘤的生長,并能有效防止惡性胸、腹水的形成和再發[9]。本研究表明良性疾病患者胸水中VEGF水平明顯低于肺癌組患者,且肺癌組患者的胸腔注射恩度后VEGF的水平明顯下降,這也進一步說明恩度可以抑制VEGF達到控制惡性胸腔積液的目的。

白介素-8(IL-8)是一個重要的癌細胞自分泌的促腫瘤血管生長因子,研究發現IL-8具有促進腫瘤血管形成的作用[10],其主要作用機制包括:①促進內皮細胞的增生;②抑制內皮細胞的凋亡;③增加血管通透性;④促進膠原酶的活性。近來多項研究表明IL-8可調解腫瘤細胞及其周圍基質細胞分泌MMP2和MMP9并增強其活,而后兩者可促進血管周圍膠原酶活性和周圍基質的降解,促進內皮細胞沿著降解的細胞外基質向血管生成因子的方向移動,從而促進腫瘤血管的生成,增強腫瘤細胞的侵襲力[11];⑤IL-8還可通過趨化激活中性粒細胞使其分化為腫瘤相關巨噬細胞,后者又可分泌血管內皮生長因子(VEGF)、血小板源性的內皮生長因子和IL-8等多種促血管生成因子,對腫瘤的浸潤和轉移起到重要作用[12]。本研究表明良性疾病患者胸水中IL-8水平明顯低于肺癌組患者,且肺癌組患者的胸腔注射恩度后IL-8以及VEGF的水平均明顯下降,這也進一步說明恩度可以抑制IL-8達到控制惡性胸腔積液的目的。

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