三七片中3種皂苷成分的提取方法的改進(jìn)

夏新中(長(zhǎng)江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州434023）

李萬(wàn)江(荊州市藥品檢驗(yàn)所，湖北 荊州434000）

三七片是由三七粉加以糖粉、硬脂酸鎂制成的片劑，具有散瘀止血、消腫止痛的功效，用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外傷出血、胸腹刺痛、跌打腫痛。對(duì)于三七片中含量測(cè)定項(xiàng)三種皂苷成分的提取，藥典[1]中采取 “放置過夜，置80℃水浴上加熱回流2h”的方法，該法操作比較繁瑣，測(cè)定時(shí)間較長(zhǎng)，不利于生產(chǎn)廠家半成品檢驗(yàn)?；诔暡ㄌ幚砜梢杂脕?lái)加速物質(zhì)溶解的原理，筆者嘗試用超聲處理的辦法以對(duì)三七片中3種皂苷成分進(jìn)行提取，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明此法良好，可用于法定檢驗(yàn)三七的含量。

1 藥品與儀器

三七片(湖北億雄祥瑞藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20080501，20080302，20080603）；對(duì)照品人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，三七皂苷R1（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。AB204-N型電子分析天平（梅特勒-托利多儀器(上海）有限公司）；BP211D型電子分析天平(賽多利斯）；SKF-6型超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。戴安SUMMIT P680型高效液相色譜儀，甲醇為色譜純(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）。

2 方法與結(jié)果

2．1 對(duì)照品溶液的制備

取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品和三七皂苷R1對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含人參皂苷Rg10．4m、人參皂苷Rb10．4mg、三七皂苷R10．1mg的混合溶液，即得。

2．2 供試品溶液的制備

取三七片20片，研細(xì)，精密稱取約0．8g于編好號(hào)的具塞錐形瓶中，每批樣品各取5份，各精密加入甲醇50ml，照表1的方法對(duì)各瓶進(jìn)行提取，完成后分別濾過，取續(xù)濾液，即得。

表1 提取方法的選擇

2．3 含量測(cè)定

采用高效液相色譜法。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按表2進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm。樣品和對(duì)照品的注入量均為10μl。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄及處理見表3（對(duì)照品）和表4（樣品）。

表2 含量測(cè)定條件的選擇

表3 對(duì)照品峰面積的測(cè)定(n=3）

表4 樣品三種有效成分的含量測(cè)定(n=3）

2．4 結(jié)果

超聲回流法提取所測(cè)得3種皂苷成分的含量與藥典法所測(cè)得的含量相當(dāng)。

3 討 論

通過表4中2號(hào)樣品與1號(hào)樣品含量及4號(hào)樣品與1號(hào)樣品含量的比較可知，未采用回流提取，三七皂苷R1就未提取出來(lái)，且所測(cè)得3種皂苷成分的含量低于藥典法所測(cè)得的含量。通過表4中3號(hào)樣品與1號(hào)樣品含量及5號(hào)樣品與1號(hào)樣品含量的比較可知，超聲波處理可能對(duì)三七片中3種皂苷成分進(jìn)行有效提取且成分結(jié)構(gòu)不受影響。采用該法可使藥典中 “放置過夜”一步得到簡(jiǎn)化。同時(shí)可得知超聲波處理半小時(shí)比較合適，若時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致三七片3種皂苷成分中的某一種或幾種成分的破壞或理化性質(zhì)的改變。因此，建議采用超聲處理30min后80℃水浴回流2h的方法，可縮短檢驗(yàn)周期，為生產(chǎn)廠家半成品檢驗(yàn)提供高效快捷檢測(cè)方法，同時(shí)也有利于產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì) ．中華人民共和國(guó)藥典(一部）[M]．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：323-334．