席文華,黃新根
(江西省豐城市人民醫院檢驗科,江西 豐城 331100峽江縣人民醫院檢驗科)
高膽紅素血癥是新生兒時期的常見病,臨床上常對患高膽紅素血癥的患兒測血清鈣。我們發現用熒光滴定法測定血清總鈣時其值明顯降低,但患兒并無低血鈣的臨床癥狀及體征,推測可能為高膽紅素血癥對血清總鈣測定的影響。為此本實驗分別用熒光滴定法、比色法測血清總鈣,并同時測其游離鈣以探討膽紅素的干擾。
1.1 混合血清 取健康新生兒血清10份,總量10ml,混合搖勻。
1.2 標準膽紅素液 Sigma產品,選用既能完全溶解膽紅素,又不影響血鈣測定的0.01mol/L的NaOH液配成855μmol/L膽紅素,然后將其稀釋成不同梯度的標準液。
1.3 實驗儀器 熒光滴定法測血清總鈣用CORING公司Callcium Analyzer940,比色法測血清總鈣用CORING400E型自動生化分析儀,試劑盒由臺灣BGH生化公司提供。血清游離鈣測定用CORING Ca2+/pH Analyzer 634。
實驗所用的試劑用去離子水配制:所用的試管、滴管均經洗液浸泡,去離子水沖洗。
將一份混合血清分成7管,分別加入同一體積不同濃度的膽紅素標準液,每管所含膽紅素的濃度分別為 0、171、257、342、428、513、684μmol/L。 每管分別用三種方法測血清總鈣或游離鈣2次取均值,其結果見表1。

表1 不同方法測定血清鈣的比較
結果顯示血清游離鈣測定和比色法測定總鈣不受膽紅素的干擾。而熒光滴定法測總鈣受膽紅素濃度影響較大[1]。熒光滴定法所測總鈣均值與膽紅素濃度呈顯著負相關,回歸方程式y=1.5259-0.0007x,相關系數 γ=-0.93,P<0.01。
熒光滴定法測定總鈣簡便、所需樣品量少,重復性也較好。但膽紅素對熒光滴定法測定總鈣存在明顯干擾。故測高膽紅素患兒的總鈣時,應選用比色法測定或直接測定血游離鈣。大量的研究表明,在許多病理情況下,總鈣并不能很好地反映機體內鈣
平衡狀態,有31%的病例,總鈣和游離鈣的變化不相平行[2]。在我們的臨床觀察中也發現,以總鈣值判斷新生兒血鈣狀態很易出現“假性低鈣”現象,這是因為新生兒的總鈣值受膽紅素或血清白蛋白的影響,因此國外有專家提出,低鈣血癥應以血游離鈣值進行定義。
[1]譚 為,周衛東.標本溶血對干化學生化分析儀測定結果的影響[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(2):34.
[2]鄭鐵生.鈣、磷、鎂的代謝及調節[M].見周 新,府偉靈主編:臨床生物化學檢驗,北京:人民衛生出版社,2007,7:288-294.