卡式配血在臨床輸血中的應用價值

楊 瑩，譚雅玲，蔣永青

(江西省上饒市市立醫院檢驗科，江西 上饒 334000)

交叉配血主要是檢測紅細胞與血清、血漿的相容性。不完全/不規則抗體可能引起輸血反應，而傳統配血方法不能檢測出不完全抗體。傳統抗人球配血可檢出不完全抗體，但操作復雜，可出現假陰性。微柱凝膠法是建立在抗人球蛋白基礎上的一種新方法，可用于抗體篩查、交叉配血。該方法標本用量少，靈敏度高，特異性強，操作簡單，結果可較長時間保存[1]。我院檢驗科用微柱凝膠法對537例患者進行交叉配血，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 受血者 本院2010年6月至2010年11月需輸血的住院患者共537例，其中男性患者293例，女性患者244例，年齡4歲～82歲，內科312例、外科175 例、婦產科32例、兒科5例、血液透析科13例。輸用血液均由上饒市中心血站提供。

1.2 試劑與儀器 微柱凝膠血型卡，多特異抗人球配血卡，專用離心機和孵育箱(強生公司)；凝聚胺試劑(珠海貝索生物技術有限公司)，ABO標準紅細胞，抗人球蛋白試劑(上海血液生物醫藥有限公司)。

1.3 方法

1.3 .1血型鑒定 每位受血者、供血者交叉配血前均先進行ABO血型正反定型及Rh血型復檢。正定型及Rh血型：制備受血者、供血者1.5%紅細胞懸液20μl加入血型卡內，直接用專用離心機離心5min判讀結果。反定型：受血者、供血者血漿40μl加ABO標準紅細胞20μl直接用專用離心機離心5min判讀結果。

1.3 .2 交叉配血試驗：制備同型受供血者血清和

1.5 %的紅細胞懸液，標記抗人球卡。每孔滴加Liss液50μl，主側：40μl受血者血清加1.5%供血者紅細胞懸液20μl；次側：40μl供血者血清加 1.5%受血者紅細胞懸液20μL，37℃孵育10min后專用離心機離心5min，觀察結果，紅細胞沉積在凝膠管底部者為陰性，紅細胞聚集在凝膠帶上部為陽性。

1.3 .3凝聚胺介質法 主管供者2%紅細胞懸液1滴加受者血清2滴，次管受者2%紅細胞懸液1滴加供者血清2滴，混勻后加低離子溶液0.6ml，混勻再加凝聚胺溶液2滴，3000r/min離心15s，倒掉上清液，輕搖有凝集，再加懸浮液2滴，凝集在1min內散開為陰性，凝集不散開為陽性。

2 結果

用微柱凝膠卡氏法交叉配血537例，其中15例有凝集， 因為紅細胞懸液濃度過高而引起3例，由于纖維蛋白的影響引起2例，因疾病原因引起8例(2例腎衰病人，1例白血病，3例消化道大出血病人，1例嚴重貧血，1例腫瘤病人)，此8例均為次側凝集，用凝聚胺法檢測均為陰性。以上8例患者紅細胞直接Coombs試驗抗體為陽性。后經輸注洗滌紅細胞后期觀察，無不良反應。因冷凝集素引起1例。其中主側管凝集(2+-3+)1例，為消化道大出血有輸血史病人，用凝聚胺法復做交叉配血結果相符也為主管凝集。將上例患者的紅細胞用鹽水洗滌3次，用洗滌后的紅細胞作抗人球試驗和抗體篩檢檢測，發現患者血清中有不完全抗體，與臨床聯系，暫緩輸血。

3 討論

目前，微柱/管凝膠技術在一些先進國家已成為常規的紅細胞血型血清學檢測技術[2]。該方法為國際公認的安全輸血的推薦方法?？ㄊ綑z測法是生物化學凝膠過濾技術和免疫抗原抗體反應相結合的產物。通過調節凝膠的濃度來控制凝膠間隙大小，使其間隙只能允許游離的RBC通過，從而使游離RBC與聚集RBC分離。凝膠中已加好了各類血型抗體和抗人球蛋白，加入樣本細胞即可定型，從而簡化操作過程。強生的血型儀器采用柱凝集技術，在檢查準確性和靈敏度方面有提高。全自動的操作方式減少了人工干預，很好避免人工操作產生的錯誤。在試劑卡方面，玻璃珠介質更加耐熱耐壓，常溫保存。其加樣、離心和孵育所需時間少，所采用的不同打孔器很好的避免了交叉污染。在結果讀取方面，強生的雙面讀取也比較安全，更好杜絕輸血安全隱患。其特有的急診插入功能，使得操作很方便。

在交叉配血不合的標本中，抗人球試驗陽性率為多數，血清中的不完全抗體是引起交叉配血不合的常見原因。配血次側陽性發生的原因有二，一是供血者血漿中含有針對受血者的不規則抗體，還有一個就是受血者紅細胞被致敏，導致次側凝集，此外，我們還要考慮冷凝集素的影響。輸血前對每一個受血者常規做抗體篩選，可進一步提高輸血安全性。

引起卡式配血假陽性的有標本因素，如標本抗凝不充分，離心不充分，紅細胞懸液的濃度不適或血漿與血細胞的比例不適；溫度因素在微柱凝膠法中也會有影響，應充分注意，排除冷凝集素影響；疾病或藥物因素在配血中發也被發現，一些腫瘤癌癥、白血病、慢性肝病，上消化道出血，貧血患者，交叉配血過程中容易引起假陽性，這是由于反復的輸血過程，導致了紅細胞表面發生了變化，改變了正常的紅細胞表面表達，使得在實驗室配血過程中與試劑中含有的IgG，C3溶液發生反應。另外，大量抗生素、止血敏、肝素、云南白藥等藥物也會干擾配血結果[3]。

[1]陳燕萍,王長奇,朱 芳,等.微柱凝膠技術鑒定血型和篩檢不規則抗體的臨床應用[J].實驗與檢驗醫學,2008,26(6):719.

[2]雷國華,鐘清蘭,熊永萍,等.微柱凝膠免疫檢測法在配血及血型鑒定中的應用[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(2):202.

[3]唐長久,王 華,李瑞云,等.微柱凝膠配血次側不和17例臨床分析[J].中國輸血雜志,2005,18(1):61.