兩種濃度抗凝劑檢測凝血酶原時間比較

陸奎英，周 艷，吳 艷，馮恒榮，包廣宇

(揚州市第一人民醫院檢驗科，江蘇 揚州 225001)

凝血酶原時間(PT)是檢測維生素K(Vitamin K)依賴因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ及Ⅴ和纖維蛋白原活性的指標。它不僅適用于外源性凝血途徑的先天性凝血疾病及獲得性出血性疾病的診斷，也可用于判斷肝病病情，同時還是臨床上口服抗凝劑治療監測的首選指標。但長期以來，實驗室間凝血酶原時間檢測結果一致性較差。引起PT結果室間可比性差的原因很多，本文旨對抗凝劑的濃度影響進行探討。

1 材料與方法

1.1 對象 我院2008年10月份門診口服抗凝劑治療監測的患者及小手術患者計46例。

1.2 方法 所有研究對象抽取靜脈血各1.2ml分別加入到A組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)和B組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉 (119mmol/L)抗凝管內(采血量為60%)。抽取靜脈血各1.6ml分別加入到C組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉 (109mmol/L)和D組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉(119mmol/L)抗凝管內(采血量為80%)離心后分離血漿。 抽取靜脈血各1.8ml分別加入到對照組E組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)和對照組F組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉(119mmol/L)抗凝管內(1：9 抗凝)。 Sysmex CA-7000全自動血凝儀檢測PT。試劑由上海太陽生物技術有限公司提供。

1.3 統計學處理 數據采用x±s表示，六組間均數比較采用非配對t檢驗。

2 結果

46份標本PT結果分別為：A組17.4±0.21(s)，B組 23.8±0.56(s)，C 組 17.0±0.27(s)，D 組 20.9±0.32(s)，E組 16.8±0.26(s)，F 組 17.9±0.31(s)。 對照組 E 組、F組之間無顯著差異 (P＞0.05)，A組、C組與對照組E組、F組之間無顯著差異(P＞0.05);B組、D組之間有顯著性差異(P＜0.05)，B組、D組與對照組E組、F組之間有顯著差異(P＜0.05)。結果見表1。

表1 兩種濃度抗凝劑檢測PT比較±s)

表1 兩種濃度抗凝劑檢測PT比較±s)

組別 n PT(s)A組B組C組D組E組F組46 46 46 46 46 46 17.4±0.21 23.8±0.56 17.0±0.27 22.9±0.32 16.8±0.26 17.9±0.31

3 討論

PT檢測中常用的抗凝劑有兩種，分別為3.2%枸櫞酸鹽 (109mmol/L)和3.8%枸櫞酸鹽(119mmoL/L)。兩種抗凝劑抗凝全血進行PT檢測時，均要求抗凝劑和血液的比例為1:9，但是臨床工作中由于操作人員不同，真空采血管的質量等原因，往往比例很難控制[1]。本實驗結果表明使用3.8%和3.2%枸櫞酸鹽抗凝標本時，如果抗凝劑與血液的比例達不到1:9時，使用3.8%枸櫞酸鹽抗凝的標本PT檢測時間比3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標本PT檢測時間平均延長約6.0s左右。

使用3.8%枸櫞酸鹽抗凝的標本中如果采血量少于80%會導致檢測結果出現顯著差異，使用3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標本即使采血量僅達到60%檢測結果也不會出現顯著差異。美國2001年的血凝實驗室室間調查顯示也證明了：使用3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標本受血量影響小只要滿足采血量超過60%檢測結果不會出現顯著差異[2]。

3.8 %枸櫞酸鹽抗凝的標本中PT檢測時間會延長,其結果與臨床表現不符。在早期室間調查中發現3.8%抗凝抗凝的標本如果采血量少于80%PT檢測時間會延長,約有17%的患者出現7s以上的偏差[3]。因此，世界衛生組織都推薦使用3.2%枸櫞酸鹽作為PT檢測的抗凝劑[3]。探其原理可能與血漿中鈣離子濃度有關：因為PT在檢測過程中血漿重新鈣化，由于抗凝劑相對用量的多少直接影響血漿鈣濃度，而血漿鈣濃度的高低則影響凝血功能檢測結果，因此血漿中鈣濃度是凝血功能檢測至關重要的因素[4]。當血液與抗凝劑比為9:1時血漿中枸櫞酸鹽濃度為正常水平，所謂血液與抗凝劑比為9:1實際上是抗凝劑與正常紅細胞壓積血液的血漿之比[5]。當采血量不足時血漿量就少，血漿中枸櫞酸鹽濃度相對增高，血漿中鈣離子濃度相對不足，即使在檢測過程中加入了鈣離子仍然不能滿足反應所需要的鈣離子濃度從而影響PT檢測結果,使檢測結果延長。相對于少量的血漿量而言含有3.8%枸櫞酸鹽濃度比3.2%枸櫞酸鹽濃度要高，對PT檢測結果影響就大[6]。

綜上所述，為減少采血量對檢測結果的影響用3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)作為抗凝劑來檢測凝血酶原時間更適合于臨床使用。

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