回收試驗與基質效應評價

張才成，陳 靜，萬臘根

(1、南昌大學第一附屬醫院檢驗科，江西 南昌 330006；2、江西護理職業技術學院，江西 南昌 330029)

基質效應是指檢測系統檢測樣品中的分析物時，處于分析物周圍的所有非分析物質對分析物參與反應的影響。產生基質效應的原因與以下四個主要因素的相互作用密切相關：儀器的設計、試劑的組成成分、測試方法的原理、質控材料的組成及處理技術等。通過回收實驗[1]可以評估分析方法是否受基質效應的影響，但分析方法是否受基質效應的影響，一般是儀器生產廠家和試劑生產廠家所要考慮的，廣大的用戶更看重的是校準品、質控品等經過處理的樣本帶來的基質效應，因為它們直接影響著用戶的日常工作，關系到檢驗報告的準確性。CLSI EP14A文件[2]介紹的方法可以評估經過物理或化學方法處理過的樣本在分析過程中是否存在基質效應，但操作比較繁瑣，尤其是對比方法較難選擇，因此實際應用價值有限。那么能否用回收試驗來評估校準品、質控品的基質效應呢？為此，本文以葡萄糖回收試驗為例，觀察相同測定條件(相同儀器、相同試劑、同批次測定等)下，新鮮人血清樣本和商品化質控品、校準品回收率的差異。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

1.1 .1新鮮病人血清 取新鮮病人血清9份，濃度范圍2.8～20mmol/L之間。

1.1 .2 朗道質控品 (批號：601UN和407UE)：5ml蒸餾水復溶。

1.1 .3 羅氏公司 Cfas校準品 (批號：10759350)：3ml蒸餾水復溶。

1.1 .4 衛生部室間質評標本(編號：201031、201032)：-20℃凍存。

1.1 .5 江西省室間質評標本 (編號：2010006和2010007)：-20℃凍存。

1.1 .6分析級無水葡萄糖標準品(上海試驗試劑有限公司，批號：20090721)：準確稱量，用雙蒸水配制80mmol/L葡萄糖標準液，備用。

1.1 .7日立7180生化分析儀、葡萄糖測定試劑盒(葡萄糖氧化酶法，浙江東鷗試劑公司)。

1.2方法

1.2 .1標本制備 按下表制備標本，每個樣品分別加入蒸餾水或80mmol/L葡萄糖標準液，混勻。

1.2 .2檢測 使用日立7180生化分析儀進行葡萄糖測定，每份標本重復測定三次，取平均值。

1.3 計算方法 按以下公式標準算回收率

2 結果

2.1 回收率 將標本分為新鮮血清組(標本號1-9)和非新鮮血清組(標本號10-16，包括商業化室內質控物、校準品以及室間質評標本)，兩組回收率均值和變異系數分別為102%，2.5%和136%，12.5%，見表1。

表1 各組標本回收率

2.2 統計分析 使用SPSS 10.0統計軟件，t檢驗結果為t＝-5.36，P＜0.05， 故認為兩組回收率差異有顯著性。

3 討論

本文以葡萄糖回收試驗為例，研究了經過物理或化學處理的樣本如室內質控品、校準品及各級室間質控品與新鮮人血清樣本葡萄糖回收率的差異，結果顯示前者平均回收率為136%，新鮮人血清樣本平均回收率為102%，經統計學分析兩者之間有顯著差異。在測定條件相同(相同儀器、相同試劑、同批次測定等)的情況下，我們認為這種差異主要是由于基質效應引起的，也就是說，商業化質控品、校準品由于與人血清基質的不同導致了回收試驗回收率的不同，反過來講就是回收率的差異反映了樣本的基質效應。因此我們認為用回收試驗來探討經過物理或化學方法處理過的樣本基質效應是一條可行的途徑。

臨床化學中基質效應的干擾，尤其是商品化質控品、校準品這些被物理或化學方法處理過的樣本基質效應對檢驗結果的影響日益受到廣大檢驗者的重視[3]，國內多位研究人員對此進行了探討，如呂禮應[4]從化學反應時間進程曲線的角度分析了室間質評標本的基質效應；熊傳銀[5]等人探討了校準品的基質效應對離子測定的影響；鄒榮良[6]研究了不同質控物在不同檢測系統中的基質效應。這些研究從不同側面反映了校準品、質控品的基質效應，方法各異，有些需要多實驗室合作，有些需要對儀器參數進行重新設定或調整，可能給日常工作帶來不便。而CLSIEP14A文件介紹的方法在選取對比方法時要求最好是參考方法 (假定對比方法無基質效應)，故在臨床實驗室較難開展。本文以回收試驗來評價質控品、校準品的基質效應，通過回收率的差異反映基質效應，操作比較簡單，不需要更改儀器參數，單個實驗室即可完成，因此是一種值得借鑒的方法。

[1]錢士勻.臨床生物化學與檢驗實驗指導[M].第3版,北京:人民衛生出版社,2007:48-49.

[2]Evaluation ofmatrix effects.Clinical and Laboratory Standards Institute[J].EP14-A,2001.

[3]阿拉法特,邢文革.制備樣品基質效應的評估與控制[J].中國醫藥導刊,2007,9(2):158-159.

[4]呂禮應.質控材料的基質效應對三酰甘油測定的影響[J].臨床檢驗雜志,2004,22(2):141.

[5]熊傳銀,朱秋玲,潘小平.基質效應對鉀、鈉、氯比色法測定結果的影響[J].長江大學學報(自然科學版),2009,6(2):57-58.

[6]鄒榮良.基質效應在臨床化學檢測中的影響研究[J].中國誤診學雜志,2009,9(34):8491-8492.