血清嗜酸性粒細胞陽離子蛋白在5歲以下喘息兒童評估中的意義

楊金玲 王秀芳

喘息是嬰幼兒時期的常見癥狀，5歲以下喘息兒童根據其原因和轉歸可分為早期一過性喘息、早期起病的持續性喘息(指3歲前起病)和遲發性喘息/哮喘3種臨床表型[1]。因此，將可能發展為持續性哮喘的5歲以下喘息患兒識別出來進行有效早期干預是非常必要的。本研究通過檢測5歲以下喘息兒童外周血中的血清嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（ECP）水平和外周血嗜酸性粒細胞（EOS）計數，尋找鑒別兒童喘息臨床表型的炎癥指標，為預測喘息兒童預后及早期干預治療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2008年9月—2009年4月本院呼吸科門診和住院治療的患兒53例為喘息組，反復喘息判斷以喘息次數≥2次/半年或≥3次/1年為標準；均排除先天性疾病引起的喘息。根據患兒是否曾被診斷為過敏性疾病(包括濕疹、變應性皮炎、過敏性鼻炎及食物過敏)或父母一方有哮喘病史者為特應質高危因素的標準，將喘息組分為為喘息Ⅰ組（有高危因素之一者）和喘息Ⅱ組（無高危因素者）,其中喘息Ⅰ組27例，男16例，女11例，平均年齡（1.8±0.2）歲；喘息Ⅱ組26例，男14例，女12例，平均年齡（1.9±0.3）歲。同時，從本院外科同期住院治療的疝氣、腎結石等非感染性疾病術前患兒中隨機抽取20例作為對照組，男11例，女9例，平均年齡（1.8±0.1）歲。所有兒童均為足月出生，年齡均在4個月～5歲，3組年齡（F=0.168）、性別（χ2=0.437）差異均無統計學意義（P＞0.05）；均獲得其家長知情同意，所有患兒2周內均無全身或局部哮喘藥物治療史。

1.2 方法

1.2.1 血清ECP的測定 應用法瑪西亞公司UniCAP全自動分析檢測儀及試劑盒。采用真空SST管，取頸靜脈血2 mL，輕輕倒轉試管5次，室溫下20℃～25℃凝血60～120 min,分離血清，然后轉至另一試管中，加入試劑，UniCAP自動檢測血清ECP（正常值＜15 μg/L）。

1.2.2 外周血EOS計數 于試管中加入0.38 mL伊紅-甲醛緩釋液，再加入血液0.02 mL，立即混勻。10 min后再混勻，分別用吸管充入計數池內，靜置片刻后，用低倍鏡計數。

1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計軟件進行統計分析。符合正態分布的計量資料以均數±標準差（±s）表示,組間比較用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗。計數資料用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清ECP含量和外周血EOS計數比較 喘息Ⅰ組血清ECP水平和外周血EOS計數均高于喘息Ⅱ和對照組（均P＜0.05），而喘息Ⅱ組和對照組之間差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組患者血中ECP含量和外周血EOS計數比較（±s）

表1 各組患者血中ECP含量和外周血EOS計數比較（±s）

＊P＜0.05

組別 n ECP（μg/L） EOS(×109)喘息Ⅰ組（1）喘息Ⅱ組（2）對照組（3）F P（1）∶（2）（1）∶（3）（2）∶（3）0.55±0.10 0.10±0.01 0.02±0.01 18.76＊0.028 0.038 0.099 27 26 20 46.81±13.86 9.28±3.71 3.90±1.09 4.62＊0.045 0.011 0.058

2.2 血清ECP和外周血EOS計數相關性分析 喘息組血清ECP與外周血EOS計數呈正相關（r=0.786，P＜0.01）。

3 討論

嬰幼兒喘息與呼吸道病毒或支原體感染、氣道黏膜水腫、小氣道內黏液栓形成、氣道慢性炎癥以及氣道高反應性有關。多數喘息患兒經治療可以完全緩解，不再反復。但部分喘息是兒童哮喘的早期表現，嬰幼兒喘息與兒童哮喘的關系尚未完全闡明。

EOS是引起哮喘呼吸道炎癥、支氣管高反應性（BHR）和遲發型過敏反應(LAR)的關鍵細胞，是哮喘發病中的主要效應細胞及慢性哮喘患者下氣道的主要炎癥細胞[2]。ECP是活化的EOS分泌的一種核糖核酸酶，是EOS的特異性標志物之一。ECP是一種單鏈、含鋅、強堿性糖蛋白，儲存在EOS的胞漿顆粒中，約占EOS胞漿顆粒的30%。ECP與氣道高反應、通氣功能均存在一定的相關性，是EOS激活的標志[3]。本研究顯示血清ECP和外周血EOS計數呈正相關。ECP能直接損傷氣道上皮細胞，導致氣道高反應、氣道痙攣和肺功能受損[4],是反映哮喘患者氣道炎癥發生、發展變化的主要指標。臨床研究顯示ECP與哮喘氣道炎癥的強度相關，可反映氣道高反應性發展的早期階段，并可作為監測兒童哮喘病情嚴重程度的指標指導臨床用藥[5]。

本研究顯示具有特應質高危因素的喘息Ⅰ組血清中ECP與外周血EOS計數明顯高于無特應質高危因素的喘息Ⅱ組和對照組，提示其可能與哮喘存在相似的免疫學發病機制，在治療中應注意抑制炎癥細胞的活化和炎性介質的產生，強調早期干預以降低氣道高反應性、控制炎癥反應，預防持續性哮喘的形成。無特應質高危因素的喘息Ⅱ組外周血ECP和外周血EOS計數與對照組比較差異無統計學意義，提示EOS并未參與其喘息的發作，其喘息發生機制與哮喘不同，多與呼吸道病毒感染有關，是誘發兒童反復喘息最常見致病因素。病毒感染損傷的上皮細胞和抗病毒反應可引起呼吸道水腫、黏液高分泌和血管通透性增高，導致小氣道狹窄和通氣功能障礙，進而引起喘息發作。呼吸道病毒感染引起的氣道高反應性可持續6周才逐漸下降[6]。如在6周前后又重復感染，則高反應性持續存在，造成喘息反復發作。隨著年齡的增長無特應質喘息兒童的體質增強和免疫系統的發育成熟，病毒感染的概率減少，至學齡期喘息將消失。

感染是引起哮喘發作的常見誘因，而特應質高危因素則是導致持續性哮喘及哮喘反復發作的最主要因素。本研究顯示，5歲以反下復喘息的患兒具有特應征傾向，其血清中ECP與外周血EOS計數明顯增加，可能是哮喘的早期表現。因此測定患兒的血清ECP水平及外周血EOS計數，有助于喘息的臨床分型及預后判斷，早期識別可能發展為持續喘息的兒童，為兒童哮喘的早期臨床干預提供依據。由于本研究樣本例數有限，其廣泛應用有待于臨床進一步研究。

[1]中華醫學會兒科學會呼吸學組《中華兒科雜志》編輯委員會.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南[J].中華兒科雜志,2008,46(10): 745-753.

[2]Peng T,Hao L,Madri JA,et al.Role of C5 in the development of air?way inflammation,airway hyperresponsiveness，and ongoing airway response[J].J Clin Invest，2005,115（6）:1590-1600.

[3]羅侃，崔有宏，張大高．臨床化學方法評價[M].蘭州：蘭州大學出版社，1996：47-51．

[4]Carreras E,Navarro S，Rosenberg HF，et al.Surface-exposed amino acid of eosinophil cationic play a critical role in the inhibition of mammalian cell proliferation[J].Mol Cell Biochem,2005,272(1-2): 1-7.

[5]Kandil AA,Hasan A,Taha O,et al.Eosinophil cationic protein as a diagnostic marker for asthmatic children treated by immunotherapy [J].Egypt J Immunol,2003,10(1):67-76.

[6]楊延萍.嬰幼兒喘息與病毒感染的關系研究[J].國際醫藥衛生導報,2009,15(1):27-29.