犬／流／感

孫莎莎，張素榮，馬婧姣，游程皓，李澤盛，王貴強(qiáng)，龐海東，劉金華，林德貴

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193；2.北京市順義區(qū)仁和獸醫(yī)衛(wèi)生防疫站，北京 順義 101300）

早在20世紀(jì)70年代，Nikitin A等人通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)證明犬可以感染人H3N2流感病毒，并且在犬血清內(nèi)檢測(cè)到相應(yīng)的抗體［1］。之后Romvary J Kilbourne E D Onta T等人也證明了犬可以感染流感病毒，但是一直未從自然發(fā)病犬體內(nèi)分離到流感病毒，或者發(fā)現(xiàn)流感病毒在犬群中大量流行［2-7］。近10年，關(guān)于甲型流感病毒（influenza A virus）感染犬貓的報(bào)道頻繁出現(xiàn)，包括H3N8、H5N1、H3N2和H1N1共4種亞型流感病毒。

1 H3N8亞型犬流感病毒

2004年1月，美國(guó)福羅里達(dá)州的22只灰獵犬（Greyhound）暴發(fā)了呼吸道疾病。其中14只表現(xiàn)為中度發(fā)燒和咳嗽的呼吸道綜合征，而另外8只表現(xiàn)為嚴(yán)重的出血性氣管炎、支氣管肺炎、胸膜炎和高熱伴發(fā)脈管炎的癥狀，其中1只死亡。從死亡病例的肺組織勻漿中分離到了甲型H3N8流感病毒［8］。通過(guò)免疫組化方法，在這些犬的肺組織內(nèi)監(jiān)測(cè)到H3亞型流感病毒的抗體［8］。康復(fù)犬血清內(nèi)可以監(jiān)測(cè)到相應(yīng)H3N8流感病毒的抗體。接觸過(guò)患犬的亞臨床癥狀犬中，約有50%的犬體內(nèi)可以檢測(cè)到相應(yīng)的抗體。將分離到的病毒接種健康的犬，可以引起有效的呼吸道感染，在其體內(nèi)可以分離到病毒，并且在血清中可以檢測(cè)到相應(yīng)的抗體，但是犬并沒有表現(xiàn)出臨床癥狀。上述論據(jù)符合科赫氏法則，證明了H3N8流感病毒能有效的感染犬［8-10］。

在此之后的2004年夏天、2005年上半年和2006年，美國(guó)共有17個(gè)州報(bào)道了賽犬群發(fā)呼吸道疾病的情況［9］。美國(guó)大范圍的血清流行病學(xué)調(diào)查顯示，H3N8流感病毒不僅在賽犬群中流行，而且已經(jīng)感染到了寵物犬群中。直至2009年6月，美國(guó)已經(jīng)有個(gè)30州報(bào)道了寵物犬感染H3N8流感病毒的病例［9，11］。

對(duì)分離出的H3N8流感病毒的HA基因的進(jìn)化分析表明，這些病毒非常相似，并且它們都同1990年間弗羅里達(dá)州流行的馬流感最接近。這種同源性暗示了最初的情況可能是由于接觸共同的競(jìng)賽場(chǎng)導(dǎo)致的馬流感跨越種間屏障感染狗的個(gè)例。對(duì)分離出的H3N8病毒的8個(gè)基因片段進(jìn)行分析表明，所有的片段均來(lái)源于馬。對(duì)儲(chǔ)存的血清進(jìn)行回顧性研究表明，最早的傳播應(yīng)該發(fā)生在1998年至2003年間。對(duì)犬H3N8病毒的HA片段和NA片段進(jìn)行分析表明，HA片段上至少有5處發(fā)生了特征性、適應(yīng)性突變，其中3處宿主特異性功能蛋白在加工處理時(shí)發(fā)生了變異，這造成該病毒在犬之間的廣泛傳播。雖然少數(shù)分離出的H3N8病毒的HA編碼氨基酸序列發(fā)生了一些突變，但是沒有發(fā)現(xiàn)明顯的抗原漂移［8，10］。

英國(guó)Daly等人，通過(guò)血清學(xué)、免疫組化和有限的分子學(xué)證據(jù)證明了H3N8流感病毒在英國(guó)犬群中存在，但是并沒有像美國(guó)那樣廣泛傳播［12］。2002年秋季，英國(guó)一個(gè)獵狐犬犬舍發(fā)生了嚴(yán)重的呼吸道疾病，當(dāng)時(shí)并沒有分離到病毒。之后對(duì)康復(fù)犬的血清進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)存在馬H3N8流感病毒的抗體。有趣的是，這些犬在得病前1周食入生的馬肉和馬內(nèi)臟。與美國(guó)的情況不同，H3N8病毒在英國(guó)并未表現(xiàn)出傳播態(tài)勢(shì)，雖然同年另一群獵狐犬的血清抗體檢測(cè)為陽(yáng)性，但是并沒有發(fā)現(xiàn)兩者之間有任何聯(lián)系［12］。

澳大利亞也報(bào)道了相似的情況。2007年澳大利亞馬流感暴發(fā)期間，人們注意到同感染馬接觸的犬也出現(xiàn)了流感癥狀，并且在其體內(nèi)分離到了H3N8流感病毒。對(duì)病毒的核酸序列分析表明與馬流感相一致。但是并沒有發(fā)現(xiàn)犬之間的傳播或者該病毒持續(xù)在犬群中存在［13］。

Deshpande等人的動(dòng)物試驗(yàn)表明，單獨(dú)的H3N8流感病毒感染，即可引起嚴(yán)重的呼吸道癥狀，包括咳嗽、打噴嚏、流鼻涕，但主要的癥狀還是咳嗽［14］。24只接種病毒的犬，接種1d后即有表現(xiàn)出呼吸道癥狀的，2d后即有33%的犬出現(xiàn)臨床癥狀，4d內(nèi)96%的犬表現(xiàn)出癥狀。接種10～11d時(shí)，臨床癥狀達(dá)到高峰期，12d后癥狀開始消失。在接種病毒的第1天，共2只犬出現(xiàn)發(fā)燒的癥狀（≥39.6℃），但只持續(xù)了1d，之后一直未發(fā)現(xiàn)接種犬出現(xiàn)發(fā)燒的癥狀。接種犬第2～5天在其鼻腔分泌物中可以檢測(cè)到排毒高峰，但直至10d仍可檢測(cè)到病毒［14］。

2 H3N2亞型犬流感病毒

2007年5～9月，韓國(guó)Kyunggi省的3個(gè)動(dòng)物診所和Jeolla省的1個(gè)犬舍的犬群暴發(fā)了嚴(yán)重的呼吸道疾病。從最初3個(gè)病例的鼻分泌物中，分離到了H3N2型流感病毒，但是并未分離到犬瘟、副流感病毒和支氣管敗血型博代氏桿菌。序列分析表明，該病毒所有的8個(gè)基因片段，均與禽H3N2流感病毒有最大的相似度。對(duì)Jeolla省暴發(fā)了流感的犬舍進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查顯示，第1次采樣時(shí)52只犬中有47只犬（90%）的血清中檢測(cè)出了H3N2流感病毒的抗體，而第2次檢測(cè)的血清學(xué)抗體陽(yáng)性率為100%［15］。

Daesub Song等人將分離到的病毒接種于10周齡的比格犬進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，動(dòng)物在接種后的2～7 d內(nèi)均表現(xiàn)出流鼻涕、打噴嚏的臨床癥狀［16］。接種病毒的24h后，所有動(dòng)物出現(xiàn)高燒的癥狀（平均溫度40.14℃），此癥狀延續(xù)了5d。接種第6天，動(dòng)物體內(nèi)可以檢測(cè)到升高的血清抗體。對(duì)感染后的犬進(jìn)行病理學(xué)檢查，肉眼可見病變只局限于肺臟，表現(xiàn)為多點(diǎn)或融合的粉紅色實(shí)質(zhì)性病變。將接種后第3、6天和第9天采集的組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，可見氣管和肺部的病變，肺以外的組織未見病變。組織學(xué)檢查可見病毒引起的嚴(yán)重的上呼吸道和下呼吸道的炎癥和壞死［17］。

2006年5月至2007年9月，中國(guó)廣東也報(bào)道了4只犬感染H3N2流感病毒的病例。分離出的病毒同韓國(guó)分離的H3N2病毒有很大的相似度［18］。除了這兩個(gè)報(bào)道外，到2010年底，其他地區(qū)未發(fā)現(xiàn)H3N2流感病毒感染犬的病例。

3 H5N1亞型流感病毒

2006年，泰國(guó)Songserm等人報(bào)道了1例犬感染高致病性H5N1流感病毒的病例，這只犬在食用感染H5N1流感病毒死雞肉之后發(fā)病死亡［19］。對(duì)泰國(guó)首都629只犬的血清進(jìn)行研究表明，約25%的犬體內(nèi)含有H5特異性抗體，但是這個(gè)結(jié)果至今未得到其他證明。為了證明H5N1流感病毒在犬之間的傳播，尤其是對(duì)人傳染的可能性，Giese等人用兩種不同的高致病性H5N1禽流感接種試驗(yàn)動(dòng)物，除了結(jié)膜炎和2d的體溫升高外，沒有其他的臨床癥狀［20］。Maas等人在攻毒犬的鼻腔內(nèi)分離到了較低滴度的病毒［21］，但是Giese等人沒有分離到感染性病毒［20］。所有的攻毒犬均發(fā)生了血清轉(zhuǎn)化。同居組的犬并未發(fā)現(xiàn)被傳染。因此，并不認(rèn)為犬在傳播高致病性H5N1流感病毒中起重要作用［22］。

然而中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所陳化蘭等人2010年卻證明了犬可能在傳播高致病性H5N1流感病毒中起重要作用［23］。陳化蘭等人將12只45日齡的比格犬分為兩組，分別通過(guò)鼻腔和氣管對(duì)其接種從野生鳥類中分離出的H5N1禽流感病毒。接種病毒1d后，所有犬均表現(xiàn)出食欲不振，之后出現(xiàn)發(fā)燒、結(jié)膜炎、咳嗽、呼吸困難等癥狀，其中一只經(jīng)氣管接種病毒的比格犬在接種后第4天死亡。在接種病毒后2～4d，從鼻腔攻毒組的6只犬的鼻拭子和糞拭子中都分離到了流感病毒。在接種病毒后14d，兩組各存活的2只犬的血清中，都可以檢測(cè)到H5N1流感病毒的抗體。鑒于犬對(duì)H5N1禽流感病毒的高度易感性，以及犬和人類的親密性，因此不排除犬成為H5N1流感病毒傳播中介的可能性［23］。

4 H1N1亞型流感病毒

2009年，一種人禽豬三源重排的甲型H1N1流感病毒在全球范圍的人群內(nèi)廣泛傳播。作為人類最親密的伴侶動(dòng)物，中國(guó)、美國(guó)和日本相繼報(bào)道了寵物犬感染H1N1流感病毒的病例。2009年10～12月，意大利William等人在964份犬血清中檢測(cè)出29份H1N1流感抗體陽(yáng)性血清［24］。但至今為止，尚未有關(guān)于此次甲流病毒在犬群之間傳播或者犬感染甲流與人之間的關(guān)系的報(bào)道。

過(guò)去，人們一直認(rèn)為犬不是流感病毒的宿主，但現(xiàn)在越來(lái)越多的研究證明犬群中已經(jīng)存在流感病毒感染。這應(yīng)該引起獸醫(yī)工作者的關(guān)注，當(dāng)犬群中群發(fā)傳染性呼吸道疾病時(shí)，應(yīng)考慮到感染流感病毒的可能性，及時(shí)的控制其傳播，對(duì)公共衛(wèi)生的安全應(yīng)予以重視，并進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

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