尼莫地平對大鼠腦缺血再灌注損傷療效分析

鄭紅梅

（湖南省新寧縣人民醫院藥劑科，湖南 新寧 422700）

尼莫地平對大鼠腦缺血再灌注損傷療效分析

鄭紅梅

（湖南省新寧縣人民醫院藥劑科，湖南 新寧 422700）

目的探討尼莫地平對大鼠缺血再灌注損傷的保護作用。方法采用結扎頸總動脈的方法制備缺血再灌注模型，對缺血前、再灌注48h后對大鼠進行神經功能評分和腦梗死體積，對正常組、缺血前注射尼莫地平組、未注射尼莫地平組及再灌注后注射尼莫地平組4組大鼠神經功能評分和腦梗死體積。結果與模型組組相比，缺血前及灌注后靜脈滴注尼莫地平大鼠神經功能缺損明顯減少，腦梗死體積明顯減少（P＜0.05）。結論尼莫地平治療腦缺血再灌注損傷有療效，對腦缺血大鼠有神經保護作用，而且在缺血前給藥能減少大腦梗死的面積。

腦缺血；再灌注損傷；尼莫地平；神經保護

腦血管病是由腦部血液循環障礙，導致以局部神經功能缺失為特征的一組疾病。其病理生理學機制包含神經細胞能量衰竭、酸中毒、細胞內離子失衡、興奮性毒性作用及自由基損傷等多方面因素[1]。目前，大多數報道是關于尼莫地平應用腦缺血性腦疾病的研究。本實驗觀察尼莫地平對局灶性腦缺血大鼠的神經保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

清沽級雄性SD大鼠48只（廣州大學實驗動物中心提供），體質量（250±20）g，隨機將大鼠分為4組：即正常組（A組）、模型組（B組）、缺血前給尼莫地平組（C組）、再灌注給尼莫地平組（D組）、每組12只大鼠。

1.2 造模

動物模型具體的制作方法參照文獻[2,3]。將各組大鼠稱重后，2%戊巴比妥鈉（0.2mL/100g）麻醉。取頸部旁正中切口，分離氣管，找到雙側的頸總動脈，分離迷走神經后，以手術縫合線結扎雙側的頸總動脈，結扎10min，松開線結，再結扎10min，再松開線結，此程序重復3次，嚴格記錄栓塞開始時間。手術結束后分層縫合肌肉和皮膚。再以絡活碘消毒外層皮膚。以上各個步驟完成即大鼠腦缺血-再灌注損傷模型制備完畢。術中對大鼠的血氣指標及血壓值進行監測與記錄，各項指標均維持在正常范圍。

1.3 設備及試劑

手術縫合線3-0，Ethicon lnc，日本）、尼莫地平（商品名：尼莫同，德國拜耳公司）、微量藥物泵（STC-527，日本）、光學顯微鏡（BX-60，Olympus，日本）。

1.4 尼莫地平的使用

尼莫地平（商品名：尼莫同，德國拜耳公司）。缺血前用藥組在第3次結扎頸總動脈造成腦缺血前，經股靜脈注射尼莫地平（1.5mg/kg體質量）。再灌注后用藥組再從頸內動脈抽出栓線后，經股靜脈注射尼莫地平（1.5 mg/kg體質量）。正常組以生理鹽水替代尼莫地平。

1.5 神經功能缺損檢測

缺血再灌注模型制備48h后進行神經功能評分[2]：沒有神經功能損傷計6分；不能完全伸展對側前肢計5分；不能伸展對側前肢計5分；輕度向對側轉圈計5分；嚴重向對側轉圈計3分；對側肢體偏癱計1分。

1.6 造模成功判定標準

大鼠手術麻醉清醒后出現左側肢體無力，行走時向左側轉圈。

1.7 大鼠腦梗死體積測定

所有大鼠在缺血再灌注的48h后采用斷頭取腦，切片為連續等距的冠狀切片，切片厚約2mm，共8片；之后切片置于2%濃度的2，3，5-氯化三苯基四氮唑中染色，不時翻動切片，以保證染色均勻，最后拍攝照片測定梗死范圍。梗塞的腦組織呈白色，其余呈紅色。使用圖像分析系統測量并計算大鼠大腦梗死體積。計算公式：腦梗死體積（只）= 各層梗死面積之和×層間隔。

1.8 統計學處理

采用SPSS 13.0統計軟件，計量資料采用均數±標準差表示，采用方差分析，兩組差異顯著性檢驗采用LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

模型組的大鼠神經功能缺損和腦梗死面積較其他組差，與正常組比較，差異有顯著統計學意義（P＜0.01）；與C組、D組比較，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

3 討 論

現代研究認為，腦缺血后主要的機體改變就是細胞內Ca2+顯著升高，而Ca2+在缺血性腦損傷的病理機制中具有非常重要的作用。尼莫地平屬雙氫吡啶類鈣拮抗劑，可以穿過血腦屏障而作用于相應的腦血管及神經細胞；還可以選擇性擴張腦血管，而無盜血現象，在提高腦血流量的同時卻不影響腦代謝?？赊卓筀+、5-HT、花生四烯酸，過氧化氫、TXA2和蛛網膜下腔出血所致腦血管痙攣。還具有抗抑郁和改善學習、記憶功能，降低紅細胞脆性，血漿黏稠性和抑制血小板聚集的作用。而相關研究也顯示，尼莫地平可以有效地抑制細胞外Ca2+的內流，從而控制腦梗死的面積的進一步擴大，減輕腦組織的損傷，其還可以通過降低缺血腦組織血腦屏障的通透性，有效降低腦水腫的發生率[4]。

表1 各組大鼠神經功能缺損和腦梗死面積比較

本研究結果表明，尼莫地平能保護神經元的缺血性損傷，所以它應該也能保護腦血管或者是腦微血管內皮細胞的缺血性損傷，從而減輕大腦死的面積。實驗證明，模型組的大鼠神經功能缺損和腦梗死面積較其他組差，與正常組比較，差異有顯著統計學意義（P＜0.01）；與C組、D組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，在腦缺血的早期就使用尼莫地平，不但可以有效保護神經元的缺血性損傷，還可以減輕大腦梗死的面積。而在缺血再灌注后再使用尼莫地平，則是加重了血腦屏障的損傷，進一步加重腦梗的面積。

[1]Xu XS,Ma ZZ,Wang F,et a1.The antioxidant cerebralcare granule attenuates cerebral microcirculatory disturbance during ischemiareperfusion injury[J].Shock,2009,32(2):201-209.

[2]Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,et a1.Reversiblemiddle cerebral artery occlusion without craniectomy inrats[J].Stroke,1989,20(1):84-91.

[3]吉訓明,凌鋒,趙喜慶等.改良可逆性局灶性腦缺血模型建立[J].介入放射學雜志,2005,14(2):178.182.

[4]Matthlas L,Hefmann D.Unastructural chanees in the bloodbraln barrler 1nrats after treatment with mmodlpine flunar Lzlne[J].Neurosurg Res,1 996,19(1):53.

R743.3

B

1671-8194（2011）03-0057-02