不同劑量60Co γ輻照對生骨膠囊的滅菌效果比較

周娟，賈恩禮，孔憲波

不同劑量60Co γ輻照對生骨膠囊的滅菌效果比較

周娟，賈恩禮，孔憲波

生骨膠囊；60Co輻照；細(xì)菌；霉菌；滅菌

60Co輻照主要是破壞細(xì)菌細(xì)胞中的DNA和RNA，受損的DNA和RNA分子發(fā)生降解，失去合成蛋白質(zhì)和遺傳功能，使細(xì)胞死亡。60Co輻照滅菌較之高溫高壓或化學(xué)方法滅菌，可避免對藥物有效成分的破壞。在常溫下進(jìn)行，既不使揮發(fā)性成分損失，又不會形成有害成分殘留于藥品中，且一次處理量大。采用合理劑量輻照，對中成藥色、香、味及化學(xué)成分等影響甚微，對環(huán)境也不會造成污染。此外，因其穿透力強(qiáng)，可將包裝完好的藥品進(jìn)行滅菌，以避免拆包后再次污染[1]。因此，利用60Co進(jìn)行輻照很受藥品生產(chǎn)商的青睞，且隨著微生物限度檢查被載入《中國藥典》，利用60Co進(jìn)行輻照滅菌在醫(yī)療行業(yè)應(yīng)用也越來越廣泛。

輻照滅菌有很多優(yōu)點(diǎn)，但也存在一定的安全隱患，關(guān)鍵在于輻照劑量的選擇。應(yīng)對被輻照的藥物建立定性定量指標(biāo)，以最小的劑量，達(dá)到最大的滅菌效果，保證藥物成分及其含量不變，保證藥物質(zhì)量。生骨膠囊是用于治療骨壞死、骨折、骨折遲緩愈合、骨質(zhì)疏松等骨病的全軍擴(kuò)大調(diào)劑使用制劑。該制劑為純中藥制劑，能達(dá)到補(bǔ)腎生骨，活血化瘀，行氣鎮(zhèn)痛之功效。本文擬利用0、2、4、6、10、15 kGy的鈷-60γ射線對中藥制劑生骨膠囊進(jìn)行輻照，并通過對不同輻照劑量下生骨膠囊細(xì)菌總數(shù)、霉菌總數(shù)進(jìn)行檢測，確定既能有效滅菌又安全可靠的輻照劑量。

1 方法

隨機(jī)選取包裝完好的生骨膠囊（批號090907，規(guī)格：0.4 g/粒，60粒/瓶，100瓶/箱），放入專用滅菌室,藥品距60Co γ輻射源在60 cm左右。輻照劑量分別為2、4、6、10、15 kGy。未輻照的作為對照，輻照單位是山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院輻照中心。

供試液制備：用隨機(jī)取樣法，取滅菌前后生骨膠囊60粒，以無菌操作將生骨膠囊內(nèi)容物取出，稱取10 g藥粉置于100 ml 0.9%的無菌NaCl溶液中，置磁力攪拌器上攪拌混勻后，靜置，離心（500 r/min）5 min，取全部上清液，用0.9%的無菌NaCl溶液進(jìn)行系列稀釋，稀釋級別分別為102、103、104。

取1 ml供試液注入平皿中,將融化的約45℃普通營養(yǎng)瓊脂（檢測細(xì)菌總數(shù)時(shí)）或玫瑰紅鈉瓊脂（檢測霉菌總數(shù)時(shí)）傾入平皿內(nèi)，混勻。待瓊脂凝固后,倒置于37℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48 h（測細(xì)菌），或28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h（測霉菌）,計(jì)數(shù)菌落數(shù)。每個(gè)稀釋級做3個(gè)重復(fù)。

2 結(jié)果

生骨膠囊進(jìn)行不同劑量輻照后，隨著輻照劑量的增大，細(xì)菌數(shù)和霉菌數(shù)逐漸降低，滅菌率逐漸升高。霉菌較細(xì)菌對輻照劑量敏感，2 kGy時(shí)滅菌率已到94.6%，但此時(shí)霉菌數(shù)還超標(biāo)。當(dāng)劑量達(dá)到4 kGy時(shí)霉菌指標(biāo)符合藥典規(guī)定（<100個(gè)/g），平均滅菌率達(dá)到了98.3%。當(dāng)劑量達(dá)到6 kGy時(shí)細(xì)菌微生物限量檢測指標(biāo)符合藥典規(guī)定（<1000個(gè)/g），平均滅菌率達(dá)到了99.9%。當(dāng)劑量達(dá)到10 kGy后，已無可培養(yǎng)的細(xì)菌、霉菌。因此，筆者認(rèn)為6 kGy的劑量即可達(dá)到藥典規(guī)定的微生物限量檢測指標(biāo)。見表1。

3 討論

本文結(jié)果表明在0～15 kGy范圍內(nèi)隨著輻照劑量的增大，細(xì)菌數(shù)和霉菌數(shù)逐漸降低，且霉菌較細(xì)菌對輻照劑量敏感。10 kGy的劑量可殺滅生骨膠囊中所有可培養(yǎng)的細(xì)菌和霉菌。

本文結(jié)果表明生骨膠囊經(jīng)過6 kGy的輻照后，其微生物限量檢測指標(biāo)符合藥典規(guī)定，細(xì)菌、霉菌滅菌率分別達(dá)到了99.9%、100%。生骨膠囊在長期的臨床應(yīng)用過程中從未發(fā)現(xiàn)過不良反應(yīng)。1983年世界食物法規(guī)委員會（CAC）已接受FDA/IAEA/WHO聯(lián)合專家委員會以下結(jié)論：10 kGy以下輻射食品是安全的[1]。因此，對比其它滅菌方法，綜合滅菌效果，筆者認(rèn)為用6 kGy60Co輻照對純中藥制劑生骨膠囊的滅菌是值得應(yīng)用的。

由于60Co輻照，操作簡便，速度快，比較經(jīng)濟(jì)，因而近年來在醫(yī)藥食品行業(yè)得到了廣泛應(yīng)用。然而不當(dāng)?shù)妮椪諘κ称返念伾⑽兜馈I養(yǎng)、成分產(chǎn)生一些不良反應(yīng)。因此，從微生物的限量檢測角度考慮，只要各項(xiàng)微生物指標(biāo)合格，不要刻意加大輻照劑量。對于產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量把關(guān)，藥品生產(chǎn)者一定要抓好生產(chǎn)過程中的各個(gè)環(huán)節(jié)，不能單純依靠加大輻照劑量進(jìn)行滅菌。對于不同的產(chǎn)品，因根據(jù)藥品的活性成分、劑型、微生物的含量、安全等各方面的因素出發(fā)，綜合考慮，選擇合適的輻照劑量。

本實(shí)驗(yàn)只是利用細(xì)菌、霉菌含量對輻照前后滅菌效果進(jìn)行研究，而不同微生物菌群對輻照可能具有不同的響應(yīng)效果，因此有必要開展輻照對本制劑中其它微生物種類滅菌效果的研究。

[1]李繼珊.60鈷輻照對中成藥滅菌效果的檢測[J].中國消毒學(xué)雜志，2002，19（1）：36-37.

[2010-09-14收稿，2010-10-20修回]

Q93.332

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250014山東濟(jì)南，濟(jì)南軍區(qū)聯(lián)勤部疾病預(yù)防控制中心（周娟，賈恩禮，孔憲波）

表1 不同劑量60Co γ輻照生骨膠囊含菌量及滅菌率

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[本文編輯：宋敏]