小兒咽扁顆粒中綠原酸含量的測定

【摘要】目的:建立了HPLC法測定小兒咽扁顆粒中綠原酸含量測定方法。方法:采用ODS-C18(150mm×4.6mm，5μm)，流動相:乙腈-0.4%磷酸溶液(13:87)，流速1.0ml/min，檢測波長327nm。結果:柚皮苷的線性范圍為20-200μg/ml，平均回收率為:99.64%，精密度RSD為0.41%，重現(xiàn)性RSD為0.25%，穩(wěn)定性RSD值為0.87%。結論:本法用于測定小兒咽扁顆粒中綠原酸的含量方法準確簡便。

【關鍵詞】HPLC;小兒咽扁顆粒;綠原酸。

【中圖分類號】R927.2【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)16-085-1

小兒咽扁顆粒是由金銀花、射干等八味中藥組成的復方制劑。具有清熱利咽，解毒止痛的作用。臨床主要用于肺實熱引起的咽喉腫痛，咳嗽痰盛，咽炎等癥。本實驗采用HPLC法測定制劑中綠原酸的含量，有效地分離降解產(chǎn)物，準確測定綠原酸的含量，獲得滿意結果。

1儀器與試藥

島津LC-10AT HPLC儀，Class-VP工作站，BP211D型電子天平(德國)。綠原酸(中國藥品生物制品檢定所提供)，小兒咽扁沖劑(西安金花制藥廠自制，批號為080417、080423、080428)，乙腈為色譜純，水為高純水，其它試劑為分析純。

2色譜條件選擇

色譜柱:ODS-C18(150mm×4.6mm，5μm)，流動相:乙腈-0.4%磷酸溶液(13:87)、流速:1.0ml/min、檢測波長:327nm、進樣量:10μl、理論板數(shù):應不低于2000。

3溶液制備

3.1對照品溶液的制備取綠原酸對照品適量，加50%甲醇溶液，配制成每1ml含綠原酸0.04mg的溶液，既得。

3.2供試品溶液的制備取本品約2g精密稱定，精密加入50%甲醇溶液25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，并用50%甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，精密量取續(xù)濾液5ml置25ml容量瓶中，精密加入50%甲醇溶液至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液即得。

4金銀花陰性溶液的制備和測定

取除金銀花外其余各味藥材，按處方量配料并制成陰性樣品，用正文中提供的供試品溶液制備方法制陰性空白溶液，并按供試品分析方法測試。結果表明，陰性供試品中的其它成分對綠原酸的測定無干擾。

5檢測波長、流動相的選擇

本實驗選用中國藥典2005年版一部金銀花項下含量測定中綠原酸的吸收波長327nm與流動相配制方法作為檢測波長與流動相。

6線性范圍

精密稱取綠原酸對照品，加50%甲醇溶液，制成濃度為0.2mg/ml的溶液。分別精密吸取該對照品溶液適量，制得綠原酸濃度分別為0.2、0.16、0.12、0.08、0.04、0.02 mg/ml的溶液，按上述色譜條件測定峰面積，以綠原酸濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，綠原酸進樣量與其響應值(0.2μg～2.0μg)之間呈良好的線性關系。

小兒咽扁沖劑線性關系考察

計算回歸方程為Y=16137167.7226X-2206.2688，r2=0.9999

7供試品溶液穩(wěn)定性試驗

取本品(批號080423)，按供試品溶液制備方法制得，用含量測定項下的方法，每隔1～2小時進樣一次，RSD值為0.87%，本品在8小時之內穩(wěn)定。

8精密度試驗

精密吸取對照品溶液10μl，重復進樣6次，結果綠原酸RSD值為0.41%。

9重現(xiàn)性試驗

取本品(批號080423)精密稱取6份，分別按供試品溶液制備方法制得，照含量測定項下的方法操作、測定。結果RSD值為0.25%，該方法重復性好。

10回收率試驗

取已知含量的供試品(080423)，依供試品溶液制備方法處理后，精密加入綠原酸對照品，搖勻，制備成待測的回收率供試品溶液，測定6次。

回收率試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計

編號已知供試品中

綠原酸的量(mg)加入綠原

酸的量(mg)實測綠原酸的量(mg)回收率RSD%

11.24300.500.7387100.890.68%

(n=6)

21.23800.500.738799.86

31.23360.500.738798.98

41.23680.500.738799.62

51.23500.500.738799.26

61.23490.500.738799.24

平均回收率%99.64%

經(jīng)數(shù)據(jù)可見，RSD為0.68%，回收率高且穩(wěn)定。

11三批中試產(chǎn)品含量測定

取中試產(chǎn)品(批號080417、080423、080428)，按含量測定項下的要求制備供試品和對照品溶液，其綠原酸含量值分別為0.7387、0.7515、0.7513 mg/g。

結論:HPLC法測定小兒咽扁沖劑含量符合標準規(guī)定。

參考文獻

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