免疫組化在基層醫院中的應用

【摘要】目的:通過免疫組織化學(IHC)技術的應用不斷提高了基層醫院病理診斷的水平。方法:通過免疫學中抗原抗體結合反應，用特異性抗體檢測組織、細胞內相應的抗原物質。結果:(1)明確診斷，鑒別疑難;(2)協助疾病判斷預后;(3)指導疾病的治療等。結論:(IHC)的應用大大提高了基層醫院的診斷水平，且對醫院臨床科室的發展起到推動作用。

【關鍵詞】免疫組織化學;技術;基層醫院

【中圖分類號】R392-3【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)16-196-2

免疫組織化學技術基本原理:通過免疫學中抗原抗體結合反應，用特異性抗體(單克隆或多克隆)檢測組織、細胞內相應的抗原物質，形成抗原—抗體復合物;此復合物上帶有事先標記的標記物，通過與標記物相對應的檢測系統，如酶底物顯色反應可使之呈現某種顏色，從而可檢測組織細胞內的抗原，以達到診斷、鑒別診斷和研究的目的。

免疫組織化學(IHC)在近十余年來已在國內廣泛開展，幾乎所有的病理科在日常工作中都需做幾項甚至幾十項IHC來輔助病理診斷，IHC已整合入外科病理(診斷病理)，成為醫院病理科不可缺少的輔助技術，它不僅能使病理診斷更精確，更有肋于腫瘤的正確分類分型，還能預測某些腫瘤的預后和提供治療的依據[1]。基層醫院病理科近幾年也在陸續開展，自從去年我科開展免疫組化以來，診斷水平大大提高，且對臨床科室的發展起到了推動作用。但基層醫院由于病種相對較少，人員少，因此要尋找一個比較適合、簡單的方法才是行之有效的，而即用型抗體，尤其適合基層醫院。

1即用型抗體的優點

1.1使用方便。

1.2對于不具備或基本不懂免疫組化技術的人，只要按照說明書的方法使用，也能獲得理想的結果。

1.3不需要配置多種昂貴的微量加樣器。

1.4特別適合于基層單位。

2即用型抗體缺點

2.1價格較濃縮型抗體貴。

2.2即用型抗體不可作為常備貯存抗體。

3抗體的選擇

抗體選擇原則:形態學基礎+抗體特性，形態學基礎=病理醫生的診斷水平，抗體特性=特異性+敏感性。

目前常用的抗體分為四大類:

3.1上皮性標記物。

3.2間葉性標記物。

3.3神經及神經內分泌標記物。

3.4淋巴細胞標記物。

B細胞標記物。

其它。

4免疫組化在病理診斷和研究中的作用[2]

4.1判定細胞屬性，以協助診斷，通過細胞屬性的判定，確定腫瘤的來源如CK(細胞角蛋白)陽性提示腫瘤為上皮源性腫瘤，通過特定抗體標記出細胞內相應的抗原成分，如CK是上皮性標記，前列腺特異性抗原(PAS)僅見于前列腺上皮，甲狀腺球蛋白(Tg)抗體時甲狀腺濾泡性癌的敏感標記，而降鈣素抗體是甲狀腺髓樣癌的特有標記。膠質腫瘤GFAP(膠質纖維酸性蛋白)陽性;平滑肌肌動蛋白陽性提示腫瘤為平滑肌源性;黑色素瘤、軟組織透明細胞瘤呈HMB45(黑色素相關抗原)和melan-A(黑色素A)陽性;血管源性腫瘤CD34(內皮細胞標記物)陽性;胃腸道間質瘤CD117(原癌基因蛋白產物)陽性;B細胞淋巴瘤CD20和CD79a陽性。

4.2鑒定病變性質通過標記Ig輕鏈(κ、λ)可區分部分B細胞性淋巴瘤與B細胞反應性增生，前者常表達單一的Ig輕鏈(κ+/λ+)，后者常為多克隆Ig輕鏈(κ+、λ+)，而標記bcI-2蛋白在區別濾泡性淋巴瘤和反應性濾泡增生有相當意義。在濾泡性淋巴瘤，90%以上腫瘤性濾泡細胞有bcI-2的高表達;而在濾泡反應性增生時，濾泡反應中心的細胞不表達bcI-2蛋白，而套細胞則表達。

4.3發現微小轉移灶某些癌的早期轉移有時與淋巴結內竇性組織細胞增生不易區別。常用組織病理學方法要在一個組織中認出單個轉移性腫瘤細胞或幾個細胞時不可能的，而采用免疫組化方法(如用上皮性標志則十分有助于微小(癌)轉移灶的發現。對轉移性腫瘤也可借助免疫組化標記尋找原發瘤，如骨組織內有前列腺特異性抗原陽性細胞，提示前列腺癌轉移。

4.4探討腫瘤起源或分化表型人們對一些來源不明的腫瘤長期爭論不休，最后通過免疫組化標記取得共識。如顆粒性肌母細胞瘤，曾被認為時肌源性的，但該腫瘤肌源性標記陰性，而神經源性標記陽性，證明為神經來源可能來自神經鞘細胞。分化很差的腫瘤病理上常按細胞形態分為梭形細胞腫瘤、小圓細胞腫瘤等，通過多種標記的聯合應用，也可能確定來源。

4.5確定腫瘤分期判斷腫瘤是原位還是浸潤及有無血管、淋巴管侵襲與分期密切相關。常用病理方法判斷有時是十分困難的，但用免疫組化法可獲得明確結果。如采用層粘連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可清楚顯示基膜的主要成份，一旦證實上皮性癌突破基膜，就不是原位癌。而是浸潤癌，其預后是不同的。如乳腺肌上皮缺失加上基膜突破，就是浸潤性癌。用第八因子相關蛋白、D2-40等顯示血管和淋巴管內皮細胞的標記物則可清楚顯示腫瘤對血管或淋巴管的浸潤。對許多腫瘤的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，這是主要的鑒別依據，同時也有治療及預后意義。

4.6免疫組化標記中與預后有關的標記物大致可分為三類①類固醇激素受體:如雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)等，它們與乳腺癌的關系已獲公認，性激素受體陽性者內分泌治療效果較好，預后也較好。相似的結果也見于子宮內膜癌和卵巢癌。②腫瘤基因標記物;如癌基因CerB2，P53蛋白等，在腫瘤中高度表達者預后較差;而nm23蛋白高度表達者，腫瘤轉移率較低，預后較好。③細胞增殖性標記物:如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki67等，表達指數越高，表明其增殖指數越活躍，惡性度增高，預后不良，其中以惡性淋巴瘤、乳腺癌較為明顯。而且在乳腺癌的研究中發現Ki-67、EGFR陽性者，淋巴結轉移率高，并與激素受體的表達呈負相關。

4.7輔助的疾病診斷和分類人體的免疫性疾病，主要是自身免疫性疾病，如腎小球腎炎、皮膚自身免疫性疾病等，可用免疫組化方法對組織細胞內的免疫球蛋白、補體、免疫復合物等進行檢測以輔助診斷。某些免疫組化的分類及分型也是在免疫組化的基礎上建立的。內分泌腫瘤如垂體前葉腺瘤，根據其分泌功能可分為生長激素腺瘤、泌乳素腺瘤等10型;胰導細胞瘤的功能分類為胰導素瘤、高血糖素瘤等6種;惡性淋巴瘤根據瘤細胞表面標記不同可分為T細胞性、B細胞性。腎小球腎炎的免疫學分類亦需免疫組化或免疫熒光技術。

4.8尋找感染病因人體疾病的致病微生物中有的在常規病理檢查中不易發現，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平的結構，在細胞水平上難以發現，通過免疫組化方法則可明確發現病原體抗原部位以及定量，如巨細胞病毒(CMV)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)等，已有商品化標記物幫助解決病因診斷問題等。

4.9指導疾病的治療如乳腺癌c-erbB-2(+++)是用赫賽汀(Herceptin)治療的指征;胃腸道間質瘤CD117(+)提示可用格列衛治療。

參考文獻

[1] 劉彤華.免疫組織化學規范化的問題[J].中華病理學雜志，2008.

[2] 戴光強，龔西騟.診斷病理學分冊[M].合肥:安徽科學技術出版社，2001.