許艷茹
血液細菌培養是對菌血癥和敗血癥診斷和治療的依據,為了解我院住院兒童使用雙相血培養瓶做血培養的結果及病原菌種類,對我院2008年8月至2010年2月330例臨床疑似菌血癥和敗血癥的住院患兒采用法國生物-梅里埃公司生產的需氧雙相血培養瓶進行血液培養。結果如下。
1.1 標本來源 330例血培養標本均來自本院住院患兒,其中150例患者在不同時間內取靜脈血2次,180例患者取一次靜脈血。
1.2 儀器與材料 雙相血培養瓶、ATB Expression自動細菌鑒定儀及細菌鑒定和藥敏卡條均為法國-梅里埃公司生產;分離用培養基為鄭州貝瑞特公司生產;腸道菌因子血清、沙門菌屬和志賀菌屬多價及單價血清購自衛生部蘭州生物品研究所。
1.3 質量控制菌株 大腸埃希菌ATCC25922,金黃色葡萄球菌ATCC25923,銅綠假單胞菌ATCC27853。
1.4 方法 無菌手續取靜脈血5 ml注入雙相血培養瓶,搖勻、35℃每隔24 h觀察肉湯中和瓊脂上有無細菌生長。對有細菌生長者,均采用法國生物-梅里埃公司生產的ATB Expression系統進行鑒定及藥敏試驗。觀察7 d無細菌生長則報告陰性。
2.1 330例患兒中共分離出細菌40株,總陽性率12.12%,其中革蘭陽性菌27例占67.5%,革蘭陰性菌13例占32.5%,各病原菌種類分離率見表1。

表1 40株病原菌各菌種的分離率(%)
2.2 兩次血培養的150例患兒中有22例有細菌生長,占14.67%,其中兩瓶均有細菌生長的20例,一瓶有細菌生長的2例,做一次血培養的180例患兒中有細菌生長者18例,占10.0%。
330例患兒中分離出40株致病菌,陽性分離率12.12%,其中葡萄球菌屬比例最高,占所分離病原菌的55.0%,占革蘭陽性菌的81.5%,以金黃色葡萄球菌22.5%,表皮葡萄球菌20.0%為主;陰性菌以大腸埃希菌17.5%為主。不同地區病原種類略有差異,我院住院兒童血液感染主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌為主,這可能與我院病原種類有關,這些血培養標本主要來自有臍炎、膿皰疹、燒傷等皮膚感染發熱引起的菌血癥、敗血癥患兒。革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌占總分離菌的比率與有關報道[1]大致相同。
150例做兩次血培養的患者中有22例細菌生長,其中兩瓶均生長的20例,一瓶生長的2例;另外兩次抽血比一次培養陽性率高4.67%。可見血培養1次抽血易漏檢。在檢出細菌的40例患兒中,有2例為復數菌感染(大腸埃希菌和表皮葡萄球菌)其中1例兩次抽血均為復數菌,1例第二次抽血時為大腸埃希菌,故血培養發現兩種或兩種以上細菌時,兩次抽血可證實是致病菌或污染菌。
菌血癥患者中有5% ~10%[2]是多菌性菌血癥,進行次代培養,應提供適用于腸道的、非發酵菌、需氧性、厭氧性和苛氧性細菌生長的培養基,以及其培養條件,以免遺漏。我們用雙相血培養瓶做了330例血液需氧菌培養,但不能排除厭氧菌感染的可能。為提高檢出率,建議有條件時應同時做需氧及厭氧兩種血培養。
[1]許淑珍,張淑蘭,陳力.Bactec 9120血培養系統檢測細菌影響因素的探討.中華醫學檢驗雜志,1997,20:272-274.
[2]葉應嫵,王毓三,主編.全國臨床檢驗操作規程.東南大學出版社,2006:741.