紅花黃色素氯化鈉注射液細菌內毒素檢查方法的建立

段陳平, 劉 芳, 高天紅

(1山西華輝凱德制藥有限公司, 晉中 030600; 2山西省藥品檢驗所)

紅花黃色素氯化鈉注射液用于治療冠心病穩定型勞累性心絞痛的有效藥物,現參照文獻[2-4],按照《中國藥典》2005年版一部附錄ⅩⅢ D細菌內毒素檢查法[1]及附錄ⅩⅧ B中藥注射劑安全性檢查指導原則[1],研究紅花黃色素氯化鈉注射液對細菌內毒素試驗的干擾情況,建立其細菌內毒素限量檢查的方法。

1 試藥與儀器

紅花黃色素氯化鈉注射液(批號為90301019、90301028、90301031,規格 100 ml/瓶,山西華輝凱德制藥有限公司)。細菌內毒素工作標準品(WSE)(批號:2007-5,效價:100 EU/支,中國藥品生物制品檢定所)。鱟試劑(TAL):廈門鱟試劑廠(批號:071160,λ=0.125 EU/ml,規格為0.5 ml/支 ;批號:0902063,λ=0.03 EU/ml,規格為0.5 ml/支 );湛江博康海洋生物有限公司(批號為0806183,λ=0.125 EU/ml,規格為0.5 ml/支;批號為081125,λ=0.03 EU/ml,規格為0.5 ml/支);湛江安度斯生物有限公司(批號:0710190,λ=0.25 EU/ml,規格為0.5 ml/支);細菌內毒素檢查用水(BET水)(批號:2006-12,規格為10 ml/支,中國藥品生物制品檢定所)。超凈工作臺(蘇州凈化設備有限公司);2型旋渦混合器(上海精科實業有限公司);試驗所用玻璃器皿均經 250℃干烤至少 1 h。

2 方法與結果

2.1 鱟試劑靈敏度復核 按中國藥典 2005年版一部附錄ⅩⅢ D細菌內毒素檢查法進行,所用鱟試劑的靈敏度測定值 λc均在 0.5λ-2.0λ之間,符合規定,可用于本試驗,結果見表1。

表1 鱟試劑靈敏度復核結果Tab 1 The TAL sensitive test results

2.2 供試品細菌內毒素限值(L)確定 L=K/M式中 K為按規定的給藥途徑不同,人每千克體重每小時可接受的內毒素最大劑量,注射劑的K=5 EU/(kg·h),M為人體每千克體重每小時給藥的最大劑量,參考使用說明書以紅花黃色素計,人用最大劑量為100 ml/次,中國人體重按 60 kg計,M=1.7 ml/kg,L=K/M=3 EU/ml,而大容量注射劑細菌內毒素限值為0.5 EU/ml,本品限值標準定為L=0.5 EU/ml。……