甲型H5N1流感病毒M2與HA雙基因載體疫苗在小鼠體內的免疫學評價

郭建強，姚立紅，陳愛珺，徐一，劉曉宇，舒躍龍，張智清

1 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 病毒基因工程國家重點實驗室，北京 100052

2 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 傳染病預防控制國家重點實驗室 國家流感中心，北京 100052

醫學與免疫生物技術

甲型H5N1流感病毒M2與HA雙基因載體疫苗在小鼠體內的免疫學評價

郭建強1，姚立紅1，陳愛珺1，徐一1，劉曉宇1，舒躍龍2，張智清1

1 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 病毒基因工程國家重點實驗室，北京 100052

2 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所 傳染病預防控制國家重點實驗室 國家流感中心，北京 100052

高致病性H5N1亞型禽流感病毒 (AIV) 嚴重威脅到人類健康，因此研制高效、安全的禽流感疫苗具有重要意義。以我國分離的首株人H5N1亞型禽流感病毒 (A/Anhui/1/2005) 作為研究對象，PCR擴增基質蛋白2 (M2) 和血凝素 (HA) 基因全長開放閱讀框片段，構建共表達H5N1亞型AIV膜蛋白基因M2和HA的重組質粒pStar-M2/HA。此外，還通過同源重組以293細胞包裝出表達M2基因的重組腺病毒Ad-M2以及表達HA基因的重組腺病毒Ad-HA。用間接免疫熒光 (IFA) 方法檢測到了各載體上插入基因的表達。按初免-加強程序分別用重組質粒pStar-M2/HA和重組腺病毒Ad-HA+Ad-M2免疫BALB/c小鼠，共免疫4次，每次間隔14 d。第1、3次用DNA疫苗，第2、4次用重組腺病毒載體疫苗，每次免疫前及末次免疫后14 d采集血清用于檢測體液免疫應答，末次免疫后14 d采集脾淋巴細胞用于檢測細胞免疫應答。血凝抑制 (HI) 實驗檢測到免疫后小鼠血清中的 HI活性。ELISA實驗檢測到免疫后小鼠血清中抗H5N1亞型流感病毒表面蛋白的IgG抗體。……