古達清
廣州市番禺區鐘村醫院(511495)
克雷伯菌已成為人體感染的重要病原菌之一。臨床分離最多的是肺炎克雷伯菌肺炎亞種,而解鳥氨酸克雷伯菌引起的感染較為少見。但該菌與醫院感染有著密切的關系。有關該菌生化特性及耐藥率報道如下。
1.1.1 標本來源
對廣州市番禺區鐘村醫院門診現住院的肺科患者,留取的下呼吸道晨痰,置無菌消毒盒中及時送檢。
1.1.2 標準質控菌
ATCC25922大腸挨希菌;ATCC700603肺炎克雷伯菌。培養基、血瓊脂培養基、麥康凱培養基與雙糖管配制。
1.1.3 菌株鑒定
采用腸桿菌AP120E生化條。
1.1.4 抗菌藥敏紙片
阿莫西林(AMO)、阿莫西林+棒酸(AMC)、哌拉西林(PIC)、哌拉西林+他唑巴坦(TZP)、替卡西林(TIC)、頭孢噻吩一代(CFT)、頭孢噻肟三代(CTX)、頭孢曲松(CAO)、頭孢他啶(CAZ)、氨曲南(ATM)、阿胺培南(IME)、復方新諾明(TSU)、妥布霉素(TOB)、丁胺卡那霉素(AKN)、慶大霉素(GEN)、奈替米星(NET)、培氟沙星(PEF)、環丙沙星(CIP)。
向痰液內等量pH 7.6的1%胰酶溶液,放置37℃90min使痰液均質化,然后用接種環取痰分別接種于血瓊脂平板和麥康凱平板,培養24h,菌落生長。革蘭染色為陰性桿菌,氧化酶陰性,生化反應為發酵型者,則用API 20E生化條鑒定。
K-B法。結果根據NCCLS標準法規進行判定。
采用NCCLS推薦的初篩和確證試驗。
解鳥氨酸克雷伯菌API 20E生化條鑒定結果見表1,17株產ESBLs的院內感染解鳥氨酸克雷伯菌除對亞胺南92.31%敏感外,對其他10多種抗生素的耐藥率普遍較高,具體情況見表2。
解鳥氨酸克雷伯菌鑒定的關鍵為:動力陰性,脲酶陽性,分解鳥氨酸及賴氨酸,而肺炎克雷伯菌肺炎亞種為陰性。從藥物分析顯示,該菌可對亞胺培南92.31%敏感,而同時對多種β-內酰胺類抗生素耐藥,如對5種抗生素的耐藥率分別為阿莫西林100%,替卡西林100%,復方新諾明96.13%,慶大霉素92.13%,頭孢噻吩一代96.15%。此現象可能與細菌質粒可編碼兩種β-內酰胺酶如TEM-1和PSE-1,并與細菌基因組編碼的β-內酰胺酶聯合作用,從而產生多重耐藥現象[5]。現已研究ESBLs是β-內酰胺酶(如TEM、SHV)個別氨基酸的點突變形成[6]。它們的特點是對三代頭孢菌素和氨曲南都耐藥。當對三代頭孢菌素和氨曲南任何一種表現不敏感,將證明潛在有ESBLs產生。
本次實驗發現,26株解鳥氨酸克雷伯菌ESBLs陽性率達65.38%。表明廣州市番禺區鐘村醫院肺科存在產ESBLs菌株流行。而且該科患者已成為產ESBLs細菌傳染源。已知的產ESBLs菌感染或定值的危險因素有:近期手術、機械治療、長期住院,接觸抗生素尤其是超廣譜β-內酰胺類制劑。經病案調查所有ESBLs陽性菌感染患者在分離細菌之前都使用過三代頭孢他啶;而ESBLs陰性菌感染患者中只有10.3%在ESBLs菌細菌分離前使用過三代頭孢菌素,說明三代頭孢菌素的長期使用是該菌產生ESBLs的重要原因。由于ESBLs菌株的出現,也是導致該菌在短時間內引起科室內交叉感染的主要原因。

表2 解鳥氨酸克雷伯菌對抗生素的反應
由于抗生素具有明顯的選擇性壓力,合理應用抗生素則是對抗多重耐藥菌的一個重要手段。有報道指出在醫院通過嚴格使用抗生素和實行隔離預防措施,使耐頭孢他啶的克雷伯菌減少60%[7]。另一起有多重耐藥解鳥氨酸克雷伯菌引起的爆發感染也因清除污染物,在要求醫務人員嚴格洗手,隔離被感染的患者而得到控制。
總之,對于任何醫院感染所致的多重耐藥都應從患者、致病菌及抗生素等幾個方面綜合考慮,針對具體情況合理應用抗菌藥物。
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[5]阮良,徐秀華,文細毛.克雷伯菌β-內酰胺酶的測定及其與耐藥質粒的關系[J].中華醫院感染學雜志,1997,7(2):74.
[6]桂炳東,賈坤如,胡龍華等.大腸埃希桿菌和克雷伯菌屬超廣譜β-內酰胺酶的測定及耐藥性[J].江西醫學檢驗,1999,17(2):133.
[7]胡東梅,陳世平.超廣譜β-內酰胺酶與醫院感染的關系[J].中華醫院感染學雜志,2000,10(3):240.